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DOI: 10.3791/61704-v
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This study details a protocol for preparing horizontal hippocampal-entorhinal cortex slices from mice, enabling investigation of network oscillations in acute brain slice preparations. The method emphasizes maintaining spontaneous activity through specific incubation and recording conditions using artificial cerebrospinal fluid.
Este protocolo describe la preparación de rodajas horizontales de corteza hipocampal-entorrinaal (HEC) de ratones que exhiben actividad espontánea de ondulación de onda aguda. Las rodajas se incuban en una cámara de retención de interfaz simplificada y las grabaciones se realizan en condiciones sumergidas con líquido cefalorraquídeo artificial de flujo rápido para promover la oxigenación tisular y la aparición espontánea de la actividad a nivel de red.
Con este protocolo, los investigadores pueden investigar los mecanismos subyacentes a las oscilaciones de la red del hipocampo en preparaciones agudas de cortes de cerebro de ratón. En esta preparación, los registros se realizan en condiciones sumergidas en cortes generando oscilaciones espontáneas de la red, lo que permite realizar técnicas farmacológicas y optogenéticas, y visualizar registros de una sola célula. Para la perfusión transcárdica, inmediatamente antes de retirar el ratón de la cámara de isoflurano, llene la tapa de una placa de Petri con tres a cinco milímetros de solución de sacarosa enfriada y llene el fondo de la placa de Petri con aproximadamente un centímetro de solución de sacarosa enfriada.
Transfiera rápidamente el ratón anestesiado a la almohadilla absorbente izquierda y use tres piezas de cinta adhesiva para asegurar las extremidades delanteras y la cola. Con unas pinzas de tejido grandes y unas tijeras quirúrgicas, cubra la piel y haga una incisión longitudinal desde la parte inferior del esternón hasta la parte superior del pecho. Use las pinzas para tirar hacia arriba del esternón y use las tijeras para cortar el diafragma.
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