Una prueba métrica para evaluar la memoria de trabajo espacial en ratas adultas después de una lesión cerebral traumática

La lesión cerebral traumática se asocia comúnmente con el deterioro de la memoria. Aquí, presentamos un protocolo para evaluar la memoria de trabajo espacial después de una lesión cerebral traumática, a través de una tarea métrica. Las principales ventajas de las tareas métricas incluyen la posibilidad de observación dinámica, reproducibilidad de bajo costo, relativa facilidad de implementación y entorno de bajo estrés.

Para evaluar la puntuación de gravedad neurológica después de una lesión por percusión del líquido parasagital, coloque a la rata Sprague Dawley adulta en el centro de un círculo de 50 centímetros de diámetro, tres veces y controle su capacidad para salir del círculo. Para probar la pérdida del reflejo de enrechamiento, coloque al animal sobre su espalda en la palma de la mano y dé una puntuación de uno si la rata es capaz de ensegurarse. Para detectar hemiplejia, evalúe la incapacidad de la rata para resistir el posicionamiento forzado.

Para probar la flexión reflexiva de la extremidad posterior, levante al animal por su cola. Para probar la capacidad de caminar derecho, coloque la rata en el suelo. Para probar el reflejo del pabellón auricular, realice una estimulación ligera y táctil para observar la retracción del oído.

Para probar el reflejo corneal, aplique ligeramente un palo suave en el ojo y mida la respuesta de parpadeo. Para probar el reflejo de sobresalto, arrastre un bolígrafo por la parte superior de la jaula de alambre y registre la respuesta del animal. Para calificar la pérdida del comportamiento de búsqueda en la postración, coloque a la rata en un nuevo entorno y observe si la rata mueve sus bigotes, olfatea o corre.

Luego pruebe los reflejos de las extremidades para su colocación en las extremidades anteriores izquierda y derecha, seguidas de las extremidades posteriores izquierda y derecha. Para probar el equilibrio, realice una tarea de equilibrio de haz colocando la rata en una viga de 1,5 centímetros de ancho, para una sesión de 20, 40 y mayor que la segunda sesión. Luego ejecute una prueba de caminata de viga utilizando tres vigas de diferentes anchos.

Antes de realizar la tarea métrica, coloque una plataforma circular negra de 200 centímetros de diámetro, un centímetro de grosor, sobre una mesa de 80 centímetros de altura y coloque dos objetos en el centro de la plataforma, a 68 centímetros de distancia. Instale una cámara con el software informático necesario para capturar, guardar y procesar datos, a una altura de 290 centímetros del piso. Un día antes del análisis coloque a la rata en la plataforma durante 10 minutos para habituar al animal al nuevo entorno.

El día de la tarea, coloque la rata en el extremo de la plataforma, equidistante de los objetos durante un período de habituación de 15 minutos y comience a grabar. Al final del período de habituación experimental, transfiera la rata a una jaula individual durante cinco minutos y limpie la plataforma con alcohol del cinco al diez por ciento. Reduzca la distancia entre los objetos a 34 centímetros, luego coloque la rata en la plataforma durante cinco minutos mientras registra su actividad de exploración.

Limpie la plataforma nuevamente, antes de continuar con el siguiente animal. Antes de analizar los archivos de video, inserte la clave de hardware del software, luego inicie el software de seguimiento de video y abra la plantilla preestablecida. Después de verificar, duplicar y cambiar el nombre de la configuración de control y detección de prueba de arena en el campo de visión principal, haga clic con el botón derecho del mouse para seleccionar el fondo de captura.

En el menú examinar, seleccione la ubicación del archivo de vídeo que se utilizará como imagen de fondo. Capture la imagen y marque las áreas y zonas investigadas para calibrar la imagen para su análisis. Realice la misma configuración para la configuración de control y detección de prueba.

Después de descargar la lista de archivos de video para su análisis de la lista de prueba, agregue los videos e indique la ubicación con la configuración requerida. A continuación, seleccione adquisición e inicie la prueba y exporte todos los datos a una hoja de cálculo. El grupo de control no muestra ningún déficit neurológico, 48 horas después de la lesión simulada.

Después de una LCT, los déficits neurológicos son significativamente mayores en animales heridos machos y hembras. Durante la tarea métrica, el tiempo de exploración del objeto es significativamente más corto para las ratas TBI macho que para las ratas macho operadas simuladamente. El mismo patrón se observa para las ratas hembras operadas con LCT y las ratas hembra operadas simuladamente.

Siguiendo la tarea métrica, podemos realizar otros métodos para la evaluación de la memoria, como el laberinto de Barnes y las tareas topológicas y de laberinto de agua. La tarea métrica también permite una mayor investigación sobre el deterioro de la memoria en modelos comparables de daño neurológico, como modelos de lesión cerebral axonal difusa y accidente cerebrovascular.