Name: Infusión de la glándula parótida retrógrada a través del conducto de Stensen en un primate no humano para la entrega de genes vectores (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2021-08-12T14:00:00.000+00:00
Duration: 3 min 50 s
Description: Aprenda la infusión retrógrada de la glándula parótida en primates no humanos para terapia génica y vacunación. Esta técnica reproducible permite la entrega de vectores génicos de forma accesible.

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Los autores quieren agradecer al Sr. Cagney Gentry su apoyo audiovisual en la filmación del procedimiento. También queremos reconocer al centro médico Hefner VA por su apoyo académico en la búsqueda de este proyecto.

Todos los procedimientos se realizaron en wake Forest School of Medicine Clarkson Campus para estudios en animales. Se consultó al Comité Institucional de Cuidado y Uso de Animales (IACUC) por consideraciones éticas y se sometieron a revisión los detalles de los procedimientos. Wake Forest IACUC aprobó nuestro protocolo de estudio y todos los procedimientos se realizaron bajo el protocolo aprobado por IACUC #A17-147.
1. Preparación del dispositivo de perfusión
<ol><li>Corte el tamaño 10 Tubo de polietileno (PET10) en longitudes de 25 cm con un par de tijeras.</li>
	<li>Marque PET10 a 1 cm y 2 cm de un extremo utilizando un marcador negro.</li>
	<li>Rellenar previamente 0,5 ml de solución de Ad5-EGFP (109 partículas virales/ml) en una jeringa de 1 ml (tuberculina).</li>
	<li>Deslice el extremo no marcado del tubo PET10 sobre una aguja de 29-31 G unida a una jeringa. En general, es más fácil realizar esta tarea bajo aumento.</li>
	<li>Infundir la solución en el PET10 hasta que el tubo esté completamente lleno (gota visible en el extremo libre).</li>
	<li>Use EPP estándar completo, que incluya exfoliantes quirúrgicos, bata de manga larga, guantes impermeables, máscara quirúrgica, protector facial, capó para el cabello y cubiertas para zapatos.</li>
</ol>2. Preparación del animal
NOTA: Se utilizaron macacos Cynomolgus para la demostración en video. La anatomía de otros primates no humanos y humanos es muy similar, y el protocolo debe ser traducible a otras especies.
<ol><li>Inyecte por vía subcutánea 0,05 mg/kg de atropina 15 min antes del procedimiento para minimizar las secreciones salivales y optimizar la distribución y retención de la infusión.</li>
	<li>Proporcionar anestesia con jeringas de 5 ml con ketamina/midazolam intramuscular (10-15 mg/kg de ketamina y 0,01-0,05 mg/kg de midazolam). Confirme la anestesia adecuada cuando el animal sedado quede inconsciente y no pueda reaccionar a los estímulos.</li>
</ol>3. Realización del procedimiento
<ol><li>Use retractores orales para sujetar la boca abierta.<ol>
<li>Coloque la almohadilla de goma de un extremo del retractor en el paladar duro detrás de los dientes superiores en el lado de la boca opuesto a la glándula que se infundirá. Coloque la almohadilla de goma del otro extremo en el canino inferior en el mismo lado que el retractor superior. Permita suavemente que la acción del resorte del retractor se expanda y abra la boca.</li>
	</ol>
</li>
	<li>Identifique la papila parótida, la abertura del conducto de Stensen, en la mejilla posterior, adyacente al2º molar superior. Esto se visualiza mejor usando bucles dentales para la ampliación.</li>
	<li>Dilate suavemente la papila parótida con la punta del dilatador cónico. Es mejor colocar el punto del dilatador en el centro o la abertura de la papila y luego girarlo suavemente hacia adelante y hacia atrás. El punto debe entrar lentamente en la papila y dilatarla durante aproximadamente 20 - 30 s de rotación suave.</li>
	<li>Inserte el tubo PET10 en la papila parótida dilatada. Esto se logra mejor sosteniendo el extremo marcado del tubo PET10 con pinzas aproximadamente a 0,5 cm del extremo distal e insertando suavemente la punta del tubo en la papila dilatada.<ol>
<li>Avance suavemente el tubo, lo que a menudo se ve facilitado por pequeños movimientos giratorios para ayudar a que el tubo se deslice, seguido de un reajuste de las pinzas 0,5 cm proximal al agarre anterior. Repita esto hasta que la marca de 2 cm llegue a la papila parótida.</li>
	</ol>
</li>
	<li>Aplique cianoacrilato en la mejilla alrededor de la papila y el tubo insertado y espere a que se seque (no se registra una cantidad específica, solo lo suficiente para sellar la entrada de la papila del conducto de Stensen). Esto generalmente toma menos de un minuto y ayuda a sellar la papila parótida y reducir el derrame de infusión en la cavidad oral.</li>
	<li>Empuje lentamente el contenido de la jeringa durante 5 minutos a una velocidad de 100 μL/min. Esta velocidad de infusión lenta minimiza el riesgo de lesión del conducto debido al aumento repentino de la presión intraductal.</li>
	<li>Deje pet10 en su lugar durante al menos 5 minutos después de que se complete la infusión. Mantenga el conducto sellado y permita que la infusión permanezca en la glándula parótida.</li>
	<li>Retire el PET10 con una tracción suave. El cianoacrilato se liberará con el tubo.</li>
	<li>Repita los pasos 3.2 a 3.8 en el lado opuesto.</li>
	<li>Libere lentamente los retractores orales después de que se hayan infundido ambas parótidas y se hayan eliminado ambos tubos de PET10. NOTA: Todo el procedimiento para ambas partes debe tomar menos de 30 minutos.</li>
</ol>4. Cuidados post-procesales
<ol><li>Después de que se complete la infusión y se descanule el conducto de Stensen, observe a los animales hasta que el efecto de la anestesia desaparezca (generalmente entre 20-30 minutos después del procedimiento).</li>
	<li>Ofrezca al animal bebidas y luego comida después de que estén completamente despiertos y reanude el cuidado de rutina.</li>
</ol>

<ol><li>Isenman, L., Liebow, C., Rothman, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+secretion+of+mammalian+digestive+enzymes+by+exocrine+glands%5BTitle%5D)+AND+%22The+American+Journal+of+Physiology%22%5BJournal%5D)">The secretion of mammalian digestive enzymes by exocrine glands.</a> The American Journal of Physiology. 276, 223-232 (1999).</li>
<li>Perez, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Salivary+epithelial+cells%3A+An+unassuming+target+site+for+gene+therapeutics%5BTitle%5D)+AND+%22The+International+Journal+of+Biochemistry+%26+Cell+Biology%22%5BJournal%5D)">Salivary epithelial cells: An unassuming target site for gene therapeutics.</a> The International Journal of Biochemistry & Cell Biology. 42, 773-777 (2010).</li>
<li>Kochel, T. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+dengue+virus+serotype-1+DNA+vaccine+induces+virus+neutralizing+antibodies+and+provides+protection+from+viral+challenge+in+Aotus+monkeys%5BTitle%5D)+AND+%22Vaccine%22%5BJournal%5D)">A dengue virus serotype-1 DNA vaccine induces virus neutralizing antibodies and provides protection from viral challenge in Aotus monkeys.</a> Vaccine. 18, 3166-3173 (2000).</li>
<li>Ponzio, T. A., Sanders, J. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+salivary+gland+as+a+target+for+enhancing+immunization+response%5BTitle%5D)+AND+%22Tropical+Diseases%2C+Travel+Medicine+and+Vaccines%22%5BJournal%5D)">The salivary gland as a target for enhancing immunization response.</a> Tropical Diseases, Travel Medicine and Vaccines. 3, 4(2017).</li>
<li>Baum, B. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Early+responses+to+adenoviral-mediated+transfer+of+the+aquaporin-1+cDNA+for+radiation-induced+salivary+hypofunction%5BTitle%5D)+AND+%22Proceedings+of+the+National+Academy+of+Sciences+of+the+United+States+of+America%22%5BJournal%5D)">Early responses to adenoviral-mediated transfer of the aquaporin-1 cDNA for radiation-induced salivary hypofunction.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 109, 19403-19407 (2012).</li>
<li>Voutetakis, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sorting+of+Transgenic+Secretory+Proteins+in+Rhesus+Macaque+Parotid+Glands+After+Adenovirus-Mediated+Gene+Transfer%5BTitle%5D)+AND+%22Human+Gene+Therapy%22%5BJournal%5D)">Sorting of Transgenic Secretory Proteins in Rhesus Macaque Parotid Glands After Adenovirus-Mediated Gene Transfer.</a> Human Gene Therapy. 19, 1401-1405 (2008).</li>
<li>Niedzinski, E. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Enhanced+systemic+transgene+expression+after+nonviral+salivary+gland+transfection+using+a+novel+endonuclease+inhibitor%2FDNA+formulation%5BTitle%5D)+AND+%22Gene+Therapy%22%5BJournal%5D)">Enhanced systemic transgene expression after nonviral salivary gland transfection using a novel endonuclease inhibitor/DNA formulation.</a> Gene Therapy. 10, 2133-2138 (2003).</li>
<li>Niedzinski, E. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Zinc+Enhancement+of+Nonviral+Salivary+Gland+Transfection%5BTitle%5D)+AND+%22Molecular+Therapy%22%5BJournal%5D)">Zinc Enhancement of Nonviral Salivary Gland Transfection.</a> Molecular Therapy. 7, 396-400 (2003).</li>
<li>Samuni, Y., Baum, B. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Gene+delivery+in+salivary+glands%3A+From+the+bench+to+the+clinic%5BTitle%5D)+AND+%22Biochimica+et+Biophysica+Acta+-+Molecular+Basis+of+Disease%22%5BJournal%5D)">Gene delivery in salivary glands: From the bench to the clinic.</a> Biochimica et Biophysica Acta - Molecular Basis of Disease. , (2011).</li>
<li>Voutetakis, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Adeno-Associated+Virus+Serotype+2-Mediated+Gene+Transfer+to+The+Parotid+Glands+of+Nonhuman+Primates%5BTitle%5D)+AND+%22Human+Gene+Therapy%22%5BJournal%5D)">Adeno-Associated Virus Serotype 2-Mediated Gene Transfer to The Parotid Glands of Nonhuman Primates.</a> Human Gene Therapy. 18, 142-150 (2007).</li>
</ol>

Los autores no tienen nada que revelar.

Aquí describimos un protocolo de infusión retrógrada en la glándula parótida a través del conducto de Stensen. La metodología descrita ofrece orientación que potencialmente puede ser utilizada por investigadores que exploran la utilidad del tejido salival como un sitio para la terapia génica y otras aplicaciones.
Hay múltiples pasos críticos para garantizar el éxito del procedimiento. En primer lugar, todos los pasos del procedimiento deben completarse suavemente. El refuerzo contundente de la...

Si bien las glándulas salivales son bien conocidas por su producción exocrina de saliva, los investigadores han reconocido durante mucho tiempo su capacidad para secretar proteínas directamente en el torrente sanguíneo1,lo que las convierte en un objetivo potencial para la terapia génica para la administración sistémica, como las hormonas de reemplazo o la producción de anticuerpos. De hecho, las glándulas salivales ofrecen varias ventajas sobre otros objetivos tisulares, como la capacidad inherente de producir proteínas para la secreción (una propiedad de la que carecen los músculos), la encapsulación pesada que puede limitar la difusión vectorial y el tejido bien diferenciado que proporciona estabilidad para los vectores no integradores. Además, en caso de un evento adverso grave, las glándulas salivales no son críticas para la vida y pueden extirparse quirúrgicamente. Aunque no son inmediatamente intuitivas, las glándulas parótidas también son fácilmente accesibles desde la boca a través de su conducto excretor principal, el conducto2de Stensen.
Dadas las ventajas del tejido salival para la terapia génica, existe un creciente interés en explorar este objetivo tisular. Ya se han realizado numerosos estudios en modelos de roedores, caninos y primates no humanos y al menos un ensayo clínico en humanos está en marcha3,4,5. Para explorar y desarrollar aún más la utilidad de este objetivo tisular con fines de terapia génica, se necesitarán más estudios de primates no humanos. Este artículo describe un método para acceder a las glándulas parótidas a través del conducto de Stensen para entregar un gen vector para la transducción en el modelo de primates no humanos. Para demostrar visiblemente la entrega de la infusión y la anatomía del conducto a medida que ingresa a la glándula, se realizó fluoroscopia con radiocontraste. Para demostrar la transducción exitosa de un vector, se utilizó un gen egfp vectorado por adenovirus serotipo 5 (Ad5). Ad5 es un vector bien descrito capaz de transducir tejido salival. Aunque es demasiado inmunogénico para el uso clínico final, se eligió un vector Ad5 para este estudio de demostración para garantizar una transducción eficiente. La evaluación de la producción mejorada de proteína fluorescente verde (EGFP) es un método bien descrito para demostrar la transcripción y traducción exitosas de un gen vectorado después de la transducción y se realizó aquí.

<table><tbody><tr><td>500 y micro; L Jeringas U100 con agujas de calibre 30</td><td>Becton Dickinson</td><td>328466</td><td>aguja fija para reducir el desperdicio</td></tr><tr><td>Adhesivo (p. ej., Ethicon Dermabond)</td><td>Varios</td><td></td><td>Adhesivo de cianoacrilato para sellar y mantener el tubo en el conducto durante la infusión.</td></tr><tr><td>Solución inyectable de atropina</td><td>Patterson Veterinary</td><td>07 869-6061</td><td>Atropina inj. 0.54 mg/mL</td></tr><tr><td>BD Jeringas de insulina ultrafinas 30G</td><td>Walmart</td><td>N/A</td><td>Disponible en tamaños de 0.5 mL y 1.0 mL.</td></tr><tr><td>Cianoacrilato (pegamento médico)</td><td>Ethicon</td><td>DNX12</td><td>Dermabond adhesivo cutáneo tópico</td></tr><tr><td>Bucles dentales con luz</td><td>Amazon (DDP)</td><td>B012M3IV80</td><td>Se utiliza para mejorar la visualización de la papila del conducto de Stensen</td></tr><tr><td>Dilatador Lagrimal Infantil</td><td>Surgipro</td><td>SPOI-137</td><td></td></tr><tr><td>Solución inyectable de ketamina</td><td>Patterson Veterinary</td><td>07-803-6637</td><td>Ketaset inj. 100 mg/mL</td></tr><tr><td>Dilatador Lagrimal</td><td>Surgipro</td><td>SPOI-132</td><td>Se utiliza para dialatar el conducto de Stensen.</td></tr><tr><td>Solución inyectable de midazolam</td><td>Patterson Veterinary</td><td>07 890-6698</td><td>Midazolam inj. 5mg/mL</td></tr><tr><td>Par de tijeras</td><td>Amazon (DDP)</td><td>N/A</td><td>Se utiliza para cortar el tubo de PET10</td></tr><tr><td>Tubo de polietileno (PE-10)</td><td>Scientific Comodities, Inc</td><td>BB31695-PE/1</td><td>Tubo que conecta la jeringa de 30G y se inserta en el conducto.</td></tr><tr><td>Q-tips</td><td>Walmart</td><td>N/A</td><td>Se utiliza para esparcir cianoacrilato en la mejilla</td></tr><tr><td>Tamaño 10 Tubo de polietileno (PET 10)</td><td>Scientific Commodities</td><td>BB31695-PE/1</td><td>tubo de polietileno de baja densidad</td></tr><tr><td>Abridor</td> bucal para animales pequeños <td>Amazon (DDP)</td><td>B01F3LVJXC</td><td>Se utiliza para mantener abierta la boca del animal.</td></tr><tr><td>Pinzas</td><td>Amazon (DPP)</td><td>N/A</td><td>Se utilizan para insertar el tubo PET10 en el conducto de Stenson</td></tr><tr><td>Cloruro de zinc</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>7646-86-7</td><td>Incluido en las infusiones de ADN plasmídico</td></tr></tbody></table>

infusión de la glándula parótida retrógrada a través del conducto de stensen en un primate no humano para la entrega de genes vectores

Retrograde Parotid Gland Infusion through Stensen's Duct in a Non-Human Primate for Vectored Gene Delivery

Las glándulas salivales son un objetivo tisular atractivo para la terapia génica con resultados prometedores que ya conducen a ensayos en humanos. Son inherentemente capaces de secretar proteínas en el torrente sanguíneo y son fácilmente accesibles, lo que los convierte en sitios de tejido potencialmente superiores para la producción de hormonas de reemplazo o la vacunación por transferencia de genes. Los métodos sugeridos para la administración de genes incluyen la inyección transcutánea y la infusión retrógrada a través de conductos salivales. Demostramos cómo realizar la infusión retrógrada de glándulas salivales (RSGI) en primates no humanos. Describimos los hitos anatómicos importantes, incluida la identificación de la papila parótida, un método atraumático de canulación y sellado del conducto de Stensen que utiliza herramientas dentales básicas, tubos de polietileno y cianoacrilato, y la velocidad adecuada de infusión. Si bien este es el método de parto menos traumático, el método todavía está limitado por el volumen que se puede administrar (<0.5 ml) y el potencial de trauma en el conducto y la glándula. Demostramos mediante fluoroscopia que un infusato se puede administrar completamente en la glándula, y demostramos además por inmunohistoquímica la transducción de un vector típico y la expresión del gen entregado.

Procedimiento, transducción y transcripción exitosos La Figura 1 muestra la papila parótida adyacente al 2º molar en la mejilla superior posterior. La imagen también muestra la colocación correcta del aparato ortopédico bucal, un extremo de goma en el paladar duro y el otro extremo de goma en el canino ipsilateral. La Figura 2 muestra una imagen tomada después de la canulación exitosa de la papila parótida en la marca de 2 cm en el...

Las glándulas salivales se han propuesto como un sitio objetivo tisular para la terapia génica, especialmente en el área de la vacunación por transferencia de genes. Demostramos la entrega de genes en un modelo de primates no humanos utilizando infusión de parótida retrógrada.

Infusión de la glándula parótida retrógrada a través del conducto de Stensen en un primate no humano para la entrega de genes vectores

Salivary glands are an attractive tissue target for gene therapy with promising results already leading to human trials. They are inherently capable of ...

Este protocolo es importante porque demuestra el procedimiento de infusión retrógrada de glándulas salivales en detalle. El procedimiento se puede utilizar por una variedad de razones médicas, como la inmunoprofilaxis vectorial o la terapia génica. Esta técnica es fácil de aprender y reproducir.Los autores han logrado realizar este procedimiento con éxito en múltiples ocasiones a pesar de no ser cirujanos orales, ni tener tales antecedentes. Después de la anestesia, use pastillas dentales para la ampliación e identifique la papila parótida o la abertura del conducto de Stenson en la mejilla posterior adyacente al segundo molar superior. Dilate suavemente la papila parótida colocando el punto de un dilatador cónico en el centro o la abertura de la papila y gira el dilatador hacia adelante y hacia atrás durante aproximadamente 20 a 30 segundos.A continuación, con pinzas sostenga el extremo marcado del tubo de polietileno unido a la jeringa que contiene infusato a aproximadamente 0,5 centímetros del extremo distal e inserte suavemente la punta del tubo en la papila dilatada. Avance suavemente el tubo mediante pequeños movimientos giratorios para ayudar a que los tubos se deslicen, seg

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Research

Investigación

JoVE Journal

Immunology and Infection

Inmunología e Infección

Un protocolo para la canalización de la glándula salival submaxilar del ratón a través de conductos de Wharton se describe. Para este experimento, la solución de azul tripán se usa como un tintorero para demostrar cómo esta técnica efectiva entrega infusiones en la glándula blanco, y sugerir la fiabilidad de este nuevo enfoque como un potencial clínico de drogas / terapia celular para la regeneración de las glándulas salivales.

Canulación de la glándula salival submaxilar del ratón a través del conducto de Wharton

Fuente: Tadokoro, T., et al. Administración del vector del virus adenoasociado subpial 9 (AAV9) en ratones adultos. J. Vis. Exp. (2017)Este video demuestra una técnica de inyección subpial para la administración de genes a la médula espinal en ratones. El procedimiento consiste en exponer la duramadre, perforar la piamadre e inyectar un virus adenoasociado recombinante (rAAV) que lleva un gen que expresa proteínas fluorescentes en el espacio subpial. Después de la inyección y la recuperación,...

Entrega de genes subpiales en la médula espinal del ratón para evaluar la expresión génica

Estos estudios informan sobre la unión reversible de vectores de genes adenovirales a superficies metálicas sin recubrimiento de stents y discos de malla modelo. La liberación sostenida de partículas virales competentes para la transducción, supeditada a la hidrólisis de los reticulantes utilizados para la inmovilización de vectores, da como resultado una expresión duradera del transgén específico del sitio en las células vasculares y en las arterias con stents.

Transferencia génica vascular de Stent metálico superficies utilizando Adenoviral Vectores anclada a través hidrolizables reticulantes

La hipofunción de las glándulas salivales, un efecto adverso importante de la radioterapia de cabeza y cuello, disminuye la calidad de vida del paciente. La demostración de la eficacia de nuevas terapias en modelos animales es un requisito previo antes de la transición clínica. Este protocolo describe la administración retroductal y la irradiación local de las glándulas submandibulares de rata.

Retroductal submandibular Glándula instilación y con localización fraccionado irradiación en un modelo de rata de hipofunción salival

Este método describe la colocación de injertos de interposición de la vena en conejos, la transducción de los injertos y el logro de la expresión del transgen resistente. Esto permite la investigación de funciones fisiológicas y patológicas de los transgenes y sus productos proteicos en las venas injertadas y pruebas de terapias genéticas para la enfermedad de injerto de vena.

Un modelo de conejo de expresión del transgen Durable en la vena yugular a los injertos de interposición de la arteria carótida común

Entrega local de la droga a las glándulas submaxilares es de interés en biología de la glándula salival de entendimiento y para el desarrollo de nuevas terapias. Presentamos un protocolo de inyección de retroductal actualizada y detallada, diseñado para mejorar entrega exactitud y reproducibilidad experimental. La aplicación presentada en este documento es el de nanopartículas poliméricas.

Inyección de nanopartículas de Retroductal a la glándula submaxilar de ratón

Aquí, demostramos la convección guiada por resonancia magnética (RM) entrega mejorada (CED) de vectores virales en la corteza como un enfoque eficiente y simplificado para lograr la expresión optogenética a través de grandes áreas corticales en el cerebro macaco.

Convección Mejorada Entrega de Vector Viral Asociado a Adeno Optogenético a la Corteza de Rhesus Macaque Bajo Guía de Imágenes de RMN en Línea

Tal como se implementa actualmente, la optogenética en primates no humanos requiere la inyección de vectores virales en el cerebro. Un método de inyección óptimo debe ser confiable y, para muchas aplicaciones, capaz de dirigirse a sitios individuales de profundidad arbitraria que se identifican de manera fácil e inequívoca en la histología postmortem. Se presenta un método de inyección con estas propiedades.

Inyecciones de vectores AAV para optogenética en cerebro de primates no humanos anestesiados y despiertos

Se describe un procedimiento quirúrgico para realizar inyecciones en la cisterna lumbar de la rata juvenil. Este enfoque se ha utilizado para la administración intratecal de vectores de terapia génica, pero se prevé que este enfoque se pueda utilizar para una variedad de terapias, incluidas las células y los fármacos.

Administración intratecal de vectores en ratas juveniles mediante inyección en cisterna lumbar

Este artículo proporciona un protocolo y un video adjunto para la inyección en el seno retrobulbar de hasta un volumen total de 150 μL para ratones postnatales, juveniles y adultos corridos. Este procedimiento es particularmente adecuado para la inyección de ratones pequeños (15 g) cuando la inyección en la vena de la cola no es factible.

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Este informe detalla el método de inyección localizada de vectores AAV a través de la pelvis renal para una transferencia de genes efectiva y segura al riñón del ratón.

Entrega efectiva y segura de genes al riñón de ratón mediante inyección lenta retrógrada en la pelvis renal de vectores de virus adenoasociados

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Infusión de la glándula parótida retrógrada a través del conducto de Stensen en un primate no humano para la entrega de genes vectores (Video) | JoVE Journal

Infusión de la glándula parótida retrógrada a través del conducto de Stensen en un primate no humano para la entrega de genes vectores

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