Estudio de transferencia de energía de fluorescencia de molécula única de síntesis de proteínas ribosómicas

FreT de molécula única puede capturar la dinámica que ocurre a distancias nanométricas, que es la escala correcta para el proceso de biosíntesis de proteínas ribosómicas. El ribosoma funciona coordinando múltiples factores y componentes alostéricamente, lo que es intrínsecamente no homogéneo. El método de una sola molécula puede rastrear cada ribosoma sin estar limitado por este efecto promedio no homogéneo.

Este método revelará cómo los antibióticos inhiben la función del ribosoma para desarrollar nuevos medicamentos contra las infecciones bacterianas resistentes a los medicamentos. Comience por preparar el PRE mezclando la mezcla de iniciación EFTU, NOG y PAG en la proporción de uno a dos a 37 grados Celsius durante dos minutos. Después de la incubación, purifique el PRE usando ultracentrifugación de cojín de sacarosa molar 1.1 durante la noche a 100, 000 veces G.Prepare el POST mezclando la mezcla de iniciación EFTU, WG y PHE en una proporción de uno a dos a 37 grados Celsius durante 10 minutos.