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DOI: 10.3791/62765-v
Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.
This manuscript outlines the blot-and-plunge method to manually freeze biological specimens for single-particle cryogenic electron microscopy. The manual plunging method is a cost-effective and reliable technique for preparing samples for transmission electron microscopy.
Este manuscrito describe el método de blot-and-plunge para congelar manualmente especímenes biológicos para microscopía electrónica criogénica de una sola partícula.
El método de inmersión manual descrito aquí es un método rentable y confiable para preparar muestras para microscopía electrónica de transmisión. En este video, demostraremos cómo configurar el émbolo manual, preparar criógenos y realizar borrados y hundimientos manuales de rejillas EM. Prepare el entorno de inmersión manual.
Este procedimiento debe realizarse en una cámara frigorífica mantenida a 40 grados centígrados con una humedad superior al 95%Recomendamos utilizar los materiales que se muestran aquí y como se describe en el protocolo en línea para el secado y la inmersión manual. Prepara el criógeno Dewar y el émbolo manual. Para ensamblar el criógeno Dewar, primero instale la base de la plataforma en la parte inferior de la espuma de poliestireno azul Dewar, asegurándose de que sea plana y nivelada.
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