Continuous Fluorescence-Based Endonuclease-Coupled DNA Methylation Assay to Screen for DNA Methyltransferase Inhibitors

Rebecca Switzer; Katie A. Ward; Jessica Medrano

doi:10.3791/62949

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Ensayo continuo de metilación del ADN acoplado a endonucleasa basado en fluorescencia para detectar inhibidores de la metiltransferasa de ADN

Continuous Fluorescence-Based Endonuclease-Coupled DNA Methylation Assay to Screen for DNA Methyltransferase Inhibitors

JoVE Revista
Bioquímica

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Continuous Fluorescence-Based Endonuclease-Coupled DNA Methylation Assay to Screen for DNA Methyltransferase Inhibitors

Ensayo continuo de metilación del ADN acoplado a endonucleasa basado en fluorescencia para detectar inhibidores de la metiltransferasa de ADN

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06:07 min

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August 05, 2022

DOI:

10.3791/62949-v

DOI:

10.3791/62949-v

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06:07 min

August 05, 2022

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Rebecca Switzer¹, Katie A. Ward², Jessica Medrano²

¹Department of Chemistry,Bucknell University ²Program in Cell Biology/Biochemistry,Bucknell University

Summary

Las metiltransferasas de ADN son posibles objetivos farmacológicos contra el cáncer. Aquí, se presenta un protocolo para evaluar moléculas pequeñas para la inhibición de la metiltransferasa de ADN. Este ensayo utiliza una endonucleasa para acoplar la metilación del ADN a la generación de fluorescencia y permite monitorear la actividad enzimática en tiempo real.