Visualización dinámica de microtúbulos plus-end en el modelo de la enfermedad de Huntington basado en fibroblastos primarios de piel humana

La enfermedad de Huntington, HD, es una patología neurodegenerativa incurable causada por una mutación en el gen que codifica la proteína huntingtina. La huntingtina se asocia principalmente con vesículas y microtúbulos, y probablemente está involucrada en procesos de transporte dependientes de microtúbulos. Para estudiar la influencia de la huntingtina mutante en el dinamismo de los microtúbulos, utilizamos la visualización in vivo de la proteína EB3, que regula las propiedades dinámicas de los microtúbulos doblando y estabilizando los extremos superiores en crecimiento.

Para cargar EB3 marcado fluorescentemente en fibroblastos de piel humana, aplicamos transfección por plásmidos. Se utilizó el cultivo primario de fibroblastos para obtener de la biopsia de piel del paciente EB3 para este estudio. Entregue la biopsia al laboratorio en unas pocas horas en medio DMEM, complementado con 15 microgramos por mililitro de penicilina y 50 unidades por mililitro de estreptomicina.