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DOI: 10.3791/63160-v
Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.
This article presents a method for the continuous and robust ex utero development of postimplantation mouse embryos for up to six days. The protocol allows for successful embryo culture from pregastrulation stages until advanced organogenesis.
Una plataforma mejorada para el cultivo de embriones enteros permite el desarrollo continuo y robusto ex utero de embriones de ratón postimplantación durante un máximo de seis días, desde las etapas de pregastrulación hasta la organogénesis avanzada. En este protocolo, detallamos el procedimiento estándar para el cultivo exitoso de embriones utilizando placas estáticas y sistemas de botellas giratorias.
Este método será fundamental para entender la gastrulación a lo largo de una formación en mamíferos. Al permitir la experimentación en embriones vivos durante etapas embrionarias que durante mucho tiempo han estado ocultos dentro del útero materno. Permite, continúa el crecimiento eficiente y apropiado de embriones de ratón fuera del útero durante un período prolongado de hasta 6 días.
La disección embrionaria rápida y adecuada y la pregastrulación de la concentración y presión del gas son los pasos más críticos para el crecimiento exitoso del embrión. Para comenzar a cultivar embriones de ratón de 7,5 días de edad o más avanzados, encienda el rotador y la unidad de calentamiento del sistema de incubadora de cultivo con rodillos durante al menos 1 hora antes de las disecciones embrionarias. Además, agregue agua en autoclave a la botella de entrada de gas y al tubo de ensayo de salida.
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