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Ex Utero Cultivo de embriones de ratón desde la pregastrulación hasta la organogénesis a...
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Developmental Biology
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JoVE Journal Developmental Biology
Ex Utero Culture of Mouse Embryos from Pregastrulation to Advanced Organogenesis

Ex Utero Cultivo de embriones de ratón desde la pregastrulación hasta la organogénesis avanzada

Full Text
8,290 Views
07:14 min
October 19, 2021

DOI: 10.3791/63160-v

Alejandro Aguilera-Castrejon1, Jacob H. Hanna1

1Department of Molecular Genetics,Weizmann Institute of Science

AI Banner

Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

Overview

This article presents a method for the continuous and robust ex utero development of postimplantation mouse embryos for up to six days. The protocol allows for successful embryo culture from pregastrulation stages until advanced organogenesis.

Key Study Components

Area of Science

  • Embryology
  • Developmental Biology
  • Mouse Models

Background

  • Understanding gastrulation in mammals is crucial for developmental biology.
  • Embryonic stages have traditionally been studied in utero.
  • Ex utero culture provides a new platform for experimentation.
  • Efficient growth of mouse embryos outside the uterus is essential for research.

Purpose of Study

  • To develop a reliable method for culturing mouse embryos.
  • To facilitate the study of early developmental processes.
  • To enhance understanding of organogenesis.

Methods Used

  • Static plates and rotating bottle systems for embryo culture.
  • Preparation of the roller culture incubator system prior to embryo dissection.
  • Monitoring gas concentration and pressure during culture.
  • Dissection of 7.5 day old or more advanced mouse embryos.

Main Results

  • Successful culture of mouse embryos for up to six days.
  • Robust growth observed during pregastrulation and organogenesis stages.
  • Method allows for detailed study of developmental processes.
  • Provides a platform for future research in embryonic development.

Conclusions

  • The enhanced culture platform is effective for studying mouse embryos.
  • This method opens new avenues for research in developmental biology.
  • Understanding early embryonic development is crucial for various biological fields.

Frequently Asked Questions

What is the main advantage of this culture method?
It allows for the study of mouse embryos outside the uterus for an extended period, providing insights into early development.
How long can embryos be cultured using this method?
Embryos can be cultured for up to six days.
What stages of development can be studied?
The method supports culture from pregastrulation stages to advanced organogenesis.
What are critical steps for successful embryo growth?
Quick and adequate embryo dissection and proper gas concentration and pressure management are essential.
What type of embryos can be cultured?
7.5 day old or more advanced mouse embryos can be cultured using this method.
What equipment is necessary for this protocol?
A roller culture incubator system and static plates or rotating bottles are required.

Una plataforma mejorada para el cultivo de embriones enteros permite el desarrollo continuo y robusto ex utero de embriones de ratón postimplantación durante un máximo de seis días, desde las etapas de pregastrulación hasta la organogénesis avanzada. En este protocolo, detallamos el procedimiento estándar para el cultivo exitoso de embriones utilizando placas estáticas y sistemas de botellas giratorias.

Este método será fundamental para entender la gastrulación a lo largo de una formación en mamíferos. Al permitir la experimentación en embriones vivos durante etapas embrionarias que durante mucho tiempo han estado ocultos dentro del útero materno. Permite, continúa el crecimiento eficiente y apropiado de embriones de ratón fuera del útero durante un período prolongado de hasta 6 días.

La disección embrionaria rápida y adecuada y la pregastrulación de la concentración y presión del gas son los pasos más críticos para el crecimiento exitoso del embrión. Para comenzar a cultivar embriones de ratón de 7,5 días de edad o más avanzados, encienda el rotador y la unidad de calentamiento del sistema de incubadora de cultivo con rodillos durante al menos 1 hora antes de las disecciones embrionarias. Además, agregue agua en autoclave a la botella de entrada de gas y al tubo de ensayo de salida.

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