DOI: 10.3791/63232-v
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El ensayo ACT1-CUP1, un ensayo de crecimiento de cobre, proporciona una lectura rápida del empalme del ARN mensajero precursor (pre-ARNm) y el impacto que los factores de empalme mutante tienen en la función espliceosomal. Este estudio proporciona un protocolo y destaca la personalización posible para abordar la cuestión de empalme de interés.
El ensayo ACT1-CUP1 puede identificar si una mutación afecta el empalme de ARN premensajero y dar una indicación de qué paso de empalme se ve más afectado. El ensayo ACT1-CUP1 vincula la mutación del factor de empalme con su impacto en el complejo proceso de empalme. Utiliza la lectura simple del fenotipo de crecimiento y tiene un amplio rango de sensibilidad.
El uso eficiente del tiempo es importante cuando se lleva a cabo un ensayo ACT1-CUP1. Comience con un ensayo de cinco a 10 cepas para minimizar las aberraciones de crecimiento inducidas por el estrés. Demostrando el proceso seremos yo e Isabelle Marasigan, una investigadora de pregrado de mi laboratorio.
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