Name: Huellas dactilares cardiolipina en leucocitos por espectrometría de masas para un diagnóstico rápido del síndrome de Barth (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2022-03-23T13:10:00.000+00:00
Duration: 6 min 48 s
Description: Aprenda a obtener huellas dactilares de cardiolipina en leucocitos mediante espectrometría de masas MALDI-TOF para el diagnóstico rápido del síndrome de Barth. Este método mide la relación monolisocardiolipina/cardiolipina con alta sensibilidad y especificidad.

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Estamos agradecidos con las personas con BTHS y sus familias por participar en nuestra investigación. Agradecemos a barth Syndrome Foundation US y Barth Syndrome UK Trust por su apoyo y por ayudar con la recolección de las muestras de sangre en la reunión anual en Bristol. Este estudio fue financiado por Barth Syndrome Foundation US, Barth Italia Onlus y Apulia Region.

Las muestras de sangre de donantes sanos y pacientes con insuficiencia cardíaca se recogieron en el Hospital Policlínico de Bari (Italia), mientras que las muestras de pacientes con BTHS fueron obtenidas por la clínica BTHS del Servicio Nacional de Salud del Reino Unido en el Hospital Real para Niños de Bristol (Reino Unido). Se obtuvo el consentimiento informado por escrito de donantes, pacientes y padres sanos (cuando corresponda) y las aprobaciones de los respectivos comités de ética.
NOTA: Si no se usa inmediatamente, la sangre (en tubo de gel K-EDTA) se puede almacenar a 4 °C durante un máximo de 24-48 h.
1. Aislamiento de leucocitos por sedimentación de dextrano de glóbulos rojos (glóbulos rojos)
<ol><li>Coloque muestras de sangre (en K-EDTA) en un agitador orbital durante 10 minutos para mezclar sangre.</li>
	<li>A 0,9 ml de sangre total en un tubo de 1,5 ml, agregue 0,1 ml de solución de dextrano al 20% (masa molecular > 100 kDa, en NaCl al 0,9%). Pipete y disperse la suspensión suavemente 20 veces mientras evita las burbujas de aire que de otro modo retendrían los glóbulos rojos en la parte superior del tubo. Deje sedimentar los glóbulos rojos durante aproximadamente 1 h a temperatura ambiente.</li>
	<li>Con una jeringa, recoja y transfiera el sobrenadante amarillo a un tubo de 15 ml, y luego centrífique a 400 x g durante 15 minutos a temperatura ambiente (sin freno, rotor de cuchara oscilante).</li>
	<li>Deseche el sobrenadante y resuspenda el pellet que contiene principalmente leucocitos y glóbulos rojos residuales en 0,6 ml de agua bidestilocida helada (ddH2O).</li>
	<li>Después de ~15 s, agregue 0.2 mL de 0.6 M KCl a la suspensión celular para restaurar la osmolaridad correcta. El choque osmótico corto lisará los glóbulos rojos y dejará intactos los leucocitos. Ajuste el volumen final a 2,5 ml con 1x PBS.</li>
	<li>Centrifugar la suspensión a 400 x g durante 15 min a temperatura ambiente (sin freno, rotor de cucharón oscilante). Deseche el sobrenadante y lave el pellet de leucocitos nuevamente con 2.5 mL de 1x PBS.</li>
	<li>Centrifugar como en el paso 1.6 y desechar el sobrenadante. Resuspendir el pellet que contiene leucocitos en 200 μL de ddH2O esterilizado. NOTA: En la experiencia de los autores, esto corresponde a un contenido de proteína que oscila entre 200 μg y 400 μg.</li>
	<li>Congele la suspensión a -80 °C o realice directamente la extracción de lípidos de la siguiente manera.</li>
</ol>2. "Miniextracción" de lípidos de leucocitos aislados
<ol><li>Transfiera 20 μL de suspensión de leucocitos (aproximadamente 20-40 μg de proteínas) a un tubo de 1,5 ml y gire a 16.000 x g durante 30 s.</li>
	<li>Deseche el sobrenadante, agregue 10 μL de CHCl3 al pellet restante y pipetee repetidamente para promover la extracción de lípidos.</li>
	<li>Finalmente, agregue 10 μL de solución de matriz de 9-aminoacridina (9-AA) (10 mg/ml 9-AA en 2-propanol/acetonitrilo, 60:40 v/v) al pellet en CHCl3. Pipetear y dispersar repetidamente para mezclar.</li>
	<li>Girar la solución que contiene lípidos en CHCl3 y 9-AA a 16.000 x g durante 30 s, y luego depositar el sobrenadante como gotas de 0,35 μL (tres réplicas para cada muestra) en el objetivo MALDI (placa de muestra) a analizar (método de deposición de gotas secas").</li>
	<li>Deje que las gotas se sequen al aire al menos durante 10-15 min.</li>
</ol>3. Análisis de lípidos por MALDI-TOF/MS
<ol><li>Adquirir espectros de masas de muestras por triplicado en un espectrómetro de masas MALDI-TOF.</li>
	<li>Después de la calibración con estándares de lípidos (ver Tabla de Materiales), establezca los análisis en el modo de iones negativos y optimice el rango de detección m/z de 200 Th a 2.000 Th para el análisis de moléculas pequeñas.</li>
	<li>Mantenga la fluencia del láser un 5% por encima del umbral (de CL y MLCL) para tener un S / N (al menos 2).</li>
	<li>Adquirir espectros en modo reflector mediante extracción pulsada retardada. Para cada espectro de masas, un promedio de 2.000 disparos láser individuales (suma de 4 x 500). Aplique supresión de matriz cerrada a 400 Th para evitar la saturación del detector.</li>
</ol>4. Cómo calcular la relación (MLCL + CLi)/CLm
<ol><li>Ejecute el software del instrumento MALDI-TOF/MS (consulte la Tabla de materiales) para analizar los espectros adquiridos.</li>
	<li>Con el comando Abrir , abra el cuadro de diálogo Spectrum Browser que permite seleccionar y cargar el espectro de interés.</li>
	<li>En la barra de menús, haga clic en los iconos Suavizar espectro de masa y Restar línea base de espectro de masa.</li>
	<li>Haga clic en Archivo > Exportar > espectro de masas y elija el formato ASCII para exportar el espectro como una tabla de dos columnas con pares de puntos de datos: m / z (x) e intensidad (y). Copie y pegue las coordenadas en un programa de hoja de cálculo (*.xls).</li>
	<li>Repita los pasos 4.2 a 4.4 para las triplicaciones de cada muestra analizada, pegando las coordenadas en el mismo archivo de programa de hoja de cálculo como se muestra en la Figura 1 (Paso 1).</li>
	<li>Siguiendo los rangos x mostrados en la Figura 1 (Paso 2) para cada especie listada, calcule la suma de los valores y1, y2 e y3 (triplicados) mediante la función SUMA para obtener el área pico (Figura 1; Paso 3).</li>
	<li>Realizar el promedio de los valores de área triplicada por función PROMEDIO (Figura 1; Paso 3).</li>
	<li>Coloque los valores de área promedio para cada especie en la columna como se muestra en la Figura 1 (Paso 2).</li>
	<li>Para considerar solo el primer isotopólogo de la especie CLm 72:7 como en28, calcule la corrección isotópica para la superposición entre el isotopólogo M + 2 del CLm 72: 8 y el pico monoisotópico de CLm 72: 7 como se muestra en la Figura 1 (Paso 4).</li>
	<li>Finalmente, calcule la relación (MLCL + CLi)/CLm como se muestra en la Figura 1 (Paso 5).</li>
</ol>

<ol><li>Barth, P. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((X-linked+cardioskeletal+myopathy+and+neutropenia+%28Barth+syndrome%29%3A+respiratory-chain+abnormalities+in+cultured+fibroblasts%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Inherited+Metabolic+Disease%22%5BJournal%5D)">X-linked cardioskeletal myopathy and neutropenia (Barth syndrome): respiratory-chain abnormalities in cultured fibroblasts.</a> Journal of Inherited Metabolic Disease. 19 (2), 157-160 (1996).</li>
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</ol>

Todos los autores declaran que el estudio se realizó en ausencia de cualquier relación comercial o financiera que pudiera interpretarse como un posible conflicto de intereses.

El síndrome de Barth es un error innato del metabolismo y una afección que cambia la vida y que es probable que no se diagnostiquelo suficiente 2,6. Como se mencionó anteriormente, un factor que contribuye puede ser la falta de una prueba de diagnóstico directa. Aquí, se describió un método simple y rápido para medir la relación MLCL/CL por MALDI-TOF/MS en leucocitos para el cribado de BTHS. Además, los espectrómetros de masas MALDI-TOF están ampliamente dis...

El síndrome de Barth (BTHS) es una enfermedad rara ligada al cromosoma X caracterizada por miocardiopatía de inicio temprano, miopatía del músculo esquelético, retraso en el crecimiento, neutropenia, disfunción variable de la cadena respiratoria mitocondrial y estructura mitocondrial anormal 1,2,3,4,5. BTHS tiene una prevalencia de un caso por millón de hombres con actualmente menos de 250 casos conocidos en todo el mundo, aunque es ampliamente aceptado que la enfermedad está infradiagnosticada 2,6. BTHS resulta de mutaciones de pérdida de función del gen Tafazzin (TAFAZZIN) localizado en el cromosoma Xq28.12 7,8 que causan una remodelación deficiente del fosfolípido mitocondrial cardiolipina (CL), un proceso que normalmente conduce a una composición de acilo altamente simétrica e insaturada 9,10. Cl ha sido considerado el lípido característico de las mitocondrias, donde es un componente importante de la membrana interna, vital para la fosforilación oxidativa (es decir, el metabolismo energético mitocondrial), la formación de supercomplejos, la importación de proteínas y está involucrado en la dinámica mitocondrial, la mitofagia y la apoptosis 11,12,13,14,15,16 . Tras la pérdida de la función de TAFAZZIN, la remodelación de CL falla y surgen anomalías específicas de fosfolípidos en las mitocondrias de pacientes con BTHS: el nivel maduro de CL (CLm) disminuye, mientras que se produce un aumento de los niveles de monolisocardiolipina (MLCL) y una composición alterada de CL acilo (es decir, especies de CL inmaduras, CLi). Esto lleva a un aumento dramático de la relación MLCL/CL17.
El diagnóstico de BTHS es a menudo difícil, ya que el trastorno presenta características clínicas y bioquímicas extremadamente variables y puede diferir entre los individuos afectados de la misma familia y dentro de un paciente a lo largo del tiempo 3,5. Muchos niños BTHS muestran un nivel muy alto de excreción urinaria de ácido 3-metilglutacónico (3-MGCA), pero el nivel de orina puede ser normal o solo un aumento leve en pacientes con el tiempo3. Sin embargo, el aumento de 3-MGCA es una característica de varios otros trastornos mitocondriales y no mitocondriales, como la deficiencia de 3-metilglutaconil-CoA hidratasa (defecto AUH), aciduria 3-metilglutacónica, distonía-sordera, encefalopatía, síndrome de Leigh (MEGDEL), síndrome de Costeff y miocardiopatía dilatada con ataxia (DCMA)18,19 . Por lo tanto, la escasa especificidad del 3-MCGA como marcador de BTHS y la enorme variabilidad en los pacientes hacen que el diagnóstico bioquímico sea ambiguo.
Además, se han descrito más de 120 mutaciones diferentes de TAFAZZIN que causan el trastorno5 y, por lo tanto, un diagnóstico genético puede ser complicado, lento y costoso. Además, el análisis molecular del gen TAFAZZIN puede dar lugar a resultados falsos negativos en presencia de mutaciones en secuencias no codificantes o reguladoras3. BTHS puede ser probado inequívocamente determinando las cantidades relativas y la distribución de las especies (monolyso-)CL y confirmado por secuenciación del gen TAFAZZIN o viceversa.
Una prueba práctica para el diagnóstico es la medición de la relación MLCL/CL mediante cromatografía líquida de alto rendimiento (HPLC) y análisis de ionización por electropulsión / espectrometría de masas (ESI/MS) en el punto sanguíneo20,21. La medición del nivel de CL por sí sola no es adecuada para el diagnóstico, ya que algunos pacientes tienen niveles casi normales de CL pero alteran la relación MLCL/CL. Por lo tanto, la medición de la relación MLCL/CL tiene una sensibilidad y especificidad del 100% para el diagnóstico de BTHS21. Se ha establecido otro método validado basado en el análisis de HPLC y ESI/MS sobre leucocitos22, pero las complejas técnicas cromatográficas para la separación de lípidos previamente extraídos y la cara de los instrumentos restringen este análisis a unos pocos laboratorios clínicos. Todos estos factores, junto con la falta de una prueba diagnóstica directa, han contribuido al infradiagnóstico de la afección.
MALDI-TOF/MS es otra herramienta válida en el análisis de lípidos23,24. Esta técnica analítica se puede utilizar para obtener directamente perfiles lipídicos de diversas muestras biológicas, saltándose así los pasos de extracción y separación 25,26,27,28,29, incluso en secciones de tejido para aplicaciones de MS Imaging 30. Dada esta ventaja, se desarrolló un método simple y rápido para diagnosticar BTHS mediante el perfil de CL mitocondrial en leucocitos intactos con MALDI-TOF/MS28. El aislamiento leucocitario de solo 1 ml de sangre total por sedimentación y lisis de eritrocitos es sencillo y no requiere equipos o reactivos especiales. Además, se describió un protocolo rápido de "miniextracción" de lípidos aplicable a cantidades diminutas de leucocitos para garantizar la adquisición exitosa de espectros que tienen señales MS más limpias con una relación señal-ruido (S / N) más alta que en las obtenidas de leucocitos intactos28. Este paso adicional lleva poco tiempo y permite que los análisis sean reproducibles incluso cuando se llevan a cabo en instrumentos de EM con poca sensibilidad. En resumen, el método analítico descrito aquí requiere una preparación mínima de la muestra porque se puede omitir la separación cromatográfica de lípidos que consume mucho tiempo y mano de obra, lo que acelera la prueba.

<table><tbody><tr><td>1,1&prime;,2,2&prime;-tetratetradecanoyl cardiolipina</td><td>Avanti Polar Lipids</td><td>750332</td><td>Lipid estándar para la calibración de MALDI-TOF</td></tr><tr><td>1,1&prime; 2,2&prime;-tetra- (9Z-octadecenoyl) cardiolipina</td><td>Avanti Lípidos polares</td><td>710335</td><td>Patrón lipídico para la calibración de MALDI-TOF</td></tr><tr><td>1,2-di- (9Z-hexadecenoyl)-sn-glicero-3-fosfoetanolamina</td><td>Avanti Polar Lipids</td><td>878130</td><td>Patrón lipídico para la calibración de MALDI-TOF</td></tr><tr><td>1,2-ditetradecanoyl-sn-glicero-3-fosfato</td><td>Avanti Polar Lipids</td><td>830845</td><td>Patrón de lípidos para la calibración de MALDI-TOF</td></tr><tr><td>1,2-ditetradecanoyl-snglycero-3-phospho-(1&prime;-rac-glycerol)</td><td>Avanti Polar Lipids</td><td>840445</td><td>Lipid estándar para la calibración de MALDI-TOF</td></tr><tr><td>1,2-ditetradecanoyl-sn-glycero-3-phospho-L-serine</td><td>Avanti Polar Lipids</td><td>840033</td><td>Patrón de lípidos para la calibración de MALDI-TOF</td></tr><tr><td>2-Propanol, reactivo ACS, &ge; 99.5%</td><td>Merck Life Science S.r.l.</td><td></td><td></td>190764</tr><tr><td>9-Aminoacridina hemihidrato, 98%</td><td>Acros Organics</td><td>134410010</td><td></td></tr><tr><td>acetonitrilo, reactivo ACS, &ge; 99.5%</td><td>Merck Life Science S.r.l.</td><td></td><td></td>360457</tr><tr><td>Cloroformo, reactivo ACS, &ge; 99.8%</td><td>Merck Life Science S.r.l.</td><td></td><td></td>319988</tr><tr><td>Dextrano de Leuconostoc spp. Sr. 450.000-650.000</td><td>Merck Life Science S.r.l.</td><td>31392</td><td></td></tr><tr><td>Flex Analysis 3.3</td><td>Bruker Daltonics</td><td></td><td>Software</td></tr><tr><td>MALDI-TOF espectrómetro de masas Microflex LRF</td><td>Bruker Daltonics</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Microsoft Excel</td><td>Microsoft Office</td><td></td><td>Software</td></tr><tr><td>OmniPur 10X PBS Liquid Concentrate</td><td>Merck Life Science S.r.l.</td><td>6505-OP</td><td></td></tr><tr><td>Cloruro de potasio, reactivo ACS, 99,0-100,5%</td><td>Merck Life Science S.r.l.</td><td>P3911</td><td></td></tr><tr><td>Cloruro de sodio, reactivo ACS, &ge; 99.0%</td><td>Merck Life Science S.r.l.</td><td>S9888</td><td></td></tr></tbody></table>

huellas dactilares cardiolipina en leucocitos por espectrometría de masas para un diagnóstico rápido del síndrome de barth

Fingerprinting Cardiolipin in Leukocytes by Mass Spectrometry for a Rapid Diagnosis of Barth Syndrome

La cardiolipina (CL), un fosfolípido dimérico que lleva cuatro cadenas de ácidos grasos en su estructura, es el marcador lipídico de las mitocondrias, en el que desempeña un papel crucial en el funcionamiento de la membrana interna. Su metabolito monolisocardiolipina (MLCL) está fisiológicamente casi ausente en el extracto lipídico de células animales y su aparición es el sello distintivo del síndrome de Barth (BTHS), una enfermedad genética rara y a menudo mal diagnosticada que causa miocardiopatía grave en la infancia. El método descrito aquí genera una "huella dactilar de cardiolipina" y permite un ensayo simple de los niveles relativos de las especies de CL y MLCL en los perfiles lipídicos celulares. En el caso de los leucocitos, solo se requiere 1 ml de sangre para medir la relación MLCL / CL a través de la ionización por desorción por láser asistida por matriz: tiempo de vuelo / espectrometría de masas (MALDI-TOF / MS) justo dentro de las 2 h posteriores a la extracción de sangre. El ensayo es sencillo y se puede integrar fácilmente en el trabajo de rutina de un laboratorio de bioquímica clínica para detectar BTHS. La prueba muestra una sensibilidad y especificidad del 100% para BTHS, lo que la convierte en una prueba de diagnóstico adecuada.

En este estudio, se ha descrito un método simple y rápido para aislar leucocitos de 1 ml de sangre total y obtener huellas dactilares de CL por MALDI-TOF/MS (ver Figura 2). La Figura 3 muestra la comparación de las huellas dactilares representativas de CL de leucocitos, obtenidas de sujetos de control y niños jóvenes con BTHS, en el rango de masa CL y MLCL (m / z). La Tabla 1 enumera las especies de CL y MLCL detectadas en estos espectr...

Este protocolo muestra cómo obtener una "huella digital" espectrométrica de masas de cardiolipina leucocitaria para el diagnóstico del síndrome de Barth. La evaluación de la relación monolisocardiolipina a cardiolipina elevada discrimina a los pacientes con síndrome de Barth de los pacientes con insuficiencia cardíaca de control con 100% de sensibilidad y especificidad.

Huellas dactilares cardiolipina en leucocitos por espectrometría de masas para un diagnóstico rápido del síndrome de Barth

Cardiolipin (CL), a dimeric phospholipid carrying four fatty acid chains in its structure, is the lipid marker of mitochondria, wherein it plays a crucial ...

Este método genera una huella dactilar de cardiolipina de leucocitos mediante espectrometría de masas MALDI-TOF y permite la medición de la relación entre monolisocardiolipina y cardiolipina para un diagnóstico rápido del síndrome de Barth. La principal ventaja de esta técnica es la detección de especies lipídicas diagnósticas mediante una única ronda de espectrometría de masas inmediatamente después del aislamiento de leucocitos de un mililitro de sangre. Estos y la sensibilidad y especificidad ocular hacen de este ensayo una prueba diagnóstica adecuada para integrarse en el trabajo rutinario de los laboratorios clínicos para detectar el síndrome de Barth.Comience colocando muestras de sangre en un agitador orbital durante 10 minutos. A continuación, a 0,9 mililitros de sangre total en un tubo de 1,5 mililitros, agregue 0,1 mililitros de dextrano al 20%. Ahora pipetee y disperse la suspensión suavemente 20 veces mientras evita las burbujas de aire y deje que los glóbulos rojos se sedimenten durante aproximadamente una hora a temperatura ambiente.Con una jeringa, recoja y transfiera el sobrenadante amarillo a un tubo de 15 mililitros y luego centrífuga a 400 veces G durante 15 minu

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Research

Investigación

JoVE Journal

Biochemistry

Bioquímica

Un método específico y sensible para profundizar en el perfil de expresión de los antígenos de glucoesfingolípidos en órganos y células inmunes se describe. El método se aprovecha de la espectrometría de masas de iones trampa permitiendo paso a paso fragmentación de las moléculas de glucoesfingolípidos para el análisis estructural, en comparación con los estándares de síntesis química.

Análisis espectrométrico de masas de Antígenos glicoesfingolípido

Este video muestra un protocolo de inmunoensayo de electroforesis capilar para detectar un biomarcador de proteínas asociado con la esclerosis lateral amiotrófica (ELA) a partir de plaquetas de la sangre humana. La confirmación de la presencia de la proteína biomarcador de ELA se logra mediante la separación basada en el tamaño de las proteínas plaquetarias seguida de una detección quimioluminiscente.

Un inmunoensayo de electroforesis capilar para la detección de biomarcadores de proteínas

La desorción de ionización por electrospray espectrometría de masas (DESI-MS) es un método por el cual las muestras ambiente, incluidos los tejidos biológicos, se pueden obtener imágenes con la preparación mínima de la muestra. Por rastering la muestra por debajo de la sonda de ionización, esta técnica de aerosol a base proporciona una resolución espacial suficiente para discernir las características moleculares de interés dentro de las secciones de tejido.

Obtención de imágenes de tejidos biológicos por desorción ionización electrospray espectrometría de masas

Biomarcadores de medición en muestras biológicas complejas es cada vez guían la toma de decisiones clínicas. Se describe un método altamente sensible para medir simultáneamente la miosina cardíaca proteína de unión-C, creatina quinasa MB, troponina I cardiaca y en muestras de suero de pacientes con infarto de miocardio y los sujetos de control sanos.

Un método de cuantificación sensible y específica para la determinación de suero miosina cardíaca proteína de unión-C por inmunoensayo electroquimioluminiscencia

Los biomarcadores son indicadores biológicos medidos directamente-de la enfermedad o la salud. En la población y de las ciencias sociales, los biomarcadores deben ser fáciles de obtener, transportar y analizar. Secado de gotas de sangre (DBS) colección responde a esta necesidad, se puede recoger en el campo con altas tasas de respuesta y analizada por una variedad de biomarcadores.

Sangre Seca Colección de Biomarcadores de salud para maximizar la participación en estudios de población

Se presenta un protocolo para perfiles metabólicos de muestras biológicas mediante electroforesis capilar de espectrometría de masas utilizando un diseño de interfaz de punta porosa sheathless.

Sheathless electroforesis capilar-espectrometría de masas de perfiles metabólicos de muestras biológicas

gotitas de lípidos son orgánulos importantes para la replicación de varios patógenos, incluyendo el virus de la hepatitis C (VHC). Se describe un método para aislar las gotas de lípidos para la espectrometría de masas cuantitativa de proteínas asociadas; se puede utilizar bajo una variedad de condiciones, tales como infección por el virus, el estrés ambiental, o tratamiento con fármacos.

Aislamiento gotas de lípidos para el análisis cuantitativo de Espectrometría de Masas

Los biomarcadores basados en la sangre para enfermedades neurodegenerativas son esenciales para la implementación de estudios clínicos a gran escala. Un análisis de sangre confiable y validado debe requerir un pequeño volumen de muestra, así como ser un método de muestreo menos invasivo, asequible y reproducible. Este artículo demuestra que el inmunoensayo de electroforesis capilar de alto rendimiento satisface los criterios para el desarrollo potencial de biomarcadores.

Uso del inmunoensayo de electroforesis capilar para buscar biomarcadores potenciales de la esclerosis lateral amiotrófica en plaquetas humanas

En este documento, describimos los protocolos para medir la cantidad de fosfolípidos fluorescentes eliminados específicamente de las partículas donantes de lípidos por la lipoproteína de alta densidad (HDL) presente en el plasma o suero humano completo. Hemos demostrado que esta métrica de la funcionalidad de HDL predice la enfermedad cardiovascular incidente.

Ensayo de salida de fosfolípidos específicos de lipoproteínas de alta densidad

flexibilidad conformacional desempeña un papel crítico en la función de la proteína. En este documento, se describe el uso de la espectrometría de masas de ionización por electrospray resuelta en el tiempo junto con el intercambio de hidrógeno-deuterio para sondear los rápidos cambios estructurales que impulsan función en proteínas ordenadas y desordenadas.

Resuelta en el tiempo de ionización por electrospray de hidrógeno-deuterio Espectrometría de Masas de cambio para el estudio de la estructura proteica y Dinámica

Aprenda a obtener huellas dactilares de cardiolipina en leucocitos mediante espectrometría de masas MALDI-TOF para el diagnóstico rápido del síndrome de Barth. Este método mide la relación monolisocardiolipina/cardiolipina con alta sensibilidad y especificidad.

Huellas dactilares cardiolipina en leucocitos por espectrometría de masas para un diagnóstico rápido del síndrome de Barth

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