Name: Un procedimiento para estudiar la recaída inducida por el estrés de la búsqueda de heroína después de la abstinencia impuesta por el castigo (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2022-03-23T14:00:00.000+00:00
Duration: 8 min 5 s
Description: Aprende un modelo de recaída por estrés en ratas tras abstinencia impuesta por castigo usando privación alimentaria. Este método mejora la validez ecológica para estudiar mecanismos neuronales de adicción.

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Este trabajo fue apoyado por el Programa de Descubrimiento del Consejo de Ciencias Naturales e Ingeniería (US: RGPIN-2016-06694).

Todas las ratas son tratadas de acuerdo con las directrices del Consejo Canadiense de Cuidado de Animales. La aprobación para todos los procedimientos experimentales fue otorgada por el Comité de Ética de Investigación Animal de la Universidad de Concordia.
1. Animales
<ol><li>Adquiera ratas Long Evans que pesen 275-300 g (machos) o 225-250 g (hembras). Ratas domésticas dobles en jaulas de plástico estándar con ropa de cama de mazorca de maíz y papel triturado hasta la cirugía.</li>
	<li>Mantenga a las ratas en un ciclo de luz-oscuridad invertido (luces apagadas a las 9:30 AM, luz encendida a las 9:30 PM).</li>
	<li>Permitir el acceso ilimitado a alimentos y agua, excepto durante la prueba de privación de alimentos. Use comida regular para ratas (20.9% de proteína, 67.2% de carbohidratos y 11.8% de grasa).</li>
</ol>2. Cirugías intravenosas
<ol><li>Construir catéteres y realizar cirugía intravenosa como se describe en Sedki et al. 201317 con las siguientes diferencias: 1) Usar isofluorano 2-2.5% para anestesia, 2) Cambiar la dosis de penicilina administrada durante la cirugía a 60 000 UI / rata, mediante inyección subcutánea, y 3) Aumentar la dosis de gentamicina en la mezcla de heparina y gentamicina utilizada para enjuagar los catéteres a 7.5 UI + 800 μg; 0.2- 0.3 mL.</li>
	<li>Inyecte ketoprofeno o carprofeno, un analgésico antiinflamatorio, por vía intraperitoneal o subcutánea (5 mg/kg) inmediatamente después de la cirugía (antes de la recuperación de la anestesia) y en los siguientes 3 días. Durante el período de recuperación de 2 días, dé puré de alimentos y calor (si es necesario) para ayudar con la recuperación. Pese y supervise a los animales diariamente para verificar si hay una pérdida abrupta de peso o cualquier otro signo de problemas de salud.</li>
</ol>3. Procedimiento conductual
<ol><li>Cámaras de acondicionamiento operantes:<ol><li>Establecer las cámaras de acondicionamiento operante como se describe en Sedki et al. 201317.</li>
	</ol></li>
	<li>Día de la habituación:<ol><li>Aloje a las ratas en las cámaras de entrenamiento operante después de la recuperación de la cirugía y permita que los animales se habitúen a la cámara durante 24 h antes de iniciar cualquier protocolo. Mantenga a los animales alojados en las cámaras operantes durante todo el experimento.</li>
		<li>No conecte las ratas al resorte metálico y no inicie ningún protocolo experimental (la luz de señal, el tono y las palancas no están disponibles durante el día de habituación).</li>
	</ol></li>
	<li>Autoadministración de heroína:<ol><li>Conecte el conector 5-up al tubo Tygon y al resorte metálico.</li>
		<li>Establecer sesiones diarias de entrenamiento de 6 h de autoadministración de heroína (0,1 mg/kg/perfusión) según el procedimiento descrito a continuación.</li>
		<li>Comience las sesiones diarias de entrenamiento al inicio de la fase oscura del ciclo de luz invertida (alrededor de las 9:30 AM en los resultados representativos) con la extensión de la palanca de búsqueda (o tome la palanca en los primeros 2 días; ver más abajo), así como apagar la luz de la casa.</li>
		<li>Autoadministración con solo la palanca de toma disponible bajo relación fija 1 (FR1; 2 días)<ol><li>Programe cada prueba para comenzar con la inserción de la palanca de toma.</li>
			<li>Una vez que la rata presione la palanca de toma una vez (FR1), retraiga la palanca de toma, encienda la luz de señal por encima de la palanca y tonifique durante un período de tiempo de espera de 20 s, apague la luz de la casa y permita la administración de una infusión de heroína (0.1 mg / kg en 0.13 ml)</li>
			<li>Programe un intervalo entre juicios de 30 s en el que no se presenten señales, se apague la luz de la casa y se retraiga la palanca. Para el comienzo de la próxima prueba, inserte la palanca de toma y encienda la luz de la casa.</li>
		</ol></li>
		<li>Autoadministración con cadena de búsqueda-toma bajo FR1 (5 días)<ol><li>Programe el sistema de entrenamiento operante para insertar solo la palanca de búsqueda y encienda la luz de la casa para señalar el comienzo de la sesión. La palanca de toma está en un estado retraído.</li>
			<li>Una vez que la rata presiona una vez (FR1) en la palanca de búsqueda, el programa retrae la palanca de búsqueda e inserta la palanca de toma.</li>
			<li>Una pulsación de la palanca de toma (FR1) retrae la palanca de toma e inicia el mismo procedimiento que en el paso 3.3.4.2 y un intervalo entre juicios de 30 s.</li>
			<li>Programe el sistema de entrenamiento operante para insertar la palanca de búsqueda al final del intervalo entre ensayos y encienda la luz de la casa para indicar el comienzo del próximo ensayo.</li>
			<li>Programe el sistema de entrenamiento operante para iniciar el intervalo entre ensayos si una rata no logra completar la cadena de búsqueda-toma durante 10 minutos (sin presionar la palanca de búsqueda o toma) para representar el final de un ensayo y la pérdida de la oportunidad de administrar el medicamento.</li>
		</ol></li>
		<li>Autoadministración con cadena de búsqueda-toma bajo intervalos variables (VI5, VI30 y VI60)<ol><li>Programe todos los pasos de la sección 3.3.5, pero introduzca un intervalo variable de 5 (VI5) como el nuevo programa de refuerzo en la palanca de búsqueda, en lugar de FR1. Permitir la capacitación de autoadministración bajo el horario VI5 durante 3 días.</li>
			<li>Configure el software para permitir que la primera pulsación en la palanca de búsqueda active el horario VI5. Para la programación VI5, deje que el software seleccione aleatoriamente un tiempo de intervalo de una lista de 0.1 s, 5 s y 10 s, lo que resulta en un intervalo promedio de 5 s. La primera palanca de búsqueda presiona después de que haya transcurrido el intervalo seleccionado, retrae la palanca de búsqueda y extiende la palanca de toma.</li>
			<li>Siga los pasos 3.3.4.2, 3.3.5.4., 3.3.5.5. para tomar palanca y final de instrucciones de prueba.</li>
			<li>A continuación, entrene ratas durante 5 días bajo el horario VI30 para el enlace de búsqueda, seguido de 3 días bajo el horario VI60.</li>
			<li>Para la programación VI30, permita que el software seleccione aleatoriamente una hora de una lista de 15 s, 30 s y 45 s, para un promedio de 30 s, mientras que para la programación VI60, el software selecciona aleatoriamente una hora de una lista de 45 s, 60 s y 75 s.</li>
			<li>Varíe los intervalos entre ensayos a lo largo de los diferentes programas de refuerzo. Comience el intervalo entre ensayos a los 30 s durante FR1 y VI5, pero aumente gradualmente a 7 min durante VI30 y VI60.</li>
		</ol></li>
	</ol></li>
	<li>Abstinencia impuesta por el castigo<ol><li>Comience las sesiones de castigo con la inserción de la palanca de búsqueda y encendiendo la luz de la casa. Permita sesiones de castigo durante 8 días, con supervisión regular para garantizar que los animales no muestren signos de dolor anormal o problemas de salud.</li>
		<li>Programe el sistema de entrenamiento operante para que después de completar el enlace de búsqueda bajo VI60, la palanca de búsqueda se retraiga, la luz de la casa se apague y se administre una descarga leve en el 30% de los eslabones de búsqueda completados en lugar de insertar la palanca de toma. La palanca de toma se extiende en el otro 70% de los enlaces de búsqueda completados, como en un ensayo de autoadministración normal.</li>
		<li>Programe un intervalo entre pruebas de 7 minutos con todas las señales y la luz de la casa apagadas antes de insertar la palanca de búsqueda y encender la luz de la casa para indicar el comienzo de la próxima prueba.</li>
		<li>Establezca la intensidad del golpe de pie en 0.2 mA y aumente en 0.1 mA por día de castigo hasta 1.0 mA.</li>
		<li>Después de que las ratas presionen la palanca de toma (en los ensayos cuando esté disponible), repita el paso 3.3.4.2 para la retracción de la palanca, la administración de la infusión de heroína y la presentación de las señales, seguido de un intervalo entre ensayos de 7 minutos.</li>
		<li>Comience la siguiente prueba con la inserción de la palanca de búsqueda y encendiendo la luz de la casa.</li>
		<li>Si la rata no presiona ninguna palanca durante 10 minutos, siga el paso 3.3.5.5.</li>
	</ol></li>
	<li>Privación aguda de alimentos (24 h)<ol><li>Al día siguiente del último día de abstinencia impuesta por el castigo, divida las ratas en dos grupos emparejados (según el peso corporal y el número promedio de palancas de búsqueda e infusiones en los últimos 3 días de entrenamiento de autoadministración): Privado de alimentos (FD) y Saciado.</li>
		<li>Retire las tolvas de alimentos de las cámaras (alrededor de las 9:30 AM) para las ratas que se someten a una prueba de recaída inducida por privación de alimentos y mantenga tolvas de alimentos para el grupo saciado que tiene acceso ilimitado a los alimentos. Proporcionar acceso ilimitado al agua en ambos grupos y supervisar a los animales para garantizar que no muestren ningún problema de salud durante el período de privación de alimentos.</li>
	</ol></li>
	<li>Pruebas de búsqueda de heroína inducida por privación de alimentos<ol><li>La mañana después de las 24 h de privación de alimentos, realice una prueba de búsqueda de heroína de 3 h, bajo un programa VI60 con un intervalo entre ensayos de 7 minutos sin descarga ni infusiones de heroína. Devuelva las tolvas de alimentos a las ratas privadas de alimentos después de la sesión de 3 h.</li>
		<li>En la mañana después de la primera prueba de búsqueda de heroína, retire las tolvas de alimentos de las cámaras de las ratas que fueron saciadas en la primera prueba de recaída. Permita a las ratas que anteriormente estaban privadas de alimentos acceso ilimitado a los alimentos (condición saciada) antes y durante la prueba.</li>
		<li>Realizar otra prueba de búsqueda de heroína de 3 h al día siguiente (después de 24 h de privación de alimentos), como en el paso 3.6.1.</li>
		<li>El día después de la prueba, eutanasia a las ratas utilizando una cámara de dióxido de carbono (100%CO2 a una tasa de llenado del 30-70% del volumen de la cámara por minuto).</li>
	</ol></li>
</ol>

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</ol>

Los autores declaran que no tienen intereses financieros contrapuestos.

Hay dos demostraciones importantes en este documento. En primer lugar, la validación de la abstinencia impuesta por el castigo utilizando la cadena de buscar y tomar con heroína. En segundo lugar, se demostró que la recaída inducida por el estrés podía observarse en un procedimiento de abstinencia impuesto por el castigo. Estas son demostraciones importantes porque (i) el procedimiento de abstinencia inducida por el castigo imita más de cerca la condición humana, ya que resulta en abstinencia voluntaria, es decir, no deb...

La recaída es el problema más desafiante en el tratamiento del consumo de drogas 1,2. Sin embargo, sólo un puñado de tratamientos farmacológicos están aprobados para ayudar a evitar la recaída en humanos3. La epidemia de opioides que enfrenta actualmente América del Norte es un ejemplo sorprendente de ello, y exige considerar diferentes enfoques en modelos animales de recaída a los opioides.
Se ha demostrado que el estrés agudo es un desencadenante clave para la recaída en humanos4. Un factor estresante ambiental que a menudo se asocia con la adicción a las drogas es la privación de alimentos. Los consumidores de drogas a menudo optan por asignar recursos para obtener drogas en lugar de alimentos. Se ha demostrado que el déficit calórico se correlaciona con una mayor recaída en el consumo de cigarrillos5 y alcohol6. Debido a cuestiones éticas y prácticas, los modelos animales se han desarrollado en las últimas décadas para facilitar la investigación en el campo. En modelos animales, se ha demostrado que la privación aguda de alimentos restablece robustamente la búsqueda de heroína extinguida7. Actualmente, la mayoría de los modelos animales de recaída se basan en procedimientos de abstinencia que no son representativos de la abstinencia humana (por ejemplo, modelos basados en la extinción) o abarcan solo el pequeño porcentaje de usuarios de drogas que se ven obligados a abstenerse debido al encarcelamiento o al tratamiento hospitalario (por ejemplo, modelos de abstinencia forzada). La razón principal por la que los usuarios de drogas eligen abstenerse son las consecuencias negativas asociadas con la búsqueda y el consumo de drogas8. La abstinencia impuesta por el castigo es un modelo animal que imita las consecuencias negativas asociadas con la búsqueda de drogas en la abstinencia autoimpuesta en humanos. Este modelo introduce un estímulo aversivo, por ejemplo, un golpe leve, con la búsqueda o toma de drogas, que lleva al animal a dejar de tomar la droga voluntariamente. Otro procedimiento que incorpora consecuencias negativas para la búsqueda de drogas es el modelo de conflicto de barrera eléctrica para la abstinencia y recaída de drogas9. La rata debe cruzar una barrera eléctrica para realizar el comportamiento operante relacionado con la autoadministración de drogas. El modelo fue utilizado con éxito para demostrar la abstinencia voluntaria y la recaída a psicoestimulantes y opioides10,11. Sin embargo, bajo el procedimiento de barrera eléctrica, los esfuerzos de búsqueda de drogas siempre están asociados con un evento aversivo, a diferencia de la condición humana. Además, el consumo de drogas en sí mismo podría superponerse con la descarga eléctrica a medida que el animal regresa al área segura después de la infusión cruzando la barrera nuevamente.
La abstinencia impuesta por el castigo se ha utilizado con otras drogas de abuso como la cocaína12, el alcohol 13, la metanfetamina 14, el remifentanilo15, pero nunca se aplicó a animales entrenados con heroína. El modelo se ha utilizado para estudiar la recaída inducida por el cebado14 y las señales asociadas al fármaco16, pero no se integró en un procedimiento de recaída inducida por el estrés. El procedimiento descrito aquí se utiliza para demostrar la recaída inducida por la privación aguda de alimentos a la búsqueda de heroína después de la abstinencia impuesta por el castigo en ratas macho.

<table><tbody><tr><td>Anafen Inyección 100 mg/mL Vial/50 mL</td><td>MERIAL Canada, Inc.</td><td>1938126</td><td>antiinflamatorio Brazo de</td></tr><tr><td>equilibrio</td><td>Coulbourn Instruments</td><td>H29-01</td><td></td></tr><tr><td>Cánulas (22 G, 5 ups)</td><td>Plastics One</td><td>C313G-5up</td><td></td></tr><tr><td>Placa de conexión de entorno & Cable Linc</td><td>Coulbourn Instruments</td><td>H03-04</td><td></td></tr><tr><td>Bomba de infusión de velocidad fija (3.3 RPM)</td><td>Coulbourn Instruments</td><td>A73-01-3.3</td><td></td></tr><tr><td>GE Silicio marino</td><td>GE</td><td>SE-1134</td><td></td></tr><tr><td>Notación gráfica de estado 3</td><td>Coulbourn Instruments</td><td>GS3</td><td>Software</td></tr><tr><td>Habitest universal Linc</td><td>Coulbourn Instruments</td><td>H02-08</td><td></td></tr><tr><td>Heroína HCl</td><td>Instituto Nacional para el Abuso de Drogas, Investigación Triangle Park, Carolina del Norte, EE. UU.</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Luz de la casa-Rata</td><td>Coulbourn Instruments</td><td>H11-01R</td><td></td></tr><tr><td>Isofluorano USP 99.9% vial/250 mL</td><td>Fresenius Kabi Canada Ltd</td><td>2237518</td><td></td></tr><tr><td>Giratorios líquidos, plástico, 22 g</td><td>Lomir Biomedical, Inc.</td><td>RSP1</td><td></td></tr><tr><td>Jaula de prueba para ratas</td><td>Coulbourn Instruments</td><td>H10-11R-TC</td><td>Cámaras de acondicionamiento operante</td></tr><tr><td>Palanca retráctil-Rat</td><td>Coulbourn Instruments</td><td>H23-17RA</td><td></td></tr><tr><td>Tubo silástico (ID 0.02, OD 0.037)</td><td>Fisher Scientific (Canadá)</td><td>1118915A</td><td></td></tr><tr><td>Un solo taco de alto brillo Rat</td><td>Coulbourn Instruments</td><td>H11-03R</td><td></td></tr><tr><td>Sound cajas de atenuación</td><td>Universidad de Concordia</td><td>Hecho</td><td></td></tr> en <tr><td>casa Piso de rejilla de acero inoxidable</td><td>Coulbourn Instruments</td><td>H10-11R-TC-SF</td><td></td></tr><tr><td>Controlador de sistema 2</td><td>Coulbourn Instruments</td><td>SYS CTRL 2</td><td></td></tr><tr><td>Base de alimentación del sistema</td><td>Coulbourn Instruments</td><td>H01-01</td><td></td></tr><tr><td>Módulo de tono 2.9 KHz</td><td>Coulbourn Instruments</td><td>H12-02R-2.9</td><td></td></tr><tr><td>Tubo Tygon (ID 0.02, OD 0.060)</td><td>VWR</td><td>63018-044</td><td></td></tr></tbody></table>

un procedimiento para estudiar la recaída inducida por el estrés de la búsqueda de heroína después de la abstinencia impuesta por el castigo

A Procedure to Study Stress-Induced Relapse of Heroin Seeking after Punishment-Imposed Abstinence

El procedimiento de abstinencia impuesto por el castigo modela la abstinencia autoimpuesta que los humanos inician debido a las consecuencias adversas asociadas con el consumo de drogas. Este modelo se ha implementado en experimentos con diferentes tipos de sustancias de abuso como la metanfetamina, la cocaína y el alcohol. Sin embargo, no se ha demostrado la abstinencia inducida por el castigo en animales entrenados con heroína. Además, el estrés agudo es un desencadenante clave de la recaída en humanos y modelos animales. Anteriormente se demostró que la privación aguda de alimentos indujo enérgicamente el restablecimiento de la búsqueda de cocaína y heroína extinguidas. El procedimiento descrito aquí se puede utilizar para evaluar los efectos de la exposición al estrés agudo en la búsqueda de heroína después de la abstinencia impuesta por el castigo. A un total de 8 ratas se les implantaron catéteres intravenosos crónicos (i.v.) y se les entrenó para autoadministrarse heroína (0,1 mg/kg/infusión) durante 18 días bajo un programa encadenado de búsqueda-toma. Completar el enlace de búsqueda dio acceso a la palanca de toma, que se combinó con una infusión de heroína. La palanca de búsqueda se programó con un programa de refuerzo de intervalo variable 60 (VI60), y la palanca de toma se programó con un programa de refuerzo de relación fija 1 (FR1). Después del entrenamiento de autoadministración, se administró un choque leve en el pie en el 30% de los enlaces de búsqueda completados en lugar de la extensión de la palanca de toma. La intensidad del golpe de pie se incrementó en 0,1 mA por sesión diaria de 0,2 mA a 1,0 mA. Las pruebas de búsqueda de heroína se realizaron después de 24 h de privación de alimentos (DF) o condiciones de saciedad. Las ratas en condiciones de privación aguda de alimentos aumentaron considerablemente la búsqueda de heroína después de la abstinencia impuesta por el castigo.

Las ratas macho demostraron un aumento en las prensas de palanca de búsqueda a medida que el programa de refuerzo aumentaba durante los días de entrenamiento, y un número confiable y constante de infusiones de heroína durante los días de entrenamiento (Figura 1). Durante el castigo, las ratas disminuyeron el número de prensas de palanca de búsqueda e infusiones con el aumento de la intensidad del golpe de pie durante 8 días de castigo (Figura 2). La condición de...

Se describe un procedimiento que demuestra una recaída aguda robusta inducida por la privación de alimentos a la búsqueda de heroína después de la abstinencia impuesta por el castigo. Se implementó con éxito un modelo de abstinencia impuesto por el castigo utilizando el programa de cadena de buscar y tomar para la autoadministración de heroína. Las pruebas de búsqueda de heroína se realizan después de 24 horas de estrés por privación de alimentos.

Un procedimiento para estudiar la recaída inducida por el estrés de la búsqueda de heroína después de la abstinencia impuesta por el castigo

The punishment-imposed abstinence procedure models the self-imposed abstinence that humans initiate due to the adverse consequences associated with ...

Es la primera vez que se muestra una recaída inducida por el estrés a la heroína después de la abstinencia impuesta por el castigo. Estos métodos podrían ayudarnos a comprender el mecanismo neuronal subyacente a la recaída inducida por el estrés en humanos después de la abstinencia voluntaria. Al utilizar la privación de alimentos y la abstinencia impuesta por el castigo, estamos imitando más de cerca la condición humana y aportando validez ecológica a los modelos animales de recaída.Comience por configurar las cámaras de condicionamiento operantes como se describe en el manuscrito. Después de la recuperación de la cirugía, habitúe a la rata en la cámara de entrenamiento operante durante 24 horas antes de iniciar el protocolo sin unir la rata al resorte metálico. Coloque la rata alojada en las cámaras operantes durante todo el experimento.A continuación, conecte el conector 5up al tubo Tygon y al resorte metálico. Comience la sesión de entrenamiento al inicio de la fase oscura del ciclo de luz invertida. Para la autoadministración de heroína, la palanca de toma debe estar disponible bajo proporción fija uno, o FR uno.Programe cada prueba para comenzar con la inserción de la palanca de toma y el encendido de la luz de la casa. Una vez que la rata presione la palanca de toma una vez, retraiga la palanca de toma, encienda la luz de señal sobre la palanca y tone durante un período de tiempo de espera de 20 segundos. Apague la luz de la casa y permita la entrega de 0.13 mililitros de infusión de heroína a una dosis de 0.1 miligramos por kilogramo.Luego programe un intervalo intertrial de 30 segundos en el que no se presenten señales, se apague la luz de la casa y se retraiga la palanca. Para la próxima prueba, inserte la palanca de toma y encienda la luz de la casa. Para la autoadministración con la cadena de toma de búsqueda bajo FR uno, programe el sistema de entrenamiento operante para insertar solo la palanca de búsqueda y encienda la luz de la casa para señalar el comienzo de la sesión con la palanca de toma en un estado retraído.Una vez que la rata presiona una vez la palanca de búsqueda, el programa retrae la palanca de búsqueda e inserta la palanca de toma. Una pulsación en la palanca de toma retrae la palanca de toma e inicia el procedimiento de encender la luz de señal, y un intervalo intertrial de 30 segundos, como se demostró anteriormente. Después del intervalo entre juicios, programe el sistema de entrenamiento operante para insertar la palanca de búsqueda y encienda la luz de la casa para indicar el comienzo de la próxima prueba.A continuación, programe todos los pasos para la autoadministración con una cadena de toma de búsqueda bajo una proporción fija uno, como se demostró anteriormente con la introducción de un intervalo variable de cinco durante tres días como el nuevo programa de refuerzo en la palanca de búsqueda. Configure el software para permitir que la primera pulsación en la palanca de búsqueda active el intervalo variable cinco horarios. Permita que el software seleccione aleatoriamente un tiempo de intervalo de una lista de 0.1, cinco y 10 segundos, lo que resulta en un intervalo promedio de cinco segundos.Una vez transcurrido el intervalo seleccionado, la primera presión de la palanca de búsqueda retrae la palanca de búsqueda y extiende la palanca de toma. Después de seguir los pasos para la palanca de toma, y cuando termine la prueba, entrene a la rata durante cinco días bajo el intervalo variable 30 para el enlace de búsqueda. Para hacerlo, permita que el software seleccione aleatoriamente un tiempo de una lista de 15, 30 y 45 segundos durante un promedio de 30 segundos.Luego, entrene ratas durante tres días bajo intervalos variables 60 horarios, lo que permite que el software seleccione aleatoriamente un tiempo de una lista de 45, 60 y 75 segundos. Para la abstinencia impuesta por el castigo, realice sesiones de castigo durante ocho días con supervisión regular para garantizar que las ratas no muestren signos de dolor anormal o problemas de salud. Comience las sesiones de castigo con la inserción de la palanca de búsqueda y encendiendo la luz de la casa.Programe el sistema de entrenamiento operante para que después de completar el enlace de búsqueda en el intervalo variable 60, la palanca de búsqueda se retraiga, la luz de la casa se apague y se administre un leve golpe de pie a la rata en el 30% de los eslabones de búsqueda completados en lugar de insertar la palanca de toma. La palanca de toma se extiende en el otro 70% de los enlaces de búsqueda completados como en el ensayo regular de autoadministración. Después de programar un intervalo entre pruebas de siete minutos, establezca la intensidad del choque del pie en 0.2 miliamperios y aumente en 0.1 miliamperios por día de castigo hasta 1.0 miliamperios.Una vez que la rata presiona la palanca de toma, repita la proporción fija un paso para la retracción de la palanca, la administración de la infusión de heroína y la presentación de las señales seguidas de un intervalo intertrial de siete minutos. Después del último día de la abstinencia impuesta por el castigo, retire las tolvas de alimentos de las cámaras para las ratas que se someten a una prueba de recaída inducida por privación de alimentos, y mantenga las tolvas de alimentos para el grupo saciado. Proporcionar acceso ilimitado al agua en ambos grupos y supervisar la salud de los animales.Después de 24 horas de privación de alimentos, proceda a una prueba de búsqueda de heroína inducida por privación de alimentos de tres horas bajo un intervalo variable 60 con un intervalo entre juicios de siete minutos sin descargas ni infusiones de heroína. Después de la sesión, devuelva las tolvas de alimentos a las ratas privadas de alimentos. Al día siguiente, retire las tolvas de alimentos de las cámaras de las ratas que estaban saciadas en la primera prueba de recaída.Permita que las ratas previamente privadas de alimentos tengan acceso ilimitado a los alimentos antes y durante la prueba. Después de 24 horas de privación de alimentos, realice una prueba de búsqueda de heroína de tres horas, como se demostró anteriormente. En el estudio, las ratas macho demostraron un aumento en las prensas de palanca de búsqueda a medida que aumentaba el programa de refuerzo.Se observó un número confiable y constante de infusiones de heroína durante los días de entrenamiento. Durante el castigo, las ratas disminuyeron el número de prensas de palanca de búsqueda e infusiones con el aumento de la intensidad del choque del pie durante ocho días de castigo. En la prueba de búsqueda de heroína, la condición de privación de alimentos aumentó significativamente la búsqueda de heroína después de la abstinencia impuesta por el castigo, y no se observó ningún efecto estadísticamente significativo para el tiempo ni para la búsqueda de drogas a lo largo del tiempo a través de las condiciones de alimentación.Sin este paso, los animales no podrán avanzar en los experimentos. Después de implementar el modelo, ahora podemos diseñar experimentos que analicen la neurobiología de la recaída inducida por el estrés después de la abstinencia voluntaria.

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Research

Investigación

JoVE Journal

Behavior

Comportamiento

Los modelos animales de recaída, conocidos como procedimientos de reintegro, se han utilizado ampliamente para estudiar el papel del estrés en la recaída en la búsqueda de drogas. Aquí, nos informe sobre un método para inducir el restablecimiento de la cocaína que buscan en ratas de laboratorio a través de las exposiciones agudas al estímulo eléctrico plantar leve, eléctrico intermitente.

Un procedimiento para el estudio de la reposición de estímulo eléctrico plantar inducido por la cocaína Buscando en ratas de laboratorio

Responder a las señales de alimentos o medicamentos por pares aumenta a lo largo de un período de abstinencia y esto puede relacionarse con una mayor susceptibilidad a las conductas recaída. Aquí detallamos un procedimiento para la evaluación de esta "incubación del deseo" en las ratas que se han auto-administrado sacarosa.

Un método general para la evaluación de incubación de sacarosa en ratas Deseo

Un procedimiento que permite una demostración del aumento robusto de búsqueda de drogas en ratas con restricción alimenticia se describe. Después del entrenamiento de auto-administración de heroína, las ratas pasan por un período de abstinencia, en un ambiente libre de drogas, durante los cuales son levemente comida restringida. Búsqueda de drogas se prueba a continuación, en el medio ambiente asociados con las drogas.

Un procedimiento para estudiar el efecto de la prolongada restricción de alimentos en heroína Buscando en ratas abstinentes

Reactividad de CUE se conceptualiza como la sensibilidad a las señales vinculadas con experiencias de consumo de drogas que contribuyen al deseo y la recaída en seres humanos abstinentes. Reactividad de CUE está modelada en ratas por medida atencional orientación hacia estímulos asociados a drogas que se traduce en comportamiento de acercamiento apetitivo en una prueba de reactividad localización tras la administración por cuenta propia y forzada abstinencia.

Un protocolo para medir la reactividad de Cue en un modelo de rata de trastorno de uso de cocaína

Este protocolo describe la preferencia de lugar condicionada (CPP) como un modelo de recaída. Este procedimiento permite la medición de la recaída en animales de laboratorio, considerando el impacto de señales ambientales asociada a drogas como ansias y recaída en absteniéndose de adictos es actualmente el foco de los programas de tratamiento de abuso de drogas.

Reintegro de la búsqueda de drogas en ratones utilizando el paradigma de preferencia condicionada del lugar

Aquí, un protocolo de morfina acondicionado lugar preferencia (CPP) se describe a medida incubación de antojo en ratas.

Un protocolo de preferencia de lugar condicionada para medir la incubación de antojo en ratas

Este modelo de conflicto se utiliza para medir el deterioro del control inhibitorio después de exposición a drogas adictivas, u otros factores que influyen en control inhibitorio. Un estímulo sexual y un obstáculo aversivo se presentan simultáneamente, así las ratas macho tienen que vencer el obstáculo para acercarse a la recompensa sexual.

Un modelo de conflicto de comportamiento de búsqueda de recompensa en las ratas macho

La UCIN Red neuroconductual Escala (NNNS) fue desarrollado como una evaluación para el niño en situación de riesgo. El propósito de este artículo es describir la NNNS, proporcionar ejemplos en vídeo de los procedimientos NNNS y discutir las formas en que el examen se ha utilizado.

Valoración y Evaluación del neonato de alto riesgo: La Escala UCIN Red neuroconductual

Un procedimiento para el estudio de la capacidad de un contexto ambiental de alcohol asociado a desencadenar la renovación de la conducta de búsqueda de alcohol en ratas se describe.

Un procedimiento para observar inducida Contexto-Renovación-pavloviano acondicionado Alcohol comportamiento de búsqueda en ratas

Aquí, los métodos para el desarrollo de un modelo de ratón de estrés derrota social, subcrónica y leves se describen y se utilizan para investigar las características patogénicas de la depresión, incluyendo hyperphagia- y síntomas como polidipsia siguientes aumento del peso corporal.

Un modelo de ratón de subcrónica y leve estrés Derrota Social para Entender déficits conductuales y fisiológicos inducidos por el estrés

Aprende un modelo de recaída por estrés en ratas tras abstinencia impuesta por castigo usando privación alimentaria. Este método mejora la validez ecológica para estudiar mecanismos neuronales de adicción.

Un procedimiento para estudiar la recaída inducida por el estrés de la búsqueda de heroína después de la abstinencia impuesta por el castigo (Video) | JoVE Journal

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