Name: Metodología para probar agentes de control e insecticidas contra el barrenador de la baya del café Hypothenemus hampei (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2022-03-23T14:30:00.000+00:00
Duration: 9 min 23 s
Description: Aprende a evaluar la toxicidad de insecticidas contra Hypothenemus hampei usando frutos de café verdes desinfectados. Este protocolo permite medir mortalidad, repelencia y capacidad reproductiva del insecto.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

playerTrialDesktop

Los autores expresan su agradecimiento a la Federación Nacional de Cafeteros de Colombia, a los asistentes del Departamento de Entomología (Diana Marcela Giraldo, Gloria Patricia Naranjo), a la Estación Experimental Naranjal y a Jhon Félix Trejos.

NOTA: Este protocolo aborda diferentes métodos para identificar diferentes efectos sobre el CBB en condiciones de laboratorio.
1. Recolección de frutas
<ol><li>Elija GF con una edad de desarrollo de ~ 120-150 días después de la floración de los árboles en una plantación de café temprano en la mañana.</li>
</ol>2. Desinfección de frutas20
<ol><li>Lleve alrededor de 300 GFs al laboratorio. Seleccione GFs de tamaño uniforme y sanos y retire los pedúnculos.</li>
	<li>Sumerja los GF en una solución de jabón (2 ml de jabón líquido para lavar platos en 998 ml de agua del grifo), seguido de frotar para lavar los GF. Luego, enjuague las frutas con agua, cambiando el agua tres veces.</li>
	<li>Sumerja los GF en una solución de hipoclorito de sodio al 0,5% (100 ml en 900 ml de agua del grifo) y revuelva en un agitador a 110 rpm durante 15 min. Luego, enjuague los GF con agua revolviendo en una coctelera y cambiando el agua tres veces, cada 10 minutos.</li>
	<li>Seque los GF con toallas de papel estériles.</li>
	<li>Coloque los GF en bandejas (33 cm x 25 cm x 2 cm) e irradie durante 15 minutos, colocando los GF a una distancia de 55 cm de la fuente UV dentro de una estación de flujo laminar horizontal habilitada para UV.</li>
	<li>Durante el período de 15 minutos, cada 5 minutos, mueva los GF para garantizar la irradiación de la fruta entera.</li>
</ol>3. Desinfección de insectos21
<ol><li>Use insectos CBB recién surgidos (el mismo día) para configurar los bioensayos.</li>
	<li>Sumergir los CBB en una solución de hipoclorito de sodio al 0,5%, agitándolos lentamente con un cepillo durante 10 min.</li>
	<li>Filtre los CBB a través de un paño de muselina y lávelos tres veces con agua destilada estéril.</li>
	<li>Retire el exceso de agua con toallas de papel estériles.</li>
</ol>4. Evaluación de un producto con efecto protector sobre los frutos (preinfestación) (Figura 1)
<ol><li>Utilice un grupo de GF por unidad experimental. Generalmente, se utiliza un grupo de 30 GFs por unidad experimental.</li>
	<li>Coloque los GF en cajas de plástico (unidad experimental).</li>
	<li>Aplicar el producto de ensayo en las diferentes concentraciones para su evaluación. Realice la aplicación con una unidad pulverizadora portátil. Aquí se probó una emulsión alcaloide al 5% y al 6%.</li>
	<li>Como control, rocíe un grupo de GF con agua.</li>
	<li>Utilice al menos tres repeticiones (unidad experimental) por tratamiento, rociando una tras otra.</li>
	<li>En una campana estéril, libere dos adultos CBB por GF (se introducen un total de 60 CBB en las cajas de plástico). Después de 30 min, cubra las cajas.</li>
	<li>Deje las cajas de plástico con los GF infestados en una habitación o incubadora en condiciones controladas (oscuro, 25 ± 2 ° C y humedad relativa 71% ± 5%).</li>
	<li>Después de 1, 7, 15 y 21 días, cuente el número de frutos de barrenador e insectos vivos y muertos fuera de las frutas en cada caja.</li>
	<li>A los 20 días después de la infestación, diseccionar cada GF bajo un estereomicroscopio, con aumento 10x.</li>
	<li>Cuente el número de semillas sanas o semillas dañadas por los insectos en cada fruta.</li>
	<li>Contar las diferentes etapas biológicas de CBBobservadas 22 y contar el número de insectos muertos en cada semilla para determinar la mortalidad de insectos por unidad experimental.</li>
</ol>5. Evaluación del efecto de un producto después de la infestación por CBB (postinfestación) (Figura 3)
<ol><li>Utilizar grupos de 200 frutas por tratamiento.</li>
	<li>En la capucha estéril, libere a los adultos CBB (proporción 2: 1 de adultos CBB a GF) a los GF previamente desinfectados, permitiendo que la infestación proceda durante 3 h a 21 ° C.</li>
	<li>Examine los GF. Después de 3 h, la mayoría debe estar infestada, con el abdomen de los CBB aún expuesto (posición A20), como se muestra en la Figura 2.</li>
	<li>Seleccione 46 GF infestados (posición A) y colóquelos en bastidores de plástico de 96 pocillos (unidad experimental). Los frutos deben permanecer en esta posición para que el tratamiento pueda ser rociado directamente sobre el CBB perforando el fruto.</li>
	<li>Rocíe al menos tres veces (tres bastidores) por tratamiento, uno tras otro, cubriendo los bastidores después de 30 min.</li>
	<li>Deje los bastidores con los GF infestados en una habitación o incubadora en condiciones controladas (oscuro, 25 ± 2 ° C y humedad relativa 71% ± 5%).</li>
	<li>Después de 20 días, diseccione los GF bajo un estereomicroscopio a un aumento de 10x.</li>
	<li>Cuente el número de semillas sanas o semillas dañadas por los insectos en cada fruta.</li>
	<li>Cuente las diferentes etapas biológicas de CBB22 y el número de insectos muertos en cada semilla para determinar la mortalidad de insectos por unidad experimental.</li>
</ol>6. Evaluación de un producto con un efecto disuasorio sobre el CBB
<ol><li>Siga los pasos 4.1-4.6 descritos para evaluar un producto con un efecto protector sobre las frutas.</li>
	<li>Después de liberar a los adultos CBB en las cajas de plástico, cuente el número de CBB que vuelan lejos de las cajas y el número que infesta los GFs. A continuación, siga los pasos 4.7 a 4.11.</li>
	<li>Siga los pasos 5.1-5.5 descritos para evaluar el producto después de la infestación de CBB.</li>
	<li>Después de rociar cada tratamiento en los insectos en la posición A, cuente el número de CBB que salieron del GF y / o volaron lejos del GF. A continuación, siga los pasos 5.6-5.9.</li>
</ol>7. Análisis estadístico
NOTA: Las variables de respuesta son los porcentajes de mortalidad a lo largo del tiempo y el porcentaje de semillas de café sanas no infestadas.
<ol><li>Estimar el promedio y la desviación estándar de cada variable de respuesta para cada tratamiento.</li>
	<li>Realizar análisis de varianza para cada variable de respuesta con un modelo para un diseño completamente aleatorizado. NOTA: La prueba de comparación del 5% de Dunnett se realiza para comparar los tratamientos con el control absoluto (control del agua).</li>
	<li>Cuando los tratamientos son significativamente diferentes del control absoluto, use una prueba de diferencia menos significativa (LSD) del 5% para comparar los tratamientos.</li>
	<li>Evaluar el poder de la prueba; si es superior al 85%, se cumplen los supuestos de normalidad y homogeneidad de las varianzas.</li>
</ol><img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/63694/63694fig01.jpg"> Figura 1: Procedimiento para la evaluación de los efectos preinfestantes de los insecticidas en el CBB. Pasos para evaluar los efectos previos a la infestación de los insecticidas sobre Hypothenemus hampei (CBB) utilizando frutos verdes (GFs). (A) Selección de frutas. (B) Pulverización de los insecticidas sobre las frutas del café. (C) Infestación de CBB de frutas de café en una proporción de 2: 1 CBB por GF. D) Frutos infestados. E) Incubación de los frutos en condiciones controladas. F) Disección de frutas. (G) Contar la población de CBB dentro de las semillas. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/63694/63694fig01large.jpg" target="_blank">Haga clic aquí para ver una versión más grande de esta figura.</a>
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/63694/63694fig02.jpg"> Figura 2: Procesar la infestación de CBB de las frutas de café. Las frutas infestadas contienen adultos CBB con el abdomen parcialmente expuesto (posición A). <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/63694/63694fig02large.jpg" target="_blank">Haga clic aquí para ver una versión más grande de esta figura.</a>
<img alt="Figure 3" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/63694/63694fig03.jpg"> Figura 3: Procedimiento para la evaluación de los efectos de posinfestación de los insecticidas sobre el CBB. Pasos para evaluar los efectos postinfestación de los insecticidas en el CBB utilizando GFs. (A) Selección de frutas. (B) Infestación de los frutos con CBB en una proporción de 2:1 CBB por GF. (C) Selección de frutas infestadas. (D) Pulverización del insecticida sobre los frutos. (E) Incubación de los frutos. F) Disección de frutas. G) Contabilización de la población CBB. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/63694/63694fig03large.jpg" target="_blank">Haga clic aquí para ver una versión más grande de esta figura.</a>

<ol><li>Mendesil, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Semiochemicals+used+in+host+location+by+the+coffee+berry+borer%2C+Hypothenemus+hampei%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Chemical+Ecology%22%5BJournal%5D)">Semiochemicals used in host location by the coffee berry borer, Hypothenemus hampei.</a> Journal of Chemical Ecology. 35 (8), 944-950 (2009).</li>
<li>Jaramillo, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Coffee+berry+borer+joins+bark+beetles+in+coffee+klatch%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+ONE%22%5BJournal%5D)">Coffee berry borer joins bark beetles in coffee klatch.</a> PLoS ONE. 8 (9), 74277(2013).</li>
<li>Giraldo-Jaramillo, M., Garcia, A. G., Parra, J. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Biology%2C+thermal+requirements%2C+and+estimation+of+the+number+of+generations+of+Hypothenemus+hampei+%28Ferrari%2C+1867%29+%28Coleoptera%3A+Curculionidae%29+in+the+state+of+S%C3%A3o+Paulo%2C+Brazil%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Economic+Entomology%22%5BJournal%5D)">Biology, thermal requirements, and estimation of the number of generations of Hypothenemus hampei (Ferrari, 1867) (Coleoptera: Curculionidae) in the state of São Paulo, Brazil.</a> Journal of Economic Entomology. 111 (5), 2192-2200 (2018).</li>
<li>Benavides, P., Góngora, C., Bustillo, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((IPM+Program+to+Control+Coffee+Berry+Borer+Hypothenemus+hampei%2C+with+Emphasis+on+Highly+Pathogenic+Mixed+Strains+of+Beauveria+bassiana%2C+to+Overcome+Insecticide+Resistance+in+Colombia%5BTitle%5D)+AND+%22IntechOpen%22%5BJournal%5D)">IPM Program to Control Coffee Berry Borer Hypothenemus hampei, with Emphasis on Highly Pathogenic Mixed Strains of Beauveria bassiana, to Overcome Insecticide Resistance in Colombia.</a> IntechOpen. , (2012).</li>
<li>Martínez, C. P., Echeverri, C., Florez, J. C., Gaitan, A. L., Góngora, C. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In+vitro+production+of+two+chitinolytic+proteins+with+an+inhibiting+effect+on+the+insect+coffee+berry+borer%2C+Hypothenemus+hampei+%28Ferrari%29+%28Coleoptera%3A+Curculionidae%29+and+the+fungus+Hemileia+vastatrix+the+most+limiting+pests+of+coffee+crops%5BTitle%5D)+AND+%22AMB+Express%22%5BJournal%5D)">In vitro production of two chitinolytic proteins with an inhibiting effect on the insect coffee berry borer, Hypothenemus hampei (Ferrari) (Coleoptera: Curculionidae) and the fungus Hemileia vastatrix the most limiting pests of coffee crops.</a> AMB Express. 2, 1-11 (2012).</li>
<li>Padilla, B. E., Acuña, Z., Velásquez, C. S., Rubio, G. J. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Inhibitors+of+%5Balpha%5D-amylases+from+the+coffee+berry+borer+Hypothenemus+hampei+in+different+plant+species%5BTitle%5D)+AND+%22Revista+Colombiana+de+Entomolog%C3%ADa%22%5BJournal%5D)">Inhibitors of [alpha]-amylases from the coffee berry borer Hypothenemus hampei in different plant species.</a> Revista Colombiana de Entomología. 32 (2), 125-130 (2006).</li>
<li>Alvarez, J. H., Cortina, H. A., Villegas, J. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Methods+to+evaluate+antibiosis+to+Hypothenemus+hampei+Ferrari+in+coffee+under+controlled+conditions%5BTitle%5D)+AND+%22Cenicaf%C3%A9%22%5BJournal%5D)">Methods to evaluate antibiosis to Hypothenemus hampei Ferrari in coffee under controlled conditions.</a> Cenicafé. 52 (3), 205-214 (2001).</li>
<li>Arcila, A., Duarte, A. F., Villalba, D. A., Benavides, P. New Product in the Integrated Management of the Coffee Berry Borer in Colombia. National Coffee Research Center (Cenicafé). , Available from: 
 <a target="_blank" href="https://biblioteca.cenicafe.org/handle/10778/477">https://biblioteca.cenicafe.org/handle/10778/477</a> (2014).</li>
<li>Jaramillo, J., Montoya, E., Benavides, P., Góngora, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Beauveria+bassiana+and+Metarhizium+anisopliae+for+the+control+of+coffee+brocade+in+fruits+on+the+ground%5BTitle%5D)+AND+%22Revista+Colombiana+de+Entomolog%C3%ADa%22%5BJournal%5D)">Beauveria bassiana and Metarhizium anisopliae for the control of coffee brocade in fruits on the ground.</a> Revista Colombiana de Entomología. 41, 95-104 (2015).</li>
<li>Bastidas, A., Velásquez, E., Benavides, P., Bustillo, A., Orozco, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Evaluation+of+preformulated+Beauveria+bassiana+%28B%C3%A1lsam%29+Vuillemin%2C+for+the+control+of+the+coffee+berry+borer%5BTitle%5D)+AND+%22Agronomia%22%5BJournal%5D)">Evaluation of preformulated Beauveria bassiana (Bálsam) Vuillemin, for the control of the coffee berry borer.</a> Agronomia. 17, 44-61 (2009).</li>
<li>Villalba-Gault, D., Bustillo, A., Chaves Cordoba, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Evaluation+of+insecticides+for+the+control+of+the+coffee+berry+borer+in+Colombia%5BTitle%5D)+AND+%22Cenicafe%22%5BJournal%5D)">Evaluation of insecticides for the control of the coffee berry borer in Colombia.</a> Cenicafe. 46, 152-163 (1995).</li>
<li>Bustillo, A. E., Orozco, J., Benavides, P., Portilla, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mass+production+and+use+of+parasitoids+for+the+control+of+the+coffee+berry+borer+in+Colombia%5BTitle%5D)+AND+%22Cenicafe%22%5BJournal%5D)">Mass production and use of parasitoids for the control of the coffee berry borer in Colombia.</a> Cenicafe. 47 (4), 215-230 (1996).</li>
<li>Celestino, F. N., Pratissoli, D., Machado, L. C., Santos Junior, H. J. G. D., Mardgan, L., Ribeiro, L. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Adaptation+of+breeding+techniques+of+the+coffee+berry+borer+%5BHypothenemus+hampei+%28Ferrari%29%5BTitle%5D)+AND+%22Coffee+Science%22%5BJournal%5D)">Adaptation of breeding techniques of the coffee berry borer [Hypothenemus hampei (Ferrari).</a> Coffee Science. 11 (2), 161-168 (2016).</li>
<li>Domínguez, L., Parzanese, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ultraviolet+light+in+food+preservation%5BTitle%5D)+AND+%22Argentine+Foods%22%5BJournal%5D)">Ultraviolet light in food preservation.</a> Argentine Foods. 52 (2), 70-76 (2012).</li>
<li>Jaramillo, J., Chabi-Olaye, A., Poehling, H. M., Kamonjo, C., Borgemeister, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Development+of+an+improved+laboratory+production+technique+for+the+coffee+berry+borer+Hypothenemus+hampei%2C+using+fresh+coffee+berries%5BTitle%5D)+AND+%22Entomologia+Experimentalis+et+Applicata%22%5BJournal%5D)">Development of an improved laboratory production technique for the coffee berry borer Hypothenemus hampei, using fresh coffee berries.</a> Entomologia Experimentalis et Applicata. 130 (3), 275-281 (2009).</li>
<li>Pérez, J., Infante, F., Vega, F. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Does+the+coffee+berry+borer+%28Coleoptera%3A+Scolytidae%29+have+mutualistic+fungi%5BTitle%5D)+AND+%22Annals+of+the+Entomological+Society+of+America%22%5BJournal%5D)">Does the coffee berry borer (Coleoptera: Scolytidae) have mutualistic fungi.</a> Annals of the Entomological Society of America. 98 (4), 483-490 (2005).</li>
<li>Benavides, P., Gil, P., Góngora, C., Arcila, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Integrated+pest+management.+Cenicafe.+Manual+of+the+Colombian+coffee+grower%3A+Research+and+technology+for+the+sustainability+of+coffee+growing%5BTitle%5D)+AND+%22Manizales%3A+FNC%3A+Cenicaf%C3%A9%22%5BJournal%5D)">Integrated pest management. Cenicafe. Manual of the Colombian coffee grower: Research and technology for the sustainability of coffee growing.</a> Manizales: FNC: Cenicafé. 3, 179-214 (2013).</li>
<li>Bustillo, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+review+of+the+coffee+berry+borer%2C+Hypothenemus+hampei+%28Coleoptera%3A+Curculionidae%3A+Scolytinae%29%2C+in+Colombia%5BTitle%5D)+AND+%22Revista+Colombiana+de+Entomolog%C3%ADa%22%5BJournal%5D)">A review of the coffee berry borer, Hypothenemus hampei (Coleoptera: Curculionidae: Scolytinae), in Colombia.</a> Revista Colombiana de Entomología. 32 (2), 101-116 (2006).</li>
<li>Arcila, A., Benavides, P., Mejia, J. New Chemical Control Alternative for the Integrated Management of the Coffee Berry Borer. National Coffee Research Center (Cenicafé). , Available from: 
 <a target="_blank" href="https://biblioteca.cenicafe.org/handle/10778/557">https://biblioteca.cenicafe.org/handle/10778/557</a> (2015).</li>
<li>Tapias, L., Martinez, C., Benavides, P., Gongora, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Laboratory+method+to+evaluate+the+effect+of+insecticides+on+the+coffee+berry+borer%5BTitle%5D)+AND+%22Cenicaf%C3%A9%22%5BJournal%5D)">Laboratory method to evaluate the effect of insecticides on the coffee berry borer.</a> Cenicafé. 68 (2), 76-89 (2017).</li>
<li>Bustillo, A. E., Marín, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((How+to+reactivate+the+virulence+of+Beauveria+bassiana+to+control+the+coffee+berry+borer%5BTitle%5D)+AND+%22Manejo+Integrado+de+Plagas%22%5BJournal%5D)">How to reactivate the virulence of Beauveria bassiana to control the coffee berry borer.</a> Manejo Integrado de Plagas. 63, (2002).</li>
<li>Constantino, L. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((morphological+and+genetic+aspects+of+Hypothenemus+obscurus+and+Hypothenemus+hampei+%28Coleoptera%3A+Curculionidae%3A+Scolytinae%29%5BTitle%5D)+AND+%22Revista+Colombiana+de+Entomolog%C3%ADa%22%5BJournal%5D)">morphological and genetic aspects of Hypothenemus obscurus and Hypothenemus hampei (Coleoptera: Curculionidae: Scolytinae).</a> Revista Colombiana de Entomología. 37 (2), 173-182 (2011).</li>
<li>Estrela, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mechanism+of+action+of+sodium+hypochlorite%5BTitle%5D)+AND+%22Brazilian+Dental+Journal%22%5BJournal%5D)">Mechanism of action of sodium hypochlorite.</a> Brazilian Dental Journal. 13 (2), 113-117 (2002).</li>
<li>Diffey, B. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Solar+ultraviolet+radiation+effects+on+biological+systems%5BTitle%5D)+AND+%22Physics+in+Medicine+and+Biology%22%5BJournal%5D)">Solar ultraviolet radiation effects on biological systems.</a> Physics in Medicine and Biology. 36 (3), 299-328 (1991).</li>
<li>BIOCAFE. , Available from: 
 <a target="_blank" href="http://avispitas.blogspot.com/p/biocafe.html">http://avispitas.blogspot.com/p/biocafe.html</a> (2022).</li>
<li>Bustillo, A. E., et al. Integrated Management of the Coffee Berry Borer: Hypothenemus hampei Ferrari in Colombia. , Available from: 
 <a target="_blank" href="https://biblioteca.cenicafe.org/hangle/10778/848">https://biblioteca.cenicafe.org/hangle/10778/848</a> (1998).</li>
<li>Portilla, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Development+and+evaluation+of+an+artificial+diet+for+the+rearing+of+Hypothenemus+hampei%5BTitle%5D)+AND+%22Cenicaf%C3%A9%22%5BJournal%5D)">Development and evaluation of an artificial diet for the rearing of Hypothenemus hampei.</a> Cenicafé. 50, 24-38 (1999).</li>
<li>Portilla, R. M., Streett, D. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((New+techniques+for+automated+mass+production+of+Hypothenemus+hampei+on+the+modified+Cenibroca+artificial+diet%5BTitle%5D)+AND+%22Cenicaf%C3%A9%22%5BJournal%5D)">New techniques for automated mass production of Hypothenemus hampei on the modified Cenibroca artificial diet.</a> Cenicafé. 57, 37-50 (2006).</li>
</ol>

Ninguno de los autores tiene conflictos de intereses que declarar.

En este protocolo, la desinfección de los frutos, así como de los insectos, son pasos críticos. Cuando se utilizan frutos del campo en el laboratorio, con frecuencia muestran alta contaminación y deshidratación ya que microorganismos y ácaros están presentes en la epidermis 7,15,16. Por lo tanto, el uso de frutas o insectos que no se desinfectan causará la muerte de insectos debido a la contaminación causada por microorganismos,...

El barrenador de la baya del café (CBB), Hypothenemus hampei, se detectó por primera vez en 1988 en Colombia y desde entonces se ha convertido en la especie de plaga más importante del cultivo de café. Las hembras CBB dejan el fruto natal ya fertilizado, buscando nuevos frutos guiados por los químicos volátiles que emiten 1,2. Un ciclo completo se cumple dentro de los 23 días3 a una temperatura de 25 °C. El ciclo comienza con la hembra fundadora penetrando la semilla y poniendo huevos en el endospermo de la fruta. Las larvas eclosed comen la semilla. Si los frutos se diseccionan en este punto, sería posible observar tanto a la hembra fundadora como a su descendencia. Después de 14 días, las larvas se convierten en pupas, generalmente, la etapa de pupas dura 5 días. En la etapa adulta, las hembras copulan con sus hermanos, y las hembras recién fertilizadas vuelan lejos de las frutas dañadas en busca de nuevas frutas de café para comenzar un nuevo ciclo4.
Tanto el proceso de penetración como el resultado de la alimentación larvaria dañan la semilla de café, disminuyendo la calidad de la bebida de café y reduciendo significativamente los ingresos; la infestación superior al 5% en las plantaciones de café generalmente se considera el umbral económico.
El control de CBB se basa en una estrategia de manejo integrado de plagas (MIP), que incluye el control cultural y las prácticas agronómicas, los agentes biológicos naturales y el uso de insecticidas químicos, lo que requiere condiciones de seguridad y aplicación oportuna4.
Para evaluar nuevos insecticidas para el control del CBB, se necesitan metodologías de bajo costo que permitan obtener resultados rápidos. Actualmente se utilizan tanto procedimientos de laboratorio como de campo, incluidas dietas artificiales que contienen café en las que se incorporan los insecticidas 5,6, o rociar los insecticidas sobre café pergamino seco 7,8,9. Además, se han reportado experimentos realizados en campo utilizando ramas de cafeto cubiertas con mangas entomológicas10,11; sin embargo, estos métodos requieren un trabajo de parto intenso y largos períodos de evaluación.
Una condición que se asemeja a las condiciones naturales del campo, que también es rápida y económica, es el uso de frutas de café verde o maduras. No obstante, estos frutos deben mantenerse en condiciones adecuadas para el desarrollo del CBB, evitando alteraciones y contaminantes por microorganismos para mantener su calidad y propiedades. Para ello, se han utilizado diferentes desinfectantes, así como procedimientos de calor y radiación 7,9,12,13,14,15,16.
Además, los métodos para la evaluación de insecticidas contra el CBB requieren simulaciones de hembras adultas volando en busca de frutos o penetrando en esos frutos17,18. Para ello, se han realizado infestaciones artificiales de frutos en el campo 8,11,19, aunque este proceso es laborioso y depende de las condiciones ambientales.
Aquí, describimos una metodología estandarizada para la evaluación de productos que pueden tener diferentes efectos en el CBB bajo condiciones ambientales controladas que se asemejan a las condiciones del campo.

<table><tbody><tr><td>Vaso de precipitados con pico, forma baja 500</td><td>mL MARCA PP</td><td></td><td></td></tr> BR87826 <tr><td>Agitador de sobremesa</td><td>New Brunswick Scientific Innova 4000 Incubadora</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Jabón líquido para lavar platos-AXION</td><td>Colgate-Palmolive</td><td>Campana AXION</td><td></td></tr><tr><td>; Estación de flujo laminar horizontal</td><td>Terra Universal</td><td></td><td>&nbsp; Acero con recubrimiento en polvo, 1930 mm de ancho x 1118 mm de profundidad x 1619 mm de alto, 120 V (https://www.terrauniversal.com/hood-horizontal-laminar-flow-station-9620-64a.html)</td></tr><tr><td>Insectos CBB</td><td>BIOCAFE</td><td></td><td>(http://avispitas.blogspot.com/p/biocafe.html).</td></tr><tr><td>Toallas de papel blancas Multi Fold</td><td>Familia</td><td>73551</td><td></td></tr><tr><td>Preval Spray unit</td><td>&nbsp; Preval Merck</td><td>Z365556-1KT</td><td>https://www.sigmaaldrich.com/CO/es/product/sigma/z365556?gclid=Cj0KCQiAweaNBhDEARIsAJ 5hwbfZOy1TWGj6huatFtRQt AzOyHe5-oBiKnOUK2T1exuuk WwJLdvxkvsaAjoYEALw_wcB</td></tr><tr><td>Bastidores reversibles</td><td>HeathrowHojas</td><td></td> de bisturí <td>HEA2345A https://www.heathrowscientific.com/reversible-racks-96-well-i-hea2345a</td></tr><tr><td>N 11</td><td>Merck</td><td>S2771-100EA</td><td></td></tr><tr><td>Mangos de bisturí N3</td><td>Merck</td><td>S2896-1EA</td><td></td></tr><tr><td>Hipocloruro de sodio</td><td>La empresa clorox</td><td>Microscopio</td> estereoscópico Clorox <td></td></tr><tr><td></td><td>Zeiss</td><td>Stemi 508</td><td>https://www.zeiss.com/microscopy/int/products/stereo-zoom-microscopes/stemi-508.html</td></tr></tbody></table>

metodología para probar agentes de control e insecticidas contra el barrenador de la baya del café hypothenemus hampei

Methodology to Test Control Agents and Insecticides Against the Coffee Berry Borer Hypothenemus hampei

Antes de recomendar insecticidas para tratar el barrenador de la baya del café (CBB) Hypothenemus hampei, es valioso conocer la mortalidad y repelencia de estos insecticidas contra insectos adultos o su impacto en la producción reproductiva. Sin embargo, los métodos actualmente disponibles evalúan solo la mortalidad en adultos, limitando la selección de nuevos insecticidas con un modo de acción diferente. En este trabajo, se examinaron diferentes métodos experimentales para identificar los diversos efectos sobre el CBB en condiciones de laboratorio. Para ello, se recogieron y desinfectaron los frutos del café verde (GFs) por inmersión en solución de hipoclorito de sodio seguido de irradiación de luz UV. Paralelamente, los adultos CBB de una colonia fueron desinfectados por inmersión en solución de hipoclorito de sodio. Para evaluar la protección de la fruta (preinfestación), las frutas se colocaron en cajas de plástico y se aplicaron los insecticidas. Luego, los adultos CBB fueron liberados a una tasa de dos BCB por GF. Los GF se dejaron en condiciones controladas para evaluar la infestación de CBB y la supervivencia después de 1, 7, 15 y 21 días. Para evaluar la eficacia del insecticida después de la infestación por CBB (postinfestación), los adultos con CBB se liberaron a los GF en una proporción de 2:1 durante 3 h a 21 °C. Las frutas infestadas que mostraban adultos con CBB con el abdomen parcialmente expuesto fueron seleccionadas y colocadas en bastidores de 96 pocillos, y los CBB perforando las frutas fueron tratados directamente. Después de 20 días, se diseccionaron los frutos y se registraron las etapas biológicas de CBB dentro de cada fruto. Los GF sirvieron como sustratos que imitan las condiciones naturales para evaluar insecticidas tóxicos, químicos y biológicos contra el CBB.

Los resultados mostraron que las hembras CBB reconocieron los frutos, y dependiendo de las características de la superficie del fruto y los olores emitidos, las hembras CBB comenzaron a penetrar o dar a luz los frutos dentro de las 3 h a 21 ° C.
El efecto de un insecticida sobre el CBB cuando se aplica a los frutos del café (procedimiento de preinfestación) después de 24 h y con el tiempo se muestra en la Figura 4. Los dos insecticidas (emulsión alcaloide al 5% y ...

Se desarrolló un método que utiliza frutas de café verde (GF) para probar la toxicidad de los insecticidas contra el barrenador de la baya del café (CBB). Se aplicaron insecticidas o sustancias tóxicas a los GF desinfectados antes o después de la infestación por CBB. Se evaluó la mortalidad de insectos, la repelencia y la capacidad reproductiva, además de otros parámetros.

Metodología para probar agentes de control e insecticidas contra el barrenador de la baya del café Hypothenemus hampei

Prior to recommending insecticides to treat the coffee berry borer (CBB) Hypothenemus hampei, it is valuable to know the mortality and repellency of these ...

Este método utiliza frutas de café verde para probar la toxicidad de los insecticidas contra el barrenador de la baya del café. La aplicación de insecticida se realiza antes o después de la infestación de insectos para estudiar la repelencia de la mortalidad de insectos y otros efectos. El uso de café verde real con nutrientes adecuados para el crecimiento de insectos es la forma más adecuada de evaluar la toxicidad de los compuestos para los insectos en condiciones naturales simuladas.El protocolo permite la evaluación de los efectos tóxicos de los insecticidas químicos y hacia patógenos como hongos o sustancias repelentes. Esta infección de las frutas y los insectos es el paso crítico, ya que una desinfección inadecuada puede causar la muerte de insectos debido a la contaminación. La calidad de los insectos también es importante ya que los insectos débiles sobreestimarán los resultados de un producto tóxico.La demostración visual permite identificar la etapa apropiada de los frutos del proceso de infestación de insectos, el momento apropiado para propagar la sustancia tóxica. Y la forma de diseccionar los frutos. Demostrando el procedimiento estará Claudia Martínez, asistente de

methodology-to-test-control-agents-insecticides-against-coffee-berry

Research

Investigación

JoVE Journal

Environment

Entorno

Este manuscrito demuestra y discute las técnicas utilizadas para estudiar la susceptibilidad de pesticidas y detectar la resistencia a los pesticidas de contacto y sistémicos en las plagas de artrópodos.

Bioensayos para vigilar la resistencia insecticida

En este video, demostramos el ensayo de prueba tópica para determinar la toxicidad de un insecticida potencial en mosquitos hembra adultos. Utilizando un antagonista del receptor de dopamina que causa la inhibición letal de la neurotransmisión en los mosquitos, este método describe una forma de evaluar los efectos tóxicos de los insecticidas tras la aplicación tópica.

Ensayo de prueba tópica: una técnica para evaluar el potencial insecticida de los antagonistas de los receptores de dopamina en mosquitos hembra adultos mediante aplicación tópica

evaluaciones insecticidas a menudo se dirigen a los insectos adultos, en lugar de estadios inmaduros. A continuación, se presenta un protocolo para la evaluación de insecticidas contra los huevos de insectos de la cama con una comparación a la primera etapa de ninfa chinches. Estos protocolos podrían ajustarse para otros insectos para evaluar la eficacia insecticida en etapas de la vida no adultos.

Un método para evaluar la eficacia insecticida contra las chinches,<em&gt; Cimex lectularius</em&gt;, Los huevos y la primera estadios

Tablas de vida permiten la cuantificación de las fuentes y las tasas de mortalidad en las poblaciones de insectos y contribuyen a comprender, predecir y manipulación dinámica de la población en los agroecosistemas. Se presentan métodos de realización y análisis de tablas de vida de cohorte basado en el campo para un insecto con estadios inmaduros sésiles.

Metodología para el desarrollo de tablas de vida para los insectos sésiles en el campo de la mosca blanca, Bemisia tabaci, en algodón como un modelo de sistema de

Seguimiento exhaustivo de la broca del café y anfitrión planta dinámica es esencial para la agregación de datos a nivel de paisaje para mejorar el manejo de esta plaga invasora. Aquí, presentamos un protocolo de seguimiento científico de café berry borer movimiento, infestación, mortalidad, fenología de la planta de café, clima y manejo de la granja a través de un móvil electrónico de datos aplicación de grabación.

El protocolo de Hawaii para el seguimiento científico de la broca del café: un modelo para los agroecosistemas de café en todo el mundo

Se describen los protocolos para la evaluación de la toxicidad de los químicos a los mosquitos inmaduros y adultos para el desarrollo como nuevas clases de larvicidas, adulticidas y endectocidas. Los protocolos permiten pruebas de alto rendimiento de múltiples químicos en dosis de un solo punto y posterior evaluación por análisis de respuesta de dosis para determinar toxicidad en contacto o por ingestión.

Protocolos para las pruebas de la toxicidad de la novela química insecticida para mosquitos

Este trabajo presenta un protocolo para establecer un cultivo de suspensión celular derivado del té (Camellia sinensis L.) hojas que se pueden utilizar para estudiar el metabolismo de los compuestos externos que pueden ser tomados por toda la planta, como insecticidas.

Estudio sobre el metabolismo de seis insecticidas sistémicos en un cultivo de suspensión celular recién establecido derivado del té (Camellia Sinensis L.) Hojas

Este protocolo describe el ensayo de alimentación obligada para evaluar el efecto potencialmente tóxico de un fitoquímico en las larvas de insectos lepidópteros. Este es un bioensayo de insectos altamente escalable, fácil de optimizar la dosis subletal y letal, la actividad disuasoria y el efecto fisiológico. Esto podría usarse para detectar insecticidas ecológicos.

Desarrollo de un sistema de ensayo de alimentación para evaluar el efecto insecticida de los fitoquímicos en Helicoverpa armigera

El aumento de la detección de moscas de la fruta tephritid inmaduras en el campo puede desencadenar esfuerzos oportunos para eliminar las poblaciones de estas plagas destructivas. La detección de larvas de estadio tardío es más rápida y precisa cuando se tritura la fruta huésped en una bolsa y se pasa la pulpa a través de una serie de tamices que el corte manual y la inspección visual.

Tamizado de la pulpa de la fruta para detectar moscas de la fruta Tephritid inmaduras en el campo

En este trabajo se presenta un protocolo para la obtención de hongos entomopatógenos a partir de un barrenador forestal de la madera y una forma sustitutiva de evaluar sus actividades entomopatógenas utilizando un insecto modelo de coleóptero. Este método es eficiente y conveniente para explorar recursos fúngicos entomopatógenos de plagas de insectos perforadores de madera en bosques naturales.

Aislamiento, identificación conductual y evaluación de la patogenicidad de hongos entomopatógenos de un barrenador forestal

Aprende a evaluar la toxicidad de insecticidas contra Hypothenemus hampei usando frutos de café verdes desinfectados. Este protocolo permite medir mortalidad, repelencia y capacidad reproductiva del insecto.

Metodología para probar agentes de control e insecticidas contra el barrenador de la baya del café Hypothenemus hampei

Explorar más videos