Combinación de microscopía confocal de reflectancia con tomografía de coherencia óptica para el diagnóstico no invasivo de cánceres de piel mediante la adquisición de imágenes

Este protocolo detalla los pasos de adquisición de imágenes para dispositivos RCM y RCM-OCT al lado de la cama. Es esencial adquirir imágenes de buena calidad para el correcto diagnóstico y manejo de las lesiones cutáneas. Estos dispositivos toman imágenes de la piel a resolución histopatológica in vivo, ahorrando biopsias benignas innecesarias mientras detectan cánceres de piel tempranos.

Los diagnósticos se realizan al lado de la cama, lo que reduce el tiempo de espera y la ansiedad de los pacientes. Las imágenes con este microscopio nos ayudan a guiar de forma no invasiva la detección y el diagnóstico de lesiones cutáneas y cánceres de piel en pacientes al lado de la cama. Además, las imágenes nos ayudan a clasificar las lesiones cutáneas en aquellas que pueden ser superficiales frente a aquellas que pueden ser más profundas, lo que ayuda a guiar el tratamiento.

Por lo tanto, las imágenes nos ayudan a integrar o combinar el diagnóstico y el tratamiento en una sola visita del paciente, lo que ahora se llama un paradigma de atención al paciente de ventanilla única. Además de usar imágenes para detectar y diagnosticar lesiones cutáneas y cánceres de piel, también estamos utilizando las imágenes para guiar la detección y el diagnóstico de lesiones orales y cánceres orales en pacientes. Ucalene Harris, una histotécnica de mi laboratorio.

Para comenzar, seleccione el dispositivo WP-RCM para lesiones ubicadas en las superficies planas de la piel, como el tronco y las extremidades, y el dispositivo HH-RCM para lesiones en superficies curvas, como la nariz, los lóbulos de las orejas, los párpados y los genitales. Para obtener imágenes, coloque al paciente en una silla completamente reclinable o en una mesa de examen plana con soporte. Luego limpie la lesión y la piel circundante con una toallita con alcohol.

Agregue una gota de aceite mineral al centro de la ventana de plástico y extiéndala cuidadosamente a lo ancho de la ventana. Retire el libro de bolsillo del lado adhesivo de la ventana, estire la piel suavemente y fije la ventana. Para adquirir imágenes utilizando el dispositivo WP-RCM, coloque la sonda perpendicular a la lesión.

Luego, adquiera imágenes de dermatoscopia colocando la sonda WP-RCM sobre la tapa de la ventana de plástico y estime el mejor ángulo de inserción para la sonda. Alinee la pequeña flecha blanca situada en el lateral de la sonda con la flecha situada en el lateral de la cámara de dermatoscopia. Inserte la cámara de dermatoscopia en la tapa plástica de la ventana.

Asegúrese de que la imagen del dermatoscopio cubra toda la superficie de la lesión y presione el gatillo de la cámara para adquirir una imagen. Luego retire el dermatoscopio. Luego coloque una cantidad del tamaño de un guisante de gel de ultrasonido dentro de la tapa desechable de la ventana de plástico.

Inserte la sonda RCM en la tapa desechable de plástico hasta que se escuche un clic agudo. Utilizando la imagen de dermatoscopia adquirida en el paso anterior, seleccione el centro de la lesión e identifique la capa superior o más brillante de la piel, que es la capa anuclear del estrato córneo. Establezca la profundidad de imagen en cero en este nivel.

Presione el icono de pila para adquirir una pila en el centro de la lesión. En el menú desplegable, seleccione un sitio anatómico, ya sea cara o cuerpo. Establezca el tamaño de paso en 4,5 micras y la profundidad en 250 micras.

Identifique la unión dérmica-epidérmica o capa DEJ en la pila y seleccione un cuadrado de 8x8 milímetros para cubrir toda la lesión. Luego presione el ícono de mosaico para adquirir el primer mosaico en el DEJ. Para adquirir mosaicos posteriores, haga clic en una estructura en el mosaico DEJ para verlo en la vista en vivo.

Desplácese hacia abajo desde el DEJ para adquirir mosaicos en la dermis, y luego hacia arriba desde el DEJ para tomar mosaicos en la epidermis. Capturar una pila en cada cuadrante y una en el centro de la lesión con un patrón homogéneo en la dermatoscopia, o adquirir pilas adicionales para lesiones heterogéneas. Después de completar una sesión de imágenes, separe el cono protector que rodea la lente del microscopio.

Limpie la punta de la lente del objetivo con un hisopo con alcohol y seque la lente. Vuelva a conectar el cono de plástico a la sonda del microscopio. Para generar un informe de evaluación diagnóstica confocal, haga clic en Nueva evaluación.

Introduzca el diagnóstico de las opciones preseleccionadas en el menú desplegable. Seleccione las características que se ven durante la creación de imágenes en la lista de comprobación del informe y seleccione la administración aplicable. Haga clic en Finalizar y firmar.

Genere el informe como PDF e imprímalo. para adquirir imágenes utilizando el dispositivo HH-RCM, primero coloque al paciente y limpie el sitio de la lesión y rodee la lesión con un anillo de papel. Aplique una cantidad de gel de ultrasonido del tamaño de un guisante a la lente del objetivo del HH-RCM y cúbrala con la tapa de plástico.

Agregue una gota generosa de aceite mineral al costado de la tapa de plástico que tocará la piel. Presione la sonda hacia el lado de la lesión en la piel con presión firme. Utilice los controles de profundidad Z del dispositivo HH-RCM para moverse hacia arriba y hacia abajo a varias profundidades dentro de la lesión.

Adquiera múltiples imágenes y pilas de un solo cuadro en las regiones de interés. Para lesiones grandes, tome videos continuos en varias capas moviendo la sonda HH-RCM sobre toda la superficie de la lesión y haciendo clic en el símbolo de captura de video. Registrar el movimiento de las células sanguíneas dentro de los vasos.

Una vez completada la sesión de imágenes, presione Done Imaging. Limpie la lesión con un hisopo con alcohol, retire el gel de ultrasonido de la lente objetiva de la sonda y vuelva a colocar la tapa de plástico. Coloque al paciente para obtener imágenes y asegúrese de que el límite de la lesión esté libre de vello excesivo e impurezas tópicas.

Después de preparar la sonda como se describe en la sección anterior, haga clic en Configuración de imágenes. Seleccione el modo Imagen lineal para adquirir una imagen RCM. Establezca el tamaño de paso en cinco micras y el número de pasos en 40.

Adquiera pilas como se muestra en la sección anterior haciendo clic en Grabar. Luego haga clic en el botón Congelar después de completar. Haga clic en Configuración de imágenes y seleccione Modo ráster para adquirir un vídeo OCT correlativo para la arquitectura de la lesión.

Cambie a la pestaña técnico. Una vez completado, haga clic en el botón Grab e inmediatamente presione el botón Guardar. Usando este protocolo, se adquirieron imágenes de RCM de alta calidad a profundidades relevantes en la piel.

Se deben evitar artefactos como burbujas de aire, desechos superficiales y artefactos de movimiento que dificulten la evaluación diagnóstica. En RCM, se observaron varias capas de la piel, como el estrato córnea, compuesto de queratinocitos anucleados, y el estrato espinoso, compuesto por células nucleadas apretadas con citoplasma brillante que crean un patrón típico de panal. Esto fue seguido por el estrato basal, identificado por el patrón de adoquines formado por la tapa de melanina de los queratinocitos basales.

Y el DEJ caracterizado por el patrón de anillas brillantes. La dermis papilar estaba compuesta de fibras de colágeno brillante y vasos sanguíneos. Las imágenes de RCM para cánceres de piel comunes, como el carcinoma de células basales, mostraron nódulos tumorales con hendidura y empalizada.

El carcinoma de células escamosas mostró un patrón de panal atípico y vasos ojales. Y el melanoma mostró grupos de células pagetoides redondas brillantes y grandes en la epidermis. Para el carcinoma de células basales, la imagen de RCM no pudo mostrar un nódulo tumoral definitivo.

Mientras que las imágenes RCM-OCT interpretadas tanto por pilas como por rásteres mostraron un nódulo tumoral gris distinto conectado a la epidermis, junto con hendiduras y haces de colágeno engrosados. El diagnóstico fue confirmado por biopsia teñida con H&E. Es importante adquirir mosaicos de calidad diagnóstica de cinco capas de la piel con WP-RCM Imaging.

Tome un vídeo fluido y apilas con HH-RCM, y tanto una pila como un ráster en la misma área utilizando el dispositivo RCM-OCT.