Name: Generación de esferoides de tejido a través de un dispositivo similar a un sello impreso en 3D (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2022-10-06T12:40:00.000+00:00
Duration: 6 min 39 s
Description: Aprenda a generar esferoides de tejido homogéneos a gran escala utilizando un dispositivo impreso en 3D. Este método garantiza alta viabilidad celular y calidad consistente para aplicaciones en ingeniería de tejidos y desarrollo de fármacos.

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<ol><li>Laschke, M., Menger, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Life+is+3D%3A+Boosting+spheroid+function+for+tissue+engineering%5BTitle%5D)+AND+%22Trends+in+Biotechnology%22%5BJournal%5D)">Life is 3D: Boosting spheroid function for tissue engineering.</a> Trends in Biotechnology. 35 (2), 133-144 (2017).</li>
<li>Mekhileri, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Automated+3D+bioassembly+of+micro-tissues+for+biofabrication+of+hybrid+tissue+engineered+constructs%5BTitle%5D)+AND+%22Biofabrication%22%5BJournal%5D)">Automated 3D bioassembly of micro-tissues for biofabrication of hybrid tissue engineered constructs.</a> Biofabrication. 10 (2), 024103(2018).</li>
<li>Itoh, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Scaffold-free+tubular+tissues+created+by+a+bio-3D+printer+undergo+remodeling+and+endothelialization+when+implanted+in+rat+aortae%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Scaffold-free tubular tissues created by a bio-3D printer undergo remodeling and endothelialization when implanted in rat aortae.</a> PLoS One. 10 (12), 0145971(2015).</li>
<li>Kronemberger, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+hypertrophic+cartilage+induction+influences+the+building-block+capacity+of+human+adipose+stem%2Fstromal+cell+spheroids+for+biofabrication%5BTitle%5D)+AND+%22Artificial+Organs%22%5BJournal%5D)">The hypertrophic cartilage induction influences the building-block capacity of human adipose stem/stromal cell spheroids for biofabrication.</a> Artificial Organs. 45 (10), 1208-1218 (2021).</li>
<li>Mironov, V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Organ+printing%3A+Tissue+spheroids+as+building+blocks%5BTitle%5D)+AND+%22Biomaterials%22%5BJournal%5D)">Organ printing: Tissue spheroids as building blocks.</a> Biomaterials. 30 (12), 2164-2174 (2009).</li>
<li>Skardal, A., Shupe, T., Atala, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Organoid-on-a-chip+and+body-on-a-chip+systems+for+drug+screening+and+disease+modeling%5BTitle%5D)+AND+%22Drug+Discovery+Today%22%5BJournal%5D)">Organoid-on-a-chip and body-on-a-chip systems for drug screening and disease modeling.</a> Drug Discovery Today. 21 (9), 1399-1411 (2016).</li>
<li>Garcez, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Zika+virus+impairs+growth+in+human+neurospheres+and+brain+organoids%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Zika virus impairs growth in human neurospheres and brain organoids.</a> Science. 352 (6287), 816-818 (2016).</li>
<li>Charelli, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Biologically+produced+silver+chloride+nanoparticles+from+B.+megaterium+modulate+interleukin+secretion+by+human+adipose+stem+cell+spheroids%5BTitle%5D)+AND+%22Cytotechnology%22%5BJournal%5D)">Biologically produced silver chloride nanoparticles from B. megaterium modulate interleukin secretion by human adipose stem cell spheroids.</a> Cytotechnology. 70 (6), 1655-1669 (2018).</li>
<li>Cui, X., Hartanto, Y., Zhang, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Advances+in+multicellular+spheroids+formation%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+the+Royal+Society+Interface%22%5BJournal%5D)">Advances in multicellular spheroids formation.</a> Journal of the Royal Society Interface. 14 (127), 20160877(2017).</li>
<li>Achilli, T., Meyer, J., Morgan, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Advances+in+the+formation%2C+use+and+understanding+of+multi-cellular+spheroids%5BTitle%5D)+AND+%22Expert+Opinion+on+Biological+Therapy%22%5BJournal%5D)">Advances in the formation, use and understanding of multi-cellular spheroids.</a> Expert Opinion on Biological Therapy. 12 (10), 1347-1360 (2012).</li>
<li>Rolver, M., Elingaard-Larsen, L., Pedersen, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Assessing+cell+viability+and+death+in+3D+spheroid+cultures+of+cancer+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">Assessing cell viability and death in 3D spheroid cultures of cancer cells.</a> Journal of Visualized Experiments. (148), e59714(2019).</li>
<li>Quan, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Photo-curing+3D+printing+technique+and+its+challenges%5BTitle%5D)+AND+%22Bioactive+Materials%22%5BJournal%5D)">Photo-curing 3D printing technique and its challenges.</a> Bioactive Materials. 5 (1), 110-115 (2020).</li>
<li>Rodriguez-Salvador, M., Perez-Benitez, B., Padilla-Aguirre, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Discovering+the+latest+scientific+pathways+on+tissue+spheroids%3A+Opportunities+to+innovate%5BTitle%5D)+AND+%22International+Journal+of+Bioprinting%22%5BJournal%5D)">Discovering the latest scientific pathways on tissue spheroids: Opportunities to innovate.</a> International Journal of Bioprinting. 7 (1), 331(2021).</li>
<li>Baptista, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Adult+stem+cells+spheroids+to+optimize+cell+colonization+in+scaffolds+for+cartilage+and+bone+tissue+engineering%5BTitle%5D)+AND+%22International+Journal+of+Molecular+Sciences%22%5BJournal%5D)">Adult stem cells spheroids to optimize cell colonization in scaffolds for cartilage and bone tissue engineering.</a> International Journal of Molecular Sciences. 19 (5), 1285(2018).</li>
<li>Shakeri, A., Khan, S., Didar, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Conventional+and+emerging+strategies+for+the+fabrication+and+functionalization+of+PDMS-based+microfluidic+devices%5BTitle%5D)+AND+%22Lab+on+a+Chip%22%5BJournal%5D)">Conventional and emerging strategies for the fabrication and functionalization of PDMS-based microfluidic devices.</a> Lab on a Chip. 21 (16), 3053-3075 (2021).</li>
<li>vander Valk, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fetal+bovine+serum+%28FBS%29%3A+Past+-+present+-+future%5BTitle%5D)+AND+%22ALTEX%22%5BJournal%5D)">Fetal bovine serum (FBS): Past - present - future.</a> ALTEX. 35 (1), 99-118 (2018).</li>
<li>vander Valk, J., Brunner, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Optimization+of+chemically+defined+cell+culture+media+-+Replacing+fetal+bovine+serum+in+mammalian+in+vitro+methods%5BTitle%5D)+AND+%22Toxicology+in+Vitro%22%5BJournal%5D)">Optimization of chemically defined cell culture media - Replacing fetal bovine serum in mammalian in vitro methods.</a> Toxicology in Vitro. 24 (4), 1053-1063 (2010).</li>
<li>Smyrek, I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((microtubules+and+FAK+dominate+different+spheroid+formation+phases+and+important+elements+of+tissue+integrity%5BTitle%5D)+AND+%22Biology+Open%22%5BJournal%5D)">microtubules and FAK dominate different spheroid formation phases and important elements of tissue integrity.</a> Biology Open. 8 (1), 037051(2018).</li>
<li>McMillen, P., Holley, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Integration+of+cell-cell+and+cell-ECM+adhesion+in+vertebrate+morphogenesis%5BTitle%5D)+AND+%22Current+Opinion+in+Cell+Biology%22%5BJournal%5D)">Integration of cell-cell and cell-ECM adhesion in vertebrate morphogenesis.</a> Current Opinion in Cell Biology. 36, 48-53 (2015).</li>
<li>Tung, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((High-throughput+3D+spheroid+culture+and+drug+testing+using+a+384+hanging+drop+array%5BTitle%5D)+AND+%22The+Analyst%22%5BJournal%5D)">High-throughput 3D spheroid culture and drug testing using a 384 hanging drop array.</a> The Analyst. 136 (3), 473-478 (2011).</li>
<li>Guo, X., Li, S., Ji, Q., Lian, R., Chen, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Enhanced+viability+and+neural+differential+potential+in+poor+post-thaw+hADSCs+by+agarose+multi-well+dishes+and+spheroid+culture%5BTitle%5D)+AND+%22Human+Cell%22%5BJournal%5D)">Enhanced viability and neural differential potential in poor post-thaw hADSCs by agarose multi-well dishes and spheroid culture.</a> Human Cell. 28 (4), 175-189 (2015).</li>
<li>Andréa Dernowsek, J., Rezende, R., Lopes daSilva, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+role+of+information+technology+in+the+future+of+3D+biofabrication%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+3D+Printing+in+Medicine%22%5BJournal%5D)">The role of information technology in the future of 3D biofabrication.</a> Journal of 3D Printing in Medicine. 1 (1), 63-74 (2017).</li>
<li>Garcez, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Zika+virus+impairs+growth+in+human+neurospheres+and+brain+organoids%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Zika virus impairs growth in human neurospheres and brain organoids.</a> Science. 352 (6287), 816-818 (2016).</li>
<li>Skardal, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Multi-tissue+interactions+in+an+integrated+three-tissue+organ-on-a-chip+platform%5BTitle%5D)+AND+%22Scientific+Reports%22%5BJournal%5D)">Multi-tissue interactions in an integrated three-tissue organ-on-a-chip platform.</a> Scientific Reports. 7, 8837(2017).</li>
<li>Armoiry, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Autologous+chondrocyte+implantation+with+chondrosphere+for+treating+articular+cartilage+defects+in+the+knee%3A+An+evidence+review+group+perspective+of+a+NICE+single+technology+appraisal%5BTitle%5D)+AND+%22PharmacoEconomics%22%5BJournal%5D)">Autologous chondrocyte implantation with chondrosphere for treating articular cartilage defects in the knee: An evidence review group perspective of a NICE single technology appraisal.</a> PharmacoEconomics. 37 (7), 879-886 (2018).</li>
<li>Nakamura, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Bio-3D+printing+iPSC-derived+human+chondrocytes+for+articular+cartilage+regeneration%5BTitle%5D)+AND+%22Biofabrication%22%5BJournal%5D)">Bio-3D printing iPSC-derived human chondrocytes for articular cartilage regeneration.</a> Biofabrication. 13 (4), 044103(2021).</li>
<li>Mesquita, C., Charelli, L., Baptista, L., Naveira-Cotta, C., Balbino, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Continuous-mode+encapsulation+of+human+stem+cell+spheroids+using+droplet-based+glass-capillary+microfluidic+device+for+3D+bioprinting+technology%5BTitle%5D)+AND+%22Biochemical+Engineering+Journal%22%5BJournal%5D)">Continuous-mode encapsulation of human stem cell spheroids using droplet-based glass-capillary microfluidic device for 3D bioprinting technology.</a> Biochemical Engineering Journal. 174, 108122(2021).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>Placa de 6 pocillos</td><td>Merck</td><td>CLS3516</td><td></td></tr><tr><td>Agarose</td><td>Promega</td><td>V3121</td><td></td></tr><tr><td>Biodevice&nbsp;</td>Cabina de seguridad biológica <td>Bioedtech</td><td></td><td></td></tr><tr><td></td><td>ThermoFisher&nbsp;</td><td></td><td></td>51029701</tr><tr><td>centrífuga</td><td>ThermoFisher&nbsp;</td><td></td><td></td>75004031</tr><tr><td>Tubos de centrífuga Corning de 50 mL Merck</td><td></td><td>CLS430829-500EA</td><td></td></tr><tr><td>Matraces de cultivo celular Corning superficie 75 cm2</td><td>Merck</td><td>CLS430641</td><td></td></tr><tr><td>Draft Resin&nbsp;</td><td>FormLabs</td><td>FLDRBL01</td><td></td></tr><tr><td>Dulbecco&prime; s Eagle&prime modificado; s Glucosa media - baja</td><td>Merck</td><td>D6046</td><td></td></tr><tr><td>Suero fetal bovino (FBS)</td><td>ThermoFisher&nbsp;</td><td></td><td></td>16000044</tr><tr><td>Incubadora Form 2</td><td>de FormLabs</td><td></td><td></td></tr><tr><td></td><td>ThermoFisher&nbsp;</td><td></td><td></td>51033782</tr><tr><td>líneas celulares L929</td><td>establecidas en el laboratorio&nbsp;</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Penicilina y estreptomicina (PS)</td><td>ThermoFisher&nbsp;</td><td></td><td></td>15140122</tr><tr><td>Solución salina tamponada con fosfato (PBS)</td><td>Merck</td><td>806552</td><td></td></tr><tr><td>tripsina con EDTA</td><td>Merck</td><td>T3924</td><td></td></tr></tbody></table>

generación de esferoides de tejido a través de un dispositivo similar a un sello impreso en 3d

Generation of Tissue Spheroids via a 3D Printed Stamp-Like Device

Generación de micro resecciones homogéneas utilizando el dispositivo tipo sello impreso en 3D El dispositivo similar a un sello impreso en 3D se fabricó con éxito mediante el método de estereolitografía12 utilizando una resina fotocurable (Figura 2A). El dispositivo final estaba compuesto por micropines cilíndricos con una altura de 1,3 mm y una anchura de 650 μm (Figura 2A). Su uso como molde maestro para producir mic...

Generación de esferoides de tejido a través de un dispositivo similar a un sello impreso en 3D

Advances in 3D cell culture have developed more physiologically relevant in vitro models, such as tissue spheroids. Cells cultivated as spheroids have ...

generation-of-tissue-spheroids-via-a-3d-printed-stamp-like-device

Research

Investigación

JoVE Journal

Biochemistry

Bioquímica

Se describe un método simple, rápido de generación de 3D, como los tejidos esferoides y su potencial aplicación para cuantificar las diferencias en las interacciones célula-célula.

Una simple gota colgante celular Cultura Protocolo para la generación de esferoides 3D

Los esferoides son un tipo de modelo de cultivo celular en 3D que se utiliza para representar con mayor precisión el entorno de una célula en comparación con los modelos monocapa de cultivo celular en 2D. En el protocolo de ejemplo, veremos a los científicos generar esferoides a partir de una línea celular de cáncer colorrectal y aplicar imágenes de células vivas para rastrear el crecimiento de los esferoides.

Generación de esferoides a partir de líneas celulares: un método de cultivo celular tridimensional (3D)

Este video demuestra la transformación de células madre pluripotentes humanas (hPSCs) en organoides cerebrales esféricos. Mediante el uso de inhibidores específicos, las hPSCs son guiadas para diferenciarse hacia un linaje neuronal, formando colonias neuroectodérmicas. A continuación, se introducen factores de crecimiento especiales, que fomentan la autoorganización y la proliferación de las colonias, lo que en última instancia conduce a la formación de organoides cerebrales esféricos.

Generación de esferoides a partir de células madre pluripotentes humanas

Este protocolo describe bioprinting 3D de tejido cardíaco sin el uso de biomateriales. Los parches cardiacos bioprinted 3D exhiben la integración mecánica de esferoides componentes y son altamente prometedores en regeneración del tejido cardíaco y como modelos 3D de la enfermedad cardíaca.

Creación de tejido cardiaco que exhibe la integración mecánica de esferoides usando bioprinting 3D

Presentamos un dispositivo microfluídico centrífugo motorizado que puede cultivar esferoides celulares. Usando este dispositivo, los esferoides de uno o varios tipos de células podrían ser fácilmente cocultivos bajo condiciones de alta gravedad.

Plataforma Lab-on-a-CD para generar esferoides tridimensionales multicelulares

El protocolo describe la generación de esferoides de alto rendimiento para la bioimpresión utilizando el análisis multiparamétrico de su oxigenación y muerte celular en un microscopio de fluorescencia estándar. Este enfoque se puede aplicar para controlar la viabilidad de los esferoides y realizar la estandarización, lo cual es importante en el modelado de tejido 3D, el microambiente tumoral y la biofabricación (micro) tisular exitosa.

Biofabricación asequible asistida por microscopía de oxígeno de esferoides multicelulares

Aquí, describimos la producción a gran escala de esferoides estromales /células madre (ASC) derivados de tejido adiposo utilizando un sistema de pipeteo automatizado para sembrar la suspensión celular, asegurando así la homogeneidad del tamaño y la forma del esferoide. Estos esferoides ASC se pueden utilizar como bloques de construcción para enfoques de bioimpresión 3D.

Producción automatizada a gran escala de esferoides de células madre derivadas de tejido adiposo para bioimpresión 3D

Este artículo demuestra un método estandarizado para construir esferoides tumorales tridimensionales. También se describe una estrategia para la observación de esferoides y el análisis de aprendizaje profundo basado en imágenes utilizando un sistema automatizado de imágenes.

Generación de esferoides tumorales 3D para estudios de evaluación de fármacos

Este estudio presenta una metodología rentable y eficiente para generar estructuras celulares en 3D utilizando un sistema basado en sellos para crear micropocillos en moldes de agarosa. El sistema promueve la formación de esferoides/organoides uniformes, mejorando así las interacciones celulares. Este enfoque reduce la variabilidad experimental y apoya las aplicaciones en pruebas de fármacos e ingeniería de tejidos.

Generación de esferoides/organoides tridimensionales a partir de cultivos celulares bidimensionales utilizando un novedoso dispositivo de estampado

Prolina-prolina endopeptidasa-1 (PPEP-1) es una metaloproteasa secretada y una prometedora diana farmacológica del patógeno humano Clostridium difficile. Aquí describimos todos los métodos necesarios para la producción y determinación de la estructura de esta proteína.

Producción, Cristalización y determinación de la estructura de<em&gt; C. difícil</em&gt; PPEP-1 a través de microsiembra y Zinc-SAD

Aprenda a generar esferoides de tejido homogéneos a gran escala utilizando un dispositivo impreso en 3D. Este método garantiza alta viabilidad celular y calidad consistente para aplicaciones en ingeniería de tejidos y desarrollo de fármacos.

Generación de esferoides de tejido a través de un dispositivo similar a un sello impreso en 3D

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