Name: Un modelo de aneurisma aórtico abdominal de ratón inducido por fosfato de calcio (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2022-11-18T13:50:00.000+00:00
Duration: 5 min 14 s
Description: Aprende a inducir aneurisma aórtico abdominal en ratones C57BL6J mediante fosfato de cálcio. Este modelo rápido y económico permite estudiar mecanismos moleculares y probar estrategias terapéuticas en investigación vascular.

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Esta investigación fue apoyada por fondos de la Fundación Nacional de Ciencias Naturales de China (NSFC, 81730010, 91839302, 81921001, 31930056 y 91529203) y el Programa Nacional de Investigación y Desarrollo Clave de China (2019YFA 0801600).

Los estudios en animales se realizaron de acuerdo con las directrices del Comité Institucional de Cuidado y Uso de Animales del Centro de Ciencias de la Salud de la Universidad de Pekín y fueron aprobados por el Comité de Ética Biomédica de la Universidad de Pekín (LA2015142). Todos los ratones para cirugía fueron anestesiados con isoflurano (1,5%-2%), y la anestesia fue monitoreada cuidadosamente para evitar dolor o molestias para los ratones.
1. Preparación
<ol><li>Corte tiras de 0,3 cm de ancho de guantes de goma sin polvo y gasa.</li>
	<li>Compre ratones machos C57BL / 6J de 8-10 semanas de edad. Aloje a los animales en un ambiente climatizado con un ciclo de luz-oscuridad de 12 h y acceso gratuito a alimentos y agua.</li>
	<li>Autoclave la gasa, hisopos de algodón, tijeras y fórceps antes de la cirugía.</li>
	<li>Obtenga betadina, etanol al 70% y lavado de manos antiséptico.</li>
	<li>Póngase una máscara, bata y guantes estériles.</li>
</ol>2. Procedimiento quirúrgico
<ol><li>Alimente con tabletas masticables de carprofeno (dosis de 5 mg / kg) a un ratón C57BL / 6J de 8-10 semanas de edad 2-4 h antes de la cirugía. Luego, coloque el ratón en una cámara de inducción (206 mm x 210 mm x 140 mm) con isoflurano a un caudal de 1.5% -2%.<ol><li>Controle al ratón durante unos 5 minutos hasta que la respiración disminuya visiblemente. Asegúrese de que el ratón no tenga respuesta a la estimulación del dolor antes de la cirugía.</li>
	</ol></li>
	<li>Aplique un ungüento oftálmico en los ojos y proporcione soporte térmico con una almohadilla térmica o una manta. Confirme la profundidad de la anestesia con un pellizco en el dedo del pie cada 15 minutos durante el procedimiento quirúrgico.</li>
	<li>Afeite el vello abdominal del ratón con una cortadora eléctrica o crema depilatoria. Frote y limpie el área afeitada con betadina, seguida de etanol al 70%, varias veces con movimientos circulares. Cámbiese los guantes para mantener la esterilidad.</li>
	<li>Use tijeras para hacer una incisión de ~ 1.5 cm en la parte inferior del abdomen a lo largo de la línea media del abdomen.</li>
	<li>Use un hisopo de algodón estéril humedecido con solución salina normal para extraer cuidadosamente el intestino hasta que la aorta infrarrenal sea visible.</li>
	<li>Diseccionar el tejido conectivo y la grasa de la aorta infrarrenal durante una sección de aproximadamente 0,5 cm. Tenga en cuenta los pequeños vasos en el lado dorsal y evite rasgarlos. No hay necesidad de separar la aorta abdominal de la vena principal abdominal.</li>
	<li>Empaque un pedazo de la tira de guante de goma empapada en solución salina debajo de la aorta abdominal y la vena principal abdominal. Use un hisopo de algodón para limpiar el exceso de líquido.</li>
	<li>Empaque un trozo de gasa empapado con CaCl2 0.5 M en la adventicia de la vasculatura abdominal infrarrenal durante 10 min. Para el grupo de ratones simulados, sustituya el CaCl2 de 0,5 M por solución salina normal.</li>
	<li>Retire la gasa y empaque otra pieza de gasa empapada con solución de PBS durante 5 min para generar cristales de CaPO4 in situ en la adventicia de la aorta.</li>
	<li>Retire con cuidado la tira del guante de goma y la gasa. Restablezca el tracto intestinal del ratón.</li>
	<li>Suturar la incisión abdominal y la piel con una sutura 5-0.</li>
	<li>Coloque el ratón sobre una almohadilla térmica hasta que el ratón recupere la conciencia. Proporcionar alojamiento de recuperación del dolor postquirúrgico y analgesia, de acuerdo con el comité local de ética animal.</li>
	<li>Aloja el ratón durante otros 14 días. Controle al ratón de cerca después de la cirugía y observe al menos 1 vez al día posteriormente. Realice una necropsia inmediatamente si algún ratón muere durante este período.</li>
</ol>3. Recolección para imágenes de aortas
<ol><li>14 días después de la cirugía, sacrifique a los ratones usandoCO2.</li>
	<li>Abra las cavidades torácica y abdominal del ratón ventralmente y abra la aurícula derecha.</li>
	<li>Perfundir los ratones con tampón PBS a través del ventrículo izquierdo del corazón para eliminar la sangre en la aorta, y luego perfundir con paraformaldehído al 4% como se describió anteriormente8.</li>
	<li>Cosecha la aorta bajo el estereoscopio.</li>
	<li>Coloque las aortas cosechadas en tubos que contengan 5 ml de paraformaldehído al 4% durante 48 h.</li>
	<li>Retire el tejido adventicio y la grasa con cuidado debajo del estereoscopio y fije la aorta en una placa de cera negra con agujas para insectos.</li>
	<li>Adquirir imágenes aórticas.</li>
</ol>4. Evaluación de la degradación de las fibras elásticas
<ol><li>Cortar los tejidos del aneurisma aórtico en criosecciones seriadas (7 μm de espesor).</li>
	<li>Analice las fibras elásticas utilizando un kit de tinción elástico comercial van Gieson (EVG) de acuerdo con el protocolo del fabricante.</li>
	<li>Grado de degradación de elastina. Grado 1: degradación del <25%; grado 2: degradación del 25% al 50%; grado 3: 50% a 75% de degradación; o grado 4: >75% de degradación.</li>
</ol>

<ol><li>Kent, K. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Abdominal+aortic+aneurysms%5BTitle%5D)+AND+%22The+New+England+Journal+of+Medicine%22%5BJournal%5D)">Abdominal aortic aneurysms.</a> The New England Journal of Medicine. 371, 2101-2108 (2014).</li>
<li>Patelis, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Animal+models+in+the+research+of+abdominal+aortic+aneurysms+development%5BTitle%5D)+AND+%22Physiological+Research%22%5BJournal%5D)">Animal models in the research of abdominal aortic aneurysms development.</a> Physiological Research. 66 (6), 899-915 (2017).</li>
<li>Gertz, S. D., Kurgan, A., Eisenberg, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Aneurysm+of+the+rabbit+common+carotid+artery+induced+by+periarterial+application+of+calcium-chloride+in+vivo%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Clinical+Investigation%22%5BJournal%5D)">Aneurysm of the rabbit common carotid artery induced by periarterial application of calcium-chloride in vivo.</a> Journal of Clinical Investigation. 81 (3), 649-656 (1988).</li>
<li>Yamanouchi, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Accelerated+aneurysmal+dilation+associated+with+apoptosis+and+inflammation+in+a+newly+developed+calcium+phosphate+rodent+abdominal+aortic+aneurysm+model%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Vascular+Surgery%22%5BJournal%5D)">Accelerated aneurysmal dilation associated with apoptosis and inflammation in a newly developed calcium phosphate rodent abdominal aortic aneurysm model.</a> Journal of Vascular Surgery. 56 (2), 455-461 (2012).</li>
<li>Wang, Y. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Influence+of+apolipoprotein+E%2C+age+and+aortic+site+on+calcium+phosphate+induced+abdominal+aortic+aneurysm+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Atherosclerosis%22%5BJournal%5D)">Influence of apolipoprotein E, age and aortic site on calcium phosphate induced abdominal aortic aneurysm in mice.</a> Atherosclerosis. 235 (1), 204-212 (2014).</li>
<li>Zhao, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Unspliced+xbp1+confers+VSMC+homeostasis+and+prevents+aortic+aneurysm+formation+via+foxo4+interaction%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation+Research%22%5BJournal%5D)">Unspliced xbp1 confers VSMC homeostasis and prevents aortic aneurysm formation via foxo4 interaction.</a> Circulation Research. 121 (12), 1331-1345 (2017).</li>
<li>Jia, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Targeting+macrophage+TFEB-14-3-3+epsilon+interface+by+naringenin+inhibits+abdominal+aortic+aneurysm%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Discovery%22%5BJournal%5D)">Targeting macrophage TFEB-14-3-3 epsilon interface by naringenin inhibits abdominal aortic aneurysm.</a> Cell Discovery. 8 (1), 21(2022).</li>
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<li>Yu, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((CYLD+deubiquitinates+nicotinamide+adenine+dinucleotide+phosphate+oxidase+4+contributing+to+adventitial+remodeling%5BTitle%5D)+AND+%22Arteriosclerosis%2C+Thrombosis%2C+and+Vascular+Biology%22%5BJournal%5D)">CYLD deubiquitinates nicotinamide adenine dinucleotide phosphate oxidase 4 contributing to adventitial remodeling.</a> Arteriosclerosis, Thrombosis, and Vascular Biology. 37 (8), 1698-1709 (2017).</li>
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<li>Tanaka, T., Takei, Y., Yamanouchi, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hyperglycemia+suppresses+calcium+phosphate-induced+aneurysm+formation+through+inhibition+of+macrophage+activation%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+the+American+Heart+Association%22%5BJournal%5D)">Hyperglycemia suppresses calcium phosphate-induced aneurysm formation through inhibition of macrophage activation.</a> Journal of the American Heart Association. 5 (3), 003062(2016).</li>
<li>Lu, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Subcutaneous+angiotensin+II+infusion+using+osmotic+pumps+induces+aortic+aneurysms+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">Subcutaneous angiotensin II infusion using osmotic pumps induces aortic aneurysms in mice.</a> Journal of Visualized Experiments. (103), e53191(2015).</li>
<li>Urry, D. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neutral+sites+for+calcium+ion+binding+to+elastin+and+collagen%3A+A+charge+neutralization+theory+for+calcification+and+its+relationship+to+atherosclerosis%5BTitle%5D)+AND+%22Proceedings+of+the+National+Academy+of+Sciences+of+the+United+States+of+America%22%5BJournal%5D)">Neutral sites for calcium ion binding to elastin and collagen: A charge neutralization theory for calcification and its relationship to atherosclerosis.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 68 (4), 810-814 (1971).</li>
<li>Li, Z. Q., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Runx2+%28runt-related+transcription+factor+2%29-mediated+microcalcification+is+a+novel+pathological+characteristic+and+potential+mediator+of+abdominal+aortic+aneurysm%5BTitle%5D)+AND+%22Arteriosclerosis%2C+Thrombosis%2C+and+Vascular+Biology%22%5BJournal%5D)">Runx2 (runt-related transcription factor 2)-mediated microcalcification is a novel pathological characteristic and potential mediator of abdominal aortic aneurysm.</a> Arteriosclerosis, Thrombosis, and Vascular Biology. 40 (5), 1352-1369 (2020).</li>
<li>Kelly, M. J., Igari, K., Yamanouchi, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Osteoclast-like+cells+in+aneurysmal+disease+exhibit+an+enhanced+proteolytic+phenotype%5BTitle%5D)+AND+%22International+Journal+of+Molecular+Sciences%22%5BJournal%5D)">Osteoclast-like cells in aneurysmal disease exhibit an enhanced proteolytic phenotype.</a> International Journal of Molecular Sciences. 20 (19), 4689(2019).</li>
</ol>

La aplicación periártica de CaPO4 es un enfoque robusto para inducir AAA en ratones. Varios estudios han utilizado el modelo CaPO4 y consistentemente informaron que este es un método rápido y reproducible para estudiar AAA en ratones 7,9. Se considera que este modelo recapitula parte de las características del aneurisma aórtico humano y proporciona información mecanicista sobre la patogénesis AAA, incluida la inflamación y la degradación de ...

Un aneurisma aórtico abdominal (AAA) es una enfermedad cardiovascular letal caracterizada por la dilatación permanente de la aorta abdominal, con altas tasas de mortalidad una vez que se produce la ruptura. El AAA se asocia con el envejecimiento, el tabaquismo, el sexo masculino, la hipertensión y la hiperlipidemia1. Se ha demostrado que varios procesos patológicos contribuyen a la formación de AAA, incluida la proteólisis de fibras de la matriz extracelular, la infiltración de células inmunes y la pérdida de células del músculo liso vascular. Actualmente, los mecanismos patológicos de AAA siguen siendo difíciles de alcanzar, y no hay medicamentos probados para el tratamiento de AAA1. La investigación sobre AAA humanos es limitada debido a la existencia de pocas muestras de aorta humana; por lo tanto, se han establecido y adoptado ampliamente varios modelos animales AAA inducidos por modificación química, incluida la infusión subcutánea de angiotensina II (AngII), la incubación de elastasa perivascular o intraluminal y la aplicación de fosfato de calcio perivascular2. Un modelo de ratón comúnmente utilizado es la aplicación de fosfato de calcio (CaPO4) a la adventicia de la aorta abdominal infrarrenal, que es rentable y no requiere modificación genética.
La aplicación periaórtica directa de CaCl2 a la arteria carótida de conejos para inducir un cambio aneurismático fue reportada inicialmente por Gertz et al.3 y posteriormente se aplicó a las aortas abdominales de ratones. El modelo fue desarrollado por Yamanouchi et al. para acelerar la dilatación aórtica mediante el uso de cristales de CaPO 4 en ratones4. La infiltración de CaPO4 en aortas de ratones recapitula muchas características patológicas observadas en AAA humanos, incluida la infiltración profunda de macrófagos, la degradación de la matriz extracelular y la deposición de calcio. Los factores de riesgo del AAA humano, como la hiperlipidemia, también aumentan el AAA inducido por CaPO4 en ratones5. En contraste con el AAA inducido por perfusión AngII en ratones ApoE-/- o LDLR-/-, el AAA inducido por CaPO4 ocurre en la región aórtica infrarrenal, que imita el AAA humano. Actualmente, este método ha sido ampliamente aplicado para evaluar la susceptibilidad al desarrollo de AAA en ratones modificados genéticamente y evaluar los efectos anti-AAA de los fármacos 6,7.

<table><tbody><tr><td>CaCl2</td><td>MECKLIN</td><td>C805225</td><td></td></tr><tr><td>NaCl</td><td>Biomed</td><td>SH5001-01</td><td></td></tr><tr><td>PBS</td><td>HARVEYBIO</td><td>MB5051</td><td></td></tr><tr><td>Ventilador para animales pequeños</td><td>RWD</td><td>H1550501-012</td><td></td></tr></tbody></table>

un modelo de aneurisma aórtico abdominal de ratón inducido por fosfato de calcio

A Calcium Phosphate-Induced Mouse Abdominal Aortic Aneurysm Model

Un aneurisma aórtico abdominal (AAA) es una enfermedad cardiovascular potencialmente mortal que ocurre en todo el mundo y se caracteriza por una dilatación irreversible de la aorta abdominal. Actualmente, se utilizan varios modelos murinos AAA inducidos químicamente, cada uno simulando un aspecto diferente de la patogénesis de AAA. El modelo AAA inducido por fosfato de calcio es un modelo rápido y rentable en comparación con los modelos AAA inducidos por angiotensina II y elastasa. La aplicación de cristales de CaPO4 a la aorta del ratón da como resultado la degradación de la fibra elástica, la pérdida de células musculares lisas, la inflamación y la deposición de calcio asociada con la dilatación aórtica. Este artículo presenta un protocolo estándar para el modelo AAA inducido por CaPO4. El protocolo incluye la preparación de materiales, la aplicación quirúrgica del CaPO4 a la adventicia de la aorta abdominal infrarrenal, la recolección de aortas para visualizar aneurismas aórticos y análisis histológicos en ratones.

14 días después de la aplicación de CaPO4, los ratones machos C57BL / 6J fueron sacrificados, y sus aortas fueron cosechadas y limpiadas. Se obtuvo una imagen de la morfología de las aortas para visualizar la formación de AAA. Como se muestra en la Figura 1A-B, la aplicación de CaPO4 condujo a la dilatación de la aorta abdominal infrarrenal. Histológicamente, CaPO4 resultó en una degradación dramática de las fibras elásticas,...

Este protocolo describe un modelo de ratón de aneurisma aórtico abdominal (AAA) inducido por fosfato de calcio para estudiar las características patológicas y los mecanismos moleculares de los AAA.

Un modelo de aneurisma aórtico abdominal de ratón inducido por fosfato de calcio

An abdominal aortic aneurysm (AAA) is a life-threatening cardiovascular disease that occurs worldwide and is characterized by irreversible dilation of the ...

Este protocolo describe el modelo de ratón triple A de aneurisma aórtico abdominal inducido por fosfato de calcio para estudiar las características patológicas en los mecanismos moleculares del aneurisma aórtico abdominal. El modelo de aneurisma aórtico abdominal inducido por fosfato de calcio es un modelo rápido y rentable en comparación con el tubo de angiotensina y los modelos de aneurisma aórtico abdominal inducido por elastasa. Demostrando el procedimiento estará Zeyu Cai, post-doctor aquí, un compañero de nuestro laboratorio.Para empezar, corte tiras de 0,3 centímetros de ancho de guantes de goma sin polvo y gasa. Luego compre ratones Mayo C57BL6J de ocho a diez semanas de edad, y aloje a los animales en un ambiente con aire acondicionado con un ciclo de oscuridad clara de 12 horas y acceso gratuito a alimentos y agua. A continuación, autoclave la gasa, los hisopos de algodón, las tijeras y los fórceps antes de la cirugía, y obtenga Betadine, etanol al 70% y lavado de manos antiséptico.Afeitar el vello abdominal del ratón anestesiado con un cortapelos eléctrico o crema depilatoria. Luego frote y limpie el área afeitada con Betadine, seguido de etanol al 70% varias veces con un movimiento circular. Luego haga una incisión de aproximadamente 1,5 centímetros en la parte inferior del abdomen a lo largo de la línea media del abdomen con tijeras.Usando un hisopo de algodón estéril humedecido con solución salina normal, retire cuidadosamente el intestino hasta que la aorta infrarrenal sea visible. A continuación, diseccione el tejido conectivo y la grasa de la aorta infrarrenal durante una sección de aproximadamente 0,5 centímetros mientras evita cualquier desgarro en los vasos pequeños del lado dorsal. Luego, empaque un trozo de la tira de guante de goma empapada en solución salina debajo de la aorta abdominal y la vena principal abdominal mientras limpia el exceso de líquido con un hisopo de algodón.Después, empaque un trozo de gasa empapado con cloruro de calcio molar 0.5 en la adventicia de la vasculatura abdominal infrarrenal durante 10 minutos. Retire la gasa y empaque otra pieza de gasa empapada con solución de PBS durante cinco minutos para generar cristales de ortofosfato de calcio en C2 en la adventicia de la aorta. Luego retire con cuidado la tira del guante de goma y la gasa.Después de restablecer el tracto intestinal del ratón, suture la incisión abdominal y la piel con una sutura de cinco ceros. A continuación, coloque el mouse en una almohadilla térmica hasta que el mouse recupere la conciencia. Aloje al ratón durante otros 14 días y monitoree el ratón de cerca después de la cirugía y observe al menos todos los días posteriormente.Después de 14 días de la cirugía, abra ventralmente las cavidades torácicas y abdominales del ratón sacrificado y abra la aurícula derecha. Profundir a los ratones con tampón PBS a través del ventrículo izquierdo del corazón para eliminar la sangre en la aorta y luego perfundir con paraformaldehído al 4% como se describe en el manuscrito. Retire el tejido adventicio y la grasa cuidadosamente bajo un microscopio estéreo.Luego cosecha la aorta y colócala en un tubo que contenga cinco mililitros de paraformaldehído al 4% durante 48 horas. Luego fije la aorta en una placa de cera negra con agujas de insectos y proceda a adquirir imágenes aórticas. Después de 14 días de aplicación de ortofosfato de calcio, se obtuvo una imagen de la morfología de las aortas para visualizar la formación de aneurismas aórticos abdominales.Se observó que el ortofosfato de calcio condujo a la dilatación de la aorta abdominal infrarrenal y dio lugar a una degradación dramática de las fibras elásticas como se ilustra por las roturas de elastina. Usar un hisopo de algodón estéril humedecido con solución salina normal para extraer el intestino hasta que la aorta infrarrenal sea visible y luego extraer el tejido conectivo y la grasa de la aorta infrarrenal. En general, el modelo de aneurisma aórtico abdominal inducido por fosforato de calcio en ratones es un enfoque rápido y rentable para explorar los mecanismos moleculares y las estrategias terapéuticas del aneurisma aórtico abdominal y podría aplicarse en paralelo con los otros modelos para imitar completamente las características del aneurisma aórtico abdominal humano.

a-calcium-phosphate-induced-mouse-abdominal-aortic-aneurysm-model

Research

Investigación

JoVE Journal

Biology

Biología

Este video muestra cómo inducir a los aneurismas de aorta abdominal (AAA) en ratones a través de la infusión intraluminal transitoria de la elastasa pancreática porcina en el segmento infrarrenal de la aorta abdominal. El modelo tiene la capacidad de agregar visión completa de la biopatología de la AAA, debido a la aparición de numerosos transgénicos y ratones knock-out de genes.

Creación de murino Experimental aneurismas de aorta abdominal con elastasa

Este artículo describe una metodología detallada del uso de un caucho de silicón radiopaco con base de plomo para inundar la vasculatura murina para la cuantificación del diámetro aórtico en un modelo murino de aneurisma aórtico y disección.

Análisis de Micro-CT cuantitativa de Aortopathy en un modelo murino de disección y aneurisma de la aorta inducida por β-oxidasa

Este novedoso modelo crea aneurismas aórticos infrarrojos robustos en cerdos utilizando una combinación de angioplastia con balón, perfusión por elastasa/colagenasa, aplicación tópica de elastasa y administración oral de compuestos-aminopropionitrilo, que interfiere con la reticulación de colágeno.

Modelo porcino del aneurisma aórtico abdominal infrarrenal

El presente protocolo describe un método quirúrgico estandarizado para el modelo AAA inducido por elastasa a través de la aplicación directa de elastasa a la adventicia de la aorta abdominal infrarrenal en ratones.

Modelo de aneurisma aórtico abdominal de ratón inducido por la aplicación perivascular de elastasa

Este manuscrito presenta un protocolo para establecer un modelo de aneurisma de aorta abdominal en ratón utilizando cloruro de calcio y elastasa, combinando las ventajas de los métodos de modelado anteriores. Este modelo se puede utilizar para investigar los mecanismos fisiopatológicos subyacentes a los aneurismas de aorta abdominal.

Un modelo de aneurisma de aorta abdominal de ratón por infiltración periadventicial de cloruro de calcio y elastasa

Este protocolo describe un enfoque quirúrgico metódico para modelar aneurismas de aorta abdominal avanzados en ratones mediante una combinación de aplicación directa de elastasa a la aorta infrarrenal y administración de ß-aminopropionitrilo a través del agua potable.

Modelado avanzado de aneurisma de aorta abdominal en ratones mediante combinación de elastasa tópica y ß-aminopropionitrilo oral

Este protocolo proporciona un método repetible y fiable para inducir aneurismas de la aorta abdominal (AAA) en ratones C57BL/6 mediante sensibilización con elastina y aplicación de elastasa perivascular, como un modelo AAA que incorpora un componente de sensibilización inmune.

Creación fiable de un modelo de aneurisma aórtico abdominal murino utilizando sensibilización con elastina y elastasa perivascular

La angiogénesis, el surgimiento de los vasos sanguíneos a partir de vasos preexistentes, se asocia con procesos naturales y patológicos. Aquí se demuestra un ensayo de anillo aórtico que permite a los potenciadores e inhibidores de la angiogénesis que se añade directamente a los anillos de la aorta en la cultura. Surgimiento y extensión de neovasos se puede determinar mediante la inspección de los anillos de aorta en un período de 6-12 días.

Ensayo del anillo aórtico

Ortotópico modelos animales de cáncer de ovario reproducir mejor las enfermedades humanas y por lo tanto, mejorar nuestra comprensión de la progresión del cáncer y la respuesta del tumor a la terapia. Un modelo de ratón recibe una inyección intrabursal de luciferasa que expresan las células tumorales de ovario. El tratamiento se administra a través de una sonda nasogástrica. El crecimiento del tumor está controlado...

En vivo de imágenes y tratamientos terapéuticos en un modelo de ratón ortotópico de cáncer de ovario

Las células endoteliales vasculares desempeñan un papel importante en muchos trastornos cardiovasculares importantes. Este artículo describe un método simple para aislar y expandir las células endoteliales de la aorta del ratón sin usar ningún equipo especial. Nuestro protocolo proporciona un medio eficaz para identificar mecanismos en la fisiopatología de las células endoteliales.

Aislamiento y cultivo primario de células endoteliales aórticas de ratón

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