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DOI: 10.3791/64310-v
Jeanne A. Ishimwe1, Jianyong Zhong2,3, Valentina Kon2, Annet Kirabo1
1Division of Clinical Pharmacology, Department of Medicine Vanderbilt University Medical Center and Department of Molecular Physiology and Biophysics,Vanderbilt University, 2Division of Pediatric Nephrology Department of Pediatrics,Vanderbilt University Medical Center, 3Department of Pathology, Microbiology, and Immunology,Vanderbilt University Medical Center
Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.
El objetivo aquí es delinear un protocolo para investigar los mecanismos de la disbiosis en la enfermedad cardiovascular. Este documento discute cómo recolectar y trasplantar asépticamente muestras fecales murinas, aislar intestinos y usar el método "Swiss-roll", seguido de técnicas de inmunotinción para interrogar los cambios en el tracto gastrointestinal.
Aquí hemos descrito un protocolo para guiar a otros en la investigación de los mecanismos de la disbiosis en la enfermedad, desde la recolección de muestras fecales hasta el uso del método Swiss roll para estudiar los cambios en el intestino. Para comenzar, rocíe el pecho y los lados del ratón sacrificado con etanol al 70%, y abra cuidadosamente la piel y la cavidad peritoneal para exponer el tracto gastrointestinal. Aísle el ciego y use tijeras quirúrgicas estériles para cortarlo por la mitad.
Exponga brevemente el ciego, y corte 0,5 centímetros proximalmente desde el íleon y 0,5 centímetros distalmente en su unión con el colon. Transfiera el ciego aislado a una placa de Petri estéril. Use una espátula estéril para transferir el contenido de cecal a tubos estériles y almacene las alícuotas en un congelador de 80 grados centígrados.
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