Identificación y aislamiento de progenitores eritroides de unidades formadoras de ráfagas y unidades formadoras de colonias a partir de tejido de ratón mediante citometría de flujo

Este protocolo permite la identificación y el aislamiento de progenitores eritroides BFU-E y CFU-E directamente de tejido de ratón recién cosechado como médula ósea y bazo. Utilizando esta técnica, podemos aislar poblaciones puras de progenitores eritroides, lo que no era posible con los protocolos de flujo anteriores. Este método mejora en gran medida nuestra capacidad para estudiar modelos de ratón con enfermedad eritroide al permitir el aislamiento de progenitores para muchos experimentos posteriores.

Para comenzar, coloque los fémures y la tibia recién disecados directamente en el tampón de tinción fría o SB-5 y mantenga los tubos en hielo hasta que estén listos para extraer la médula ósea. Coloque un mortero esterilizado limpio sobre hielo en un cubo y transfiera los huesos al mortero. Usando las tijeras de disección, corte aproximadamente 1 milímetro de cada hueso.