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DOI: 10.3791/64377-v
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En este trabajo, se emplea un enfoque de reconstitución in vitro para estudiar la poroelasticidad de los geles de actomiosina en condiciones controladas. Se cuantifica la dinámica del gel de actomiosina y el disolvente incrustado, a través de la cual se demuestra la porosidad de la red. También discutimos los desafíos experimentales, las trampas comunes y la relevancia para la mecánica del citoesqueleto celular.
Hemos desarrollado un enfoque in vitro para caracterizar la mecánica de los geles poroelásticos de actomiosina como un sistema modelo del citoesqueleto celular y, más generalmente, del citoplasma, que se ha demostrado que se comporta como un material activo poroelástico. Este método proporciona información sobre cómo la contractilidad de la miosina contribuye a la aparición de un flujo de fluido y cómo las velocidades de la red y el citosol se correlacionan en el tiempo y el espacio. Este enfoque simple nos permite extraer las propiedades mecánicas de los sistemas que evolucionan dinámicamente sin utilizar ningún equipo o técnica sofisticada donde no se puedan emplear herramientas convencionales como AFIM.
Este método puede proporcionar información sobre la reología de los materiales activos poroelásticos independientemente de la especificidad del gel activo y el fluido incrustado. Para comenzar, coloque de 10 a 12 cubreobjetos de vidrio número 1.5 en un soporte casero de politetrafluoroetileno y prepare la solución de piraña en un vaso de precipitados de 400 mililitros. Prepare la solución en hielo en una campana química.
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