Name: Investigación del transporte a larga distancia de ácidos perfluoroalquilo en trigo a través de una técnica de exposición de raíz dividida (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2022-09-28T14:05:00.000+00:00
Duration: 7 min 6 s
Description: Aprende a estudiar el transporte de ácidos perfluoroalquilo en trigo mediante la técnica de raíz dividida. Este método permite observar la translocación de compuestos orgánicos a larga distancia en plantas.

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Agradecemos el apoyo financiero de la Fundación de Ciencias Naturales de China (NSFC 21737003), el Fondo Científico de las Universidades Chinas (No. 2452021103) y la Fundación de Ciencias Postdoctorales de China (No. 2021M692651, 2021M702680).

Las semillas de trigo, Triticum aestivum L., fueron adquiridas (ver Tabla de Materiales) y utilizadas para el presente estudio.
1. Germinación de plántulas de trigo y cultivo hidropónico
<ol><li>Seleccione semillas de trigo de tamaño similar y desinfúntelas durante 15 minutos con una solución de peróxido de hidrógeno al 8% (p/p).</li>
	<li>Enjuague bien las semillas desinfectadas con agua desionizada y luego colóquelas en papel de filtro húmedo en la oscuridad a temperatura ambiente para germinar durante 5 días.</li>
	<li>Seleccione aproximadamente nueve plántulas germinadas de tamaño uniforme y transfiéralas a vasos de plástico con 250 ml de solución nutritiva (1/4 de fuerza de la solución de Hoagland; su composición química se muestra en la Tabla 1). NOTA: De las nueve semillas, tres fueron seleccionadas para blanco, PFOA y PFOS, respectivamente.</li>
	<li>Cultivar las plántulas en cámaras de crecimiento durante 7 días antes de la exposición con un ciclo de 14 h a 22 °C y 10 h a 27 °C.</li>
</ol>2. El experimento de división de raíces
<ol><li>Realizar el cultivo de plántulas en dos tubos centrífugos de 50 mL (A y B). NOTA: En el tubo de centrífuga A, había 50 ml de solución estéril de Hoagland de 1/4 de fuerza, y la misma cantidad de solución nutritiva estaba presente en el tubo de centrífuga B.<ol><li>Disuelva el PFOA y el PFOS comerciales (consulte la Tabla de materiales) en metanol y dilúyalos con la solución nutritiva estéril como solución madre. Luego, agregue la solución madre al tubo B a una concentración de PFOA/PFOS de 100 μg/L.</li>
		<li>Realizar los tratamientos por triplicado con un control en blanco para monitorizar la contaminación de fondo. En la Figura 1 se muestra un diagrama esquemático de los experimentos de exposición de raíz dividida.</li>
	</ol></li>
	<li>Separe las raíces enteras de la plántula de trigo con pinzas en dos partes iguales para que las raíces aún estén enganchadas al mismo brote e insértelas cuidadosamente en los tubos A y B, respectivamente.</li>
	<li>Selle los dos tubos con papel de aluminio y críquelos en una incubadora durante 7 días. Mantener las mismas condiciones de incubación indicadas en el paso 1.4.</li>
	<li>Recoja las plántulas de trigo después de 7 días de cultivo y separe el trigo en tres partes: brotes y raíces cultivadas en la solución con púas de PFAA y solución sin púas, respectivamente, utilizando tijeras esterilizadas.</li>
	<li>Liofilizar las muestras de plantas en un liofilizador a −55 °C durante 48 h.</li>
	<li>Homogeneizar y pesar las muestras de raíz y brote. Recoja las muestras de solución con y sin púas.</li>
</ol>3. Extracción de PFOA y PFOS de tejidos vegetales
<ol><li>Agregue 2 ml de tampón de carbonato de sodio (0.25 mol/L), 1 mL de sulfato de hidrógeno de tetrabutilamonio (0.5 mol/L) y 5 ml de metil terc-butil éter (consulte la Tabla de materiales) a un tubo de polipropileno de 15 ml, incluida la raíz o brote homogeneizado.</li>
	<li>Agitar el tubo a 250 rpm durante 20 min y centrifugar a 2.000 x g durante 10 min a temperatura ambiente para obtener la fase orgánica sobrenadante. Realice el proceso de extracción dos veces.</li>
	<li>Mezclar los extractos recolectados, vaporizar hasta que se sequen en una suave corriente de nitrógeno (N2), y luego reconstituir con 5 mL de metanol y vorártelos, manteniendo la misma velocidad durante aproximadamente 30 s.</li>
	<li>Acondicione el cartucho de pesticarb (consulte la Tabla de materiales) con 5 ml de NH4OH al 0,1% en metanol, 5 ml de agua y 5 ml de metanol.</li>
	<li>Agregue los 5 ml de solución de metanol de extracción a través del cartucho de pesticarb (500 mg/6 ml) para eliminar el pigmento, eluya el cartucho con 5 ml de metanol y recoja en los mismos tubos.</li>
	<li>Evaporar los 10 ml de solución de metanol recogidos hasta casi sequedad y reconstituir con 200 μL de metanol, seguido de vórtice y centrifugación a 10.000 x g durante 20 min a temperatura ambiente.</li>
</ol>4. Preparación de la muestra de la solución nutritiva
<ol><li>Acondicione con 5 ml de metanol y 5 ml de agua para activar el cartucho de extracción de polímero mejorado polar (PEP) (60 mg/g, 3 ml) (consulte la Tabla de materiales).</li>
	<li>Añadir 1 ml de la solución enriquecida o 50 ml de las muestras de solución sin pinchos (paso 2.6) a través del cartucho, respectivamente.</li>
	<li>Eluya los PFAA objetivo con 10 ml de metanol, evapore el extracto con N2 suave y luego reconstituya con 200 μL de metanol para su análisis.</li>
</ol>5. Análisis instrumental
<ol><li>Utilice una cromatografía líquida UPLC de ultra rendimiento junto con espectrometría de masas en tándem (LC-MS / MS) para la cuantificación de los PFAA objetivo en modo de reacción múltiple (MRM) e ionización por electrospray negativo (ESI-) (consulte la Tabla de materiales).</li>
	<li>Inyecte 10 μL de muestras y separe los PFAA objetivo utilizando una columna cromatográfica líquida C18 (1,7 μm, 2,1 mm x 50 mm, consulte la Tabla de materiales), y utilice acetato de amonio de 2 mM en agua (fase A) y metanol (fase B) como fase móvil para UPLC, con un caudal de 0,3 ml / min. Mantener la temperatura de la columna a 50 °C. NOTA: Las transiciones iónicas de PFOA y PFOS son 413 a 369 y 499 a 80, respectivamente. El programa de elución de gradiente y los parámetros instrumentales LC-MS/MS para la cuantificación de los PFAA objetivo se enumeran en la Tabla 2.</li>
	<li>Procese los datos con el software de análisis de datos (consulte la Tabla de materiales).</li>
</ol>

<ol><li>Lindstrom, A. B., Strynar, M. J., Libelo, E. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Polyfluorinated+compounds%3A+Past%2C+present%2C+and+future%5BTitle%5D)+AND+%22Environmental+Science+%26+Technology%22%5BJournal%5D)">Polyfluorinated compounds: Past, present, and future.</a> Environmental Science & Technology. 45 (19), 7954-7961 (2011).</li>
<li>Kannan, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Perfluoroalkyl+and+polyfluoroalkyl+substances%3A+Current+and+future+perspectives%5BTitle%5D)+AND+%22Environmental+Chemistry%22%5BJournal%5D)">Perfluoroalkyl and polyfluoroalkyl substances: Current and future perspectives.</a> Environmental Chemistry. 8 (4), 333-338 (2011).</li>
<li>Cui, Q., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Occurrence+and+tissue+distribution+of+novel+perfluoroether+carboxylic+and+sulfonic+acids+and+legacy+per%2Fpolyfluoroalkyl+substances+in+black-spotted+frog+%28Pelophylax+nigromaculatus%29%5BTitle%5D)+AND+%22Environmental+Science+%26+Technology%22%5BJournal%5D)">Occurrence and tissue distribution of novel perfluoroether carboxylic and sulfonic acids and legacy per/polyfluoroalkyl substances in black-spotted frog (Pelophylax nigromaculatus).</a> Environmental Science & Technology. 52 (3), 982-990 (2018).</li>
<li>Negri, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Exposure+to+PFOA+and+PFOS+and+fetal+growth%3A+a+critical+merging+of+toxicological+and+epidemiological+data%5BTitle%5D)+AND+%22Critical+Reviews+in+Toxicology%22%5BJournal%5D)">Exposure to PFOA and PFOS and fetal growth: a critical merging of toxicological and epidemiological data.</a> Critical Reviews in Toxicology. 47 (6), 489-515 (2017).</li>
<li>Chi, Q., Li, Z., Huang, J., Ma, J., Wang, X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Interactions+of+perfluorooctanoic+acid+and+perfluorooctanesulfonic+acid+with+serum+albumins+by+native+mass+spectrometry%2C+fluorescence+and+molecular+docking%5BTitle%5D)+AND+%22Chemosphere%22%5BJournal%5D)">Interactions of perfluorooctanoic acid and perfluorooctanesulfonic acid with serum albumins by native mass spectrometry, fluorescence and molecular docking.</a> Chemosphere. 198, 442-449 (2018).</li>
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<li>Stockholm Convention. Chemicals proposed for listing under the Convention. , Switzerland. Available from: 
 <a target="_blank" href="http://chm.pops.int/TheConvention/ThePOPs/ChemicalsProposedforListing/tabid/2510/Default.aspx">http://chm.pops.int/TheConvention/ThePOPs/ChemicalsProposedforListing/tabid/2510/Default.aspx</a> (2019).</li>
<li>Pan, Y. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Worldwide+distribution+of+novel+perfluoroether+carboxylic+and+sulfonic+acids+in+surface+water%5BTitle%5D)+AND+%22Environmental+Science+%26+Technology%22%5BJournal%5D)">Worldwide distribution of novel perfluoroether carboxylic and sulfonic acids in surface water.</a> Environmental Science & Technology. 52 (14), 7621-7629 (2018).</li>
<li>Knight, E. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+investigation+into+the+long-term+binding+and+uptake+of+PFOS%2C+PFOA+and+PFHxS+in+soil+-+plant+systems%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Hazardous+Materials%22%5BJournal%5D)">An investigation into the long-term binding and uptake of PFOS, PFOA and PFHxS in soil - plant systems.</a> Journal of Hazardous Materials. 404, 124065(2021).</li>
<li>Liu, Z. Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Crop+bioaccumulation+and+human+exposure+of+perfluoroalkyl+acids+through+multi-media+transport+from+a+mega+fluorochemical+industrial+park%2C+China%5BTitle%5D)+AND+%22Environment+International%22%5BJournal%5D)">Crop bioaccumulation and human exposure of perfluoroalkyl acids through multi-media transport from a mega fluorochemical industrial park, China.</a> Environment International. 106, 37-47 (2017).</li>
<li>Mei, W. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Per-+and+polyfluoroalkyl+substances+%28PFASs%29+in+the+soil-plant+system%3A+Sorption%2C+root+uptake%2C+and+translocation%5BTitle%5D)+AND+%22Environment+International%22%5BJournal%5D)">Per- and polyfluoroalkyl substances (PFASs) in the soil-plant system: Sorption, root uptake, and translocation.</a> Environment International. 156, 106642(2021).</li>
<li>Wang, W., Rhodes, G., Ge, J., Yu, X., Li, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Uptake+and+accumulation+of+per-+and+polyfluoroalkyl+substances+in+plants%5BTitle%5D)+AND+%22Chemosphere%22%5BJournal%5D)">Uptake and accumulation of per- and polyfluoroalkyl substances in plants.</a> Chemosphere. 261, 127584(2020).</li>
<li>Lu, J., Wu, J., Stoffella, P. J., Wilson, P. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Analysis+of+bisphenol+A%2C+nonylphenol%2C+and+natural+estrogens+in+vegetables+and+fruits+using+gas+chromatography-tandem+mass+spectrometry%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Agricultural+and+Food+Chemistry%22%5BJournal%5D)">Analysis of bisphenol A, nonylphenol, and natural estrogens in vegetables and fruits using gas chromatography-tandem mass spectrometry.</a> Journal of Agricultural and Food Chemistry. 61 (1), 84-89 (2013).</li>
<li>Herschbach, C., Gessler, A., Rennenberg, H. Long Distance Transport and Plant Internal Cycling of N- and S-Compounds. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aHerschbach%2C+C+%22Progress+in+Botany+73%22">Progress in Botany 73</a>. Luttge, U., Beyschlag, W., Budel, B., Francis, D. , Springer. Berlin, Heidelberg. 161-188 (2012).</li>
<li>Liu, Q., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Uptake+kinetics%2C+accumulation%2C+and+long-distance+transport+of+organophosphate+esters+in+plants%3A+Impacts+of+chemical+and+plant+properties%5BTitle%5D)+AND+%22Environmental+Science+%26+Technology%22%5BJournal%5D)">Uptake kinetics, accumulation, and long-distance transport of organophosphate esters in plants: Impacts of chemical and plant properties.</a> Environmental Science & Technology. 53 (9), 4940-4947 (2019).</li>
<li>Wang, Z. Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Xylem-+and+phloem-based+transport+of+CuO+nanoparticles+in+maize+%28Zea+mays+L.%29%5BTitle%5D)+AND+%22Environmental+Science+%26+Technology%22%5BJournal%5D)">Xylem- and phloem-based transport of CuO nanoparticles in maize (Zea mays L.).</a> Environmental Science & Technology. 46 (8), 4434-4441 (2012).</li>
<li>Chen, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Uptake%2C+accumulation%2C+and+translocation+mechanisms+of+steroid+estrogens+in+plants%5BTitle%5D)+AND+%22Science+of+the+Total+Environment%22%5BJournal%5D)">Uptake, accumulation, and translocation mechanisms of steroid estrogens in plants.</a> Science of the Total Environment. 753, 141979(2021).</li>
<li>Felizeter, S., McLachlan, M. S., de Voogt, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Uptake+of+perfluorinated+alkyl+acids+by+hydroponically+grown+lettuce+%28Lactuca+sativa%29%5BTitle%5D)+AND+%22Environmental+Science+%26+Technology%22%5BJournal%5D)">Uptake of perfluorinated alkyl acids by hydroponically grown lettuce (Lactuca sativa).</a> Environmental Science & Technology. 46 (21), 11735-11743 (2012).</li>
<li>Zhou, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Insights+into+uptake%2C+translocation%2C+and+transformation+mechanisms+of+perfluorophosphinates+and+perfluorophosphonates+in+wheat+%28Triticum+aestivum+L.%29%5BTitle%5D)+AND+%22Environmental+Science+%26+Technology%22%5BJournal%5D)">Insights into uptake, translocation, and transformation mechanisms of perfluorophosphinates and perfluorophosphonates in wheat (Triticum aestivum L.).</a> Environmental Science & Technology. 54 (1), 276-285 (2020).</li>
</ol>

Los autores no tienen nada que revelar.

Para garantizar la precisión de este método, se debe realizar una operación cuidadosa para garantizar que la solución con púas en el tubo B no contamine la solución sin pinchos en el tubo A. La concentración dada de PFAA objetivo en el presente estudio fue relativamente más alta que su concentración en el entorno real, lo que garantiza monitorear los PFAA objetivo en trigo y solución sin púas utilizando LC-MS / MS. 
Existen limitaciones para este método. Dado que solo se utilizó una plántula d...

Los ácidos perfluoroalquilo (PFAA) son ampliamente utilizados en diversos productos comerciales e industriales debido a sus excelentes propiedades fisicoquímicas, incluida la actividad superficial y la estabilidad térmica y química 1,2,3. El ácido perfluorooctano sulfónico (PFOS) y el ácido perfluorooctano (PFOA) son los dos PFAA más importantes utilizados en todo el mundo 4,5,6, aunque estos compuestos se enumeraron en el Convenio internacional de Estocolmo en 2009 y 20197,8, respectivamente. Debido a su persistencia y uso generalizado, el PFOS y el PFOA se han detectado ampliamente en diversas matrices ambientales. Las concentraciones de PFOA y PFOS en las aguas superficiales de diferentes ríos y lagos del mundo son de 0,15 a 52,8 ng/L y de 0,09 a 29,7 ng/L,respectivamente9. Debido al uso de aguas subterráneas o regeneradas para riego y también al uso de biosólidos como fertilizantes, el PFOA y el PFOS están ampliamente presentes en el suelo, oscilando entre 0,01-123 μg/kg y 0,003-162 μg/kg, respectivamente10, lo que podría introducir una gran cantidad de PFAA en las plantas y plantear riesgos potenciales para la salud humana. Las concentraciones de PFAA (C4-C8) en suelos agrícolas y granos (trigo y maíz) muestran una correlación lineal positiva11. Por lo tanto, es imperativo investigar la acumulación y translocación de PFAA dentro de las plantas.
La translocación de PFAAs en plantas ocurre primero desde las raíces a los tejidos aéreos, y la translocación de PFAAs desde las raíces a los tejidos comestibles se considera transporte a larga distancia12,13. Estudios previos han detectado bisfenol A, nonilfenol y estrógenos naturales en verduras y frutas14, lo que implica que estos productos químicos podrían migrar a través del floema. Por lo tanto, descubrir la translocación de PFAA en las plantas es importante para evaluar su riesgo potencial. Sin embargo, la acumulación y translocación de PFAA se ven afectadas por su biodisponibilidad en el suelo, por lo que no es fácil evaluar la capacidad de translocación de los PFAA objetivo en las plantas. Además, los experimentos hidropónicos generalmente están limitados por varios factores, lo que dificulta la adquisición de los tejidos comestibles de las plantas. Típicamente, el floema fue recolectado directamente de las plantas para observar la translocación de compuestos orgánicos a través de largas distancias en las plantas, mientras que es difícil adquirir floemas de las plántulas de las plantas15. Por lo tanto, se introdujo un método simple y efectivo, la técnica de raíz dividida, para estudiar la translocación de PFAA en plantas durante una exposición relativamente a corto plazo. En cuanto a la investigación de raíz dividida, las raíces en una plántula de planta se separan en dos partes; una parte se coloca en la solución nutritiva que contiene PFAA objetivo (tubo A), y la otra se coloca en la solución nutritiva en ausencia de PFAA (tubo B). Después de la exposición durante varios días, los PFAA en el tubo B se miden mediante LC-MS/MS. La concentración de PFAAs en el tubo B revela el potencial de translocación de PFAAs a través del floema dentro de las plantas16,17,18.
El experimento de raíz dividida se ha reportado para estudiar la translocación a larga distancia de muchos compuestos en plantas, como las nanopartículas de CuO17, los estrógenos esteroides 18 y los ésteres organofosforados16. Estos estudios proporcionaron evidencia de que estos compuestos podrían transferirse a través del floema a las partes comestibles de las plantas. Sin embargo, es necesario explorar más a fondo si los PFAA podrían ayudar en la translocación en las plantas y el impacto de las propiedades de los compuestos. Sobre la base de estos informes, el experimento de raíz dividida se llevó a cabo en el presente estudio para revelar el transporte a larga distancia de PFAA en el trigo.

<table><tbody><tr><td>Columna ACQUITY UPLC BEH C18</td><td>Waters, Milford, MA</td><td></td><td>Columna cromatográfica líquida</td></tr><tr><td>Cleanert cartucho PEP</td><td>Bonna- Angel Technologies, China</td><td></td><td>Columna de extracción en fase sólida</td></tr><tr><td>Clearnert Cartucho de Pesticarb</td><td>Bonna- Angel Technologies, China</td><td></td><td>Columna de extracción en fase sólida</td></tr><tr><td>LC-MS/MS(Waters Acquity UPLC i-Class Coupled to Xevo TQ-S)</td><td>Waters, Milford, MA</td><td></td><td>Cromatografía líquida y espectrometría</td></tr><tr><td>de masas Liofilizador&nbsp;</td><td>Boyikang Instrument Ltd., Pekín, China</td><td>FD-1A50</td><td>Muestra liofilizada</td></tr><tr><td>Masslynx</td><td>Waters, Milford, MA</td><td></td><td>software de análisis de datos</td></tr><tr><td>Metil terc-butil éter</td><td>Sigma-Aldrich Chemical Co. (St. Louis, EE. UU.)</td><td></td> <td>uso para extraer compuestos objetivo de tejidos vegetales</td></tr><tr><td>MPFAC-MXA</td><td>Wellington Laboratories (Ontario, Canadá)</td> <td>PFACMXA0518</td><td>los estándares internos</td></tr><tr><td>PFAC-MXB</td><td>Wellington Laboratories (Ontario, Canadá)</td><td>PFACMXB0219</td><td>mezcla de patrones de calibración de PFAA</td></tr><tr><td>PFOA</td><td>Sigma-Aldrich Chemical Co. (St. Louis, EE. UU.)</td> <td>335-67-1</td><td>a representan PFAA</td></tr><tr><td></td><td>PFOS Sigma-Aldrich Chemical Co. (St. Louis, EE. UU.)</td> <td>2795-39-3</td><td>a representan PFAA</td></tr><tr><td>Tampón de carbonato de sodio</td><td>Sigma-Aldrich Chemical Co. (St. Louis, EE. UU.)</td><td></td><td>uso para la extracción de compuestos objetivo de tejidos vegetales</td></tr><tr><td>Sulfato de hidrógeno de tetrabutilamonio</td><td>Sigma-Aldrich Chemical Co. (St. Louis, EE. UU.)</td><td></td> <td>uso para extraer compuestos objetivo de tejidos vegetales</td></tr><tr><td>Semillas de trigo</td><td>Academia China de Ciencias Agrícolas (Beijing, China)&nbsp;</td><td></td><td>Triticum aestivum L.</td></tr></tbody></table>

investigación del transporte a larga distancia de ácidos perfluoroalquilo en trigo a través de una técnica de exposición de raíz dividida

Investigating Long-Distance Transport of Perfluoroalkyl Acids in Wheat via a Split-Root Exposure Technique

Grandes cantidades de ácidos perfluoroalquilo (PFAA) se han introducido en el suelo y las plantas las han acumulado, lo que plantea riesgos potenciales para la salud humana. Es imperativo investigar la acumulación y translocación de PFAA dentro de las plantas. El transporte a larga distancia es una vía importante para los PFAA transferidos de las hojas de la planta a los tejidos comestibles a través del floema. Sin embargo, anteriormente era difícil evaluar el potencial de translocación de la contaminación orgánica en un período de exposición a corto plazo. El experimento de raíz dividida proporciona una solución para descubrir eficazmente la translocación a larga distancia de PFAA utilizando un experimento hidropónico, que, en este estudio, se llevó a cabo en dos tubos de centrífuga de 50 ml (A y B), de los cuales el tubo de centrífuga A tenía 50 ml de solución nutritiva estéril Hoagland de un cuarto de fuerza, mientras que el tubo de centrífuga B tenía la misma cantidad de concentración de nutrientes. y los PFAA objetivo (ácido perfluorooctano sulfónico, PFOS, y ácido perfluorooctano, PFOA) añadidos a una concentración dada. Una raíz de trigo integral se separó manualmente en dos partes y se insertó cuidadosamente en los tubos A y B. La concentración de PFAAs en las raíces, brotes de trigo y soluciones en los tubos A y B se evaluaron utilizando LC-MS/MS, respectivamente, después de ser cultivados en una incubadora durante 7 días y cosechados. Los resultados sugirieron que el PFOA y el PFOS experimentan un proceso similar de transporte a larga distancia a través del floema desde el brote hasta la raíz y podrían liberarse en el ambiente ambiente. Por lo tanto, la técnica de raíz dividida se puede utilizar para evaluar el transporte a larga distancia de diferentes productos químicos.

El experimento de raíz dividida investigó el transporte a larga distancia de PFAA en el trigo. Como se muestra en la figura 2A,C, tanto el PFOA como el PFOS podrían ser absorbidos por la raíz de trigo y transferidos al brote. No se detectaron PFOS ni PFOA en la raíz de trigo y la solución en el tubo A del control en blanco. Se encontró que se detectaron PFOS y PFOA en las raíces de trigo cultivadas en la solución sin pinchos, con una concentración de 0,26 ng/g ± 0,02 ng/g y ...

El presente protocolo describe un método simple y eficiente para el transporte a larga distancia de ácidos perfluoroalquilo en el trigo.

Investigación del transporte a larga distancia de ácidos perfluoroalquilo en trigo a través de una técnica de exposición de raíz dividida

Large amounts of perfluoroalkyl acids (PFAAs) have been introduced into the soil and accumulated by plants, posing potential risks to human health. It is ...

El floema se recolectó directamente de las plantas para observar la translocación de compuestos orgánicos a través de largas distancias, mientras que es difícil adquirir floema de las plántulas de las plantas. Se introdujo un método simple y efectivo, la técnica de raíz dividida, para estudiar la translocación de PFAA en plantas, durante una exposición relativamente a corto plazo. Este método también puede revelar el transporte a larga distancia de diferentes compuestos en las plantas.La concentración dada de PFAA objetivo debe ser relativamente más alta que su concentración en el entorno real, asegurando el monitoreo de los PFAA objetivo en el trigo en solución sin pinchos. Comience seleccionando el Triticum aestivum de tamaño similar, o semillas de trigo, y desinfecte durante 15 minutos con una solución de peróxido de hidrógeno al 8%. Enjuague bien las semillas desinfectadas con agua desionizada.Coloque las semillas en el papel de filtro húmedo en la oscuridad a temperatura ambiente durante 5 días para la germinación. Seleccione aproximadamente 9 plántulas germinadas, de tamaño uniforme, y transfiéralas a vasos de plástico con 250 mililitros de 1/4 de fuerza de la solución de Hoa

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Aquí, se describen pruebas biológicas diseñadas para controlar el desarrollo de un hongo patógeno Colletotrichum fioriniae, en presencia de extractos florales arándano o cranberry en cubreobjetos de vidrio. Agua, cloroformo y agua de lluvia de campo - basan floral extracción se detallan técnicas así como información sobre cómo puede aplicarse esta información.

Colletotrichum fioriniae Desarrollo en agua y extractos florales basadas en cloroformo arándano y arándano

Aquí, presentamos un protocolo para la cuantificación específica secuencial y análisis no dirigidos de compuestos fluorados en agua por espectrometría de masas. Esta metodología proporciona niveles cuantitativos de fluoroquímicos conocidos compuestos e identifica sustancias químicas desconocidas en muestras relacionadas con cálculos semicuantitativo de su abundancia.

Identificar por-polifluorado química especies y con un flujo de trabajo combinado dirigida y no dirigida-detección de alta resolución espectrometría de masas

La secreción de exudados radiculares suele ser una estrategia de desintoxicación externa para las plantas en condiciones de estrés. Este protocolo describe cómo evaluar el impacto de los xenobióticos en la alfalfa a través del análisis metabolómico no dirigido.

Colección de exudados de raíz de alfalfa para estudiar el impacto del ftalato de di (2-etilhexilo) en la producción de metabolitos

Aquí se presenta un protocolo para la determinación de la absorción, translocación y distribución de imidacloprid en trigo en condiciones hidropónicas utilizando cromatografía líquida-espectrometría de masas en tándem (LC-MS-MS). Los resultados mostraron que el imidacloprid puede ser absorbido por el trigo, y el imidacloprid se detectó tanto en las raíces como en las hojas del trigo.

Determinación de la absorción, translocación y distribución de imidacloprid en trigo

El presente protocolo describe los procedimientos utilizados para estudiar y caracterizar las enzimas relacionadas con la pared celular, principalmente la β-1,3-glucanasa y la peroxidasa, en plantas de trigo. Sus niveles de actividad aumentan durante la interacción trigo-RWA y están involucrados en la respuesta de defensa de la planta a través del refuerzo de la pared celular, lo que disuade la alimentación de pulgones.

Elucidando #946;-1,3-glucanasa y peroxidasa, propiedades fisicoquímicas del mecanismo de defensa de la pared celular del trigo contra la infestación por Diuraphis noxia

Este protocolo describe un enfoque de alto rendimiento para evaluar la fuga iónica de la planta, la actividad de la peroxidasa y la producción de calosas en la misma muestra.

Evaluación de las respuestas foliares a metabolitos microbianos secundarios utilizando un formato de alto rendimiento

Aprende a estudiar el transporte de ácidos perfluoroalquilo en trigo mediante la técnica de raíz dividida. Este método permite observar la translocación de compuestos orgánicos a larga distancia en plantas.

Investigación del transporte a larga distancia de ácidos perfluoroalquilo en trigo a través de una técnica de exposición de raíz dividida (Video) | JoVE Journal

Investigación del transporte a larga distancia de ácidos perfluoroalquilo en trigo a través de una técnica de exposición de raíz dividida

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