Cirugía y pruebas conductuales en el modelo de transposición del neuroma tibial en ratas

Este método ayuda a encontrar mejores tratamientos para el dolor del neuroma. La ventaja de esta técnica es que puede medir tanto el dolor neuroma como el dolor generalizado de forma independiente en el mismo modelo de repetición. El modelo TNT se ajusta particularmente a las pruebas del dolor del neuroma, ya que el neuroma en sí puede estimularse mecánicamente con los monofilamentos de Von Frey.

Comience colocando a la rata anestesiada sobre su espalda con la cabeza hacia la izquierda o hacia la derecha. Coloque la pierna a operar cerca del cirujano. Exorotar la extremidad posterior inferior para que el maléolo medial mire hacia arriba.

Antes de colocar a la rata bajo un microscopio quirúrgico estereoscópico con un aumento de 6x, desinfecte el área afeitada con al menos tres rondas alternas de exfoliante a base de yodo y alcohol. Localice la rodilla y haga suavemente una incisión longitudinal de dos a tres centímetros sobre el lado medial de la pata trasera desde la mitad de la pantorrilla hasta el tobillo con un bisturí. Si es necesario, abra la piel y el subcutis aún más con microtijeras hasta que las capas musculares sean visibles.

Identifique el haz neurovascular superficial como dos o tres líneas blancas, púrpuras o rojas que pueden moverse libremente sobre las capas musculares. Mantenga intacto el haz neurovascular. Diseccionar la parte posterior de este paquete.

A continuación, disecciona para abrir la fascia entre los músculos gastrocnemio. Entre la fascia de los músculos, se puede encontrar el haz neurovascular más profundo con el nervio tibial, que es aproximadamente tres veces el tamaño del haz neurovascular superficial. Use el hueso tibial como un punto de referencia adicional, ya que el nervio tibial vuela justo después del hueso tibial.

Para diseccionar el nervio tibial libre de los haces vasculares circundantes, mueva sin rodeos el nervio tibial y corte el tejido expuesto que muestra algo de estiramiento mientras mueve el nervio tibial. Una vez que todo el nervio tibial está expuesto, coloque las capas musculares hacia atrás para evitar la deshidratación del nervio hasta la disección de la piel pretibial del músculo subcutáneo. Para diseccionar la piel pretibial de la capa muscular subcutánea y hacer un túnel subcutáneo, sostenga la piel hacia arriba y empuje la punta roma hacia el tejido paralelo a la piel con una herramienta de microcirugía roma.

Asegúrese de que el extremo del túnel esté ubicado pretibial o lateralmente para facilitar el acceso al área para la prueba del neuroma. Después de cortar el nervio tibial en el extremo distal cerca del tobillo, cambie el aumento del microscopio a 10x o 16x e identifique el epineuro del nervio tibial proximal al corte hecho cerca del tobillo. O, en el caso de una bifurcación más proximal del nervio tibial, identificar el epineuro de las ramas medial y lateral de la sembradora proximal al corte realizado cerca del tobillo.

Coloca con cuidado un 8-0 Sutura de nylon a través del epineuro del extremo del nervio proximal sosteniendo el epineuro con pinzas y colocando la aguja entre el nervio y el epineuro con una mordida de aproximadamente 0,5 milímetros. Tome un bocado con la aguja por vía subcutánea al final del túnel subcutáneo y tire de la sutura para transponer el nervio lateralmente en el túnel subcutáneo. Arregle la sutura haciendo un nudo.

Coloque una sutura más gruesa de 4-0 con un color oscuro enrojecido hasta el extremo nervioso fijado sin penetrar en la piel. Asegúrese de que la sutura sea visible fuera de la piel. Verifique si el nervio permanece en su lugar después de mover la pata y los músculos.

Corte de los extremos de la sutura con un extremo de sutura ligeramente más largo en el 4-0, luego en el 8-0 sutura. Cambie el aumento del microscopio a 6x y cierre la piel con suturas intraepidérmicas usando el 8-0 sutura. Limpie suavemente la piel con cloruro de sodio al 0,9% con un hisopo de algodón.

Si la habitación está fría, coloque una almohadilla térmica debajo de una parte de una jaula limpia y coloque a la rata en la jaula debajo de una toalla de papel en una posición cómoda. Garantizar un fácil acceso a los alimentos y al agua. Para estimular la hipersensibilidad del nervio estéril, aplique el monofilamento en el lado lateral cerca del borde del cabello sin tocar las almohadillas de los pies.

Para estimular la hiposensibilidad del nervio tibial, aplique el monofilamento en el centro de la superficie de la maceta de la pata trasera. Para la prueba del sitio del neuroma, sostenga a las ratas con la nariz apuntando hacia el pliegue del codo. Si la rata se sostiene en la mano derecha, su pata trasera izquierda debe colgar libremente entre el pulgar derecho y el índice.

Después de verificar que la rata está tranquila y cómoda mientras sostiene, al inicio del estudio, coloque el monofilamento de 15 gramos suavemente en la superficie pretibial de la pata trasera expuesta. Después de la cirugía, coloque el monofilamento de 15 gramos en la sutura visible y aplique suficiente fuerza al monofilamento para doblar el cabello y mantenerlo durante un segundo. Von Frey, del sitio del neuroma, mostró que al inicio del estudio, las ratas respondieron al 10% al 15% de las aplicaciones de un monofilamento de 15 gramos.

Una semana después de la cirugía de transposición del neuroma tibial, la tasa de respuesta aumentó del 45% al 50%En el lado contralateral, las respuestas después de la cirugía fueron similares a la línea de base. Alrededor del 20% de las ratas no desarrollaron un neuroma doloroso y la tasa de respuesta no aumentó en comparación con la línea de base. Al final del muñón del nervio tibial transeccionado y transpuesto 12 semanas después de la cirugía, todas las ratas desarrollaron un neuroma.

La transección del nervio tibial redujo la sensibilidad mecánica en el centro del lado de la maceta de la pata trasera inervada por el nervio tibial. La hiposensibilidad presente una semana después de la cirugía fue significativamente diferente del lado contralateral y basal de tres semanas después de la cirugía y se mantuvo hasta 12 semanas después de la cirugía. En la parte lateral del lado de la maceta de la pata trasera inervada por el nervio sural intacto, las ratas desarrollaron una hipersensibilidad mecánica significativamente diferente del lado contralateral y la línea de base desde una semana después de la cirugía.

Persistió durante 12 semanas después de la cirugía. En la pata contralateral, la sensibilidad mecánica no se vio afectada en comparación con la línea de base en las áreas inervadas por el nervio sural o tibial. Recuerde crear una longitud fuera del nervio tibial para el rango de movimiento para la transposición lateral.

También recuerde marcar este sitio de neuroma con una sutura oscura.