Plataforma de chip microfluídico clínico para el aislamiento de células tumorales circulantes versátiles

Este protocolo describe un método para la enumeración de glóbulos rojos y el aislamiento clínico de CTC. Para comenzar, se cultivan las células tumorales MCF-7, MDA-MB-231 y HeLa en un matraz de cultivo celular a una vez de 10 a la quinta en un milímetro de DMEM, suplementado con 10% de suero fetal bovino y 1% de penicilina-estreptomicina. Incubar las células a 37 grados centígrados con un 5% de dióxido de carbono.

Cuando las líneas celulares crezcan como monocapas adherentes al 95% de confluencia, sepárelas de la placa de cultivo con una solución de tripsina al 0,25% durante dos minutos. Tiña las células tumorales agregando tres microlitros de Calceína AM y coloca la placa en la incubadora durante 30 minutos. Al final de la incubación, digiere todas las células con tripsina.