Name: Monitorización bioluminiscente de la supervivencia del injerto en un modelo de transferencia adoptiva de diabetes autoinmune en ratones (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2022-11-18T15:00:00.000+00:00
Duration: 10 min 3 s
Description: Aprenda a monitorizar injertos de células NIT-1 mediante bioluminiscencia en ratones NOD-SCID. Este método minimamente invasivo permite estudiar ataques autoinmunes y terapias para diabetes tipo 1.

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Agradecemos a la Dra. Erica P. Cai y al Dr. Yuki Ishikawa por desarrollar el método descrito en este protocolo (ver ref. 11). La investigación en los laboratorios de S.K. y P.Y. está respaldada por subvenciones de los Institutos Nacionales de Salud (NIH) (R01DK120445, P30DK036836), JDRF, el Instituto de Células Madre de Harvard y la Fundación Beatson. T.S. fue apoyado por una beca postdoctoral del Instituto Nacional de Diabetes y Enfermedades Digestivas y Renales (NIDDK) (T32 DK007260-45), y K.B. fue apoyado en parte por una beca de la Fundación Mary K. Iacocca.

<ol><li>Katsarou, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Type+1+diabetes+mellitus%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Reviews+Disease+Primers%22%5BJournal%5D)">Type 1 diabetes mellitus.</a> Nature Reviews Disease Primers. 3, 17016(2017).</li>
<li>Shapiro, A. M., Pokrywczynska, M., Ricordi, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Clinical+pancreatic+islet+transplantation%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Reviews+Endocrinology%22%5BJournal%5D)">Clinical pancreatic islet transplantation.</a> Nature Reviews Endocrinology. 13 (5), 268-277 (2017).</li>
<li>Pagliuca, F. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Generation+of+functional+human+pancreatic+beta+cells+in+vitro%5BTitle%5D)+AND+%22Cell%22%5BJournal%5D)">Generation of functional human pancreatic beta cells in vitro.</a> Cell. 159 (2), 428-439 (2014).</li>
<li>Russ, H. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Controlled+induction+of+human+pancreatic+progenitors+produces+functional+beta-like+cells+in+vitro%5BTitle%5D)+AND+%22EMBO+Journal%22%5BJournal%5D)">Controlled induction of human pancreatic progenitors produces functional beta-like cells in vitro.</a> EMBO Journal. 34 (13), 1759-1772 (2015).</li>
<li>Rezania, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Reversal+of+diabetes+with+insulin-producing+cells+derived+in+vitro+from+human+pluripotent+stem+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Biotechnology%22%5BJournal%5D)">Reversal of diabetes with insulin-producing cells derived in vitro from human pluripotent stem cells.</a> Nature Biotechnology. 32 (11), 1121-1133 (2014).</li>
<li>Vertex Announces Positive Day 90 Data for the First Patient in the Phase 1_2 Clinical Trial Dosed With VX-880, a Novel Investigational Stem Cell-Derived Therapy for the Treatment of Type 1 Diabetes. Businesswire. , Available from: 
 <a target="_blank" href="https://www.businesswire.com/news/home/20211018005226/en/Vertex-Announces-Positive-Day-90-Data-for-the-First-Patient-in-the-Phase-12-Clinical-Trial-Dosed-With-VX-880-a-Novel-Investigational-Stem-Cell-Derived-Therapy-for-the-Treatment-of-Type-1-Diabetes">https://www.businesswire.com/news/home/20211018005226/en/Vertex-Announces-Positive-Day-90-Data-for-the-First-Patient-in-the-Phase-12-Clinical-Trial-Dosed-With-VX-880-a-Novel-Investigational-Stem-Cell-Derived-Therapy-for-the-Treatment-of-Type-1-Diabetes</a> (2021).</li>
<li>Gamble, A., Pepper, A. R., Bruni, A., Shapiro, A. M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+journey+of+islet+cell+transplantation+and+future+development%5BTitle%5D)+AND+%22Islets%22%5BJournal%5D)">The journey of islet cell transplantation and future development.</a> Islets. 10 (2), 80-94 (2018).</li>
<li>Pearson, J. A., Wong, F. S., Wen, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+importance+of+the+Non+Obese+Diabetic+%28NOD%29+mouse+model+in+autoimmune+diabetes%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Autoimmunity%22%5BJournal%5D)">The importance of the Non Obese Diabetic (NOD) mouse model in autoimmune diabetes.</a> Journal of Autoimmunity. 66, 76-88 (2016).</li>
<li>Hamaguchi, K., Gaskins, R. H., Leiter, E. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((NIT-1%2C+a+pancreatic+%CE%B2-cell+line+established+from+a+transgenic+NOD%2FLt+mouse%5BTitle%5D)+AND+%22Diabetes%22%5BJournal%5D)">NIT-1, a pancreatic β-cell line established from a transgenic NOD/Lt mouse.</a> Diabetes. 40 (7), 842-849 (1991).</li>
<li>Christianson, S. W., Shultz, L. D., Leiter, E. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Adoptive+transfer+of+diabetes+into+immunodeficient+NOD-scid%2Fscid+mice%3A+Relative+contribution+of+CD4%2B+and+CD8%2B+T-cells+from+diabetogenic+versus+prediabetic+NOD.NON-Thy1a+donors%5BTitle%5D)+AND+%22Diabetes%22%5BJournal%5D)">Adoptive transfer of diabetes into immunodeficient NOD-scid/scid mice: Relative contribution of CD4+ and CD8+ T-cells from diabetogenic versus prediabetic NOD.NON-Thy1a donors.</a> Diabetes. 42 (1), 44-55 (1993).</li>
<li>Cai, E. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Genome-scale+in+vivo+CRISPR+screen+identifies+RNLS+as+a+target+for+beta+cell+protection+in+type+1+diabetes%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Metabolism%22%5BJournal%5D)">Genome-scale in vivo CRISPR screen identifies RNLS as a target for beta cell protection in type 1 diabetes.</a> Nature Metabolism. 2 (9), 934-945 (2020).</li>
<li>Parent, A. V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Selective+deletion+of+human+leukocyte+antigens+protects+stem+cell-derived+islets+from+immune+rejection%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Reports%22%5BJournal%5D)">Selective deletion of human leukocyte antigens protects stem cell-derived islets from immune rejection.</a> Cell Reports. 36 (7), 109538(2021).</li>
<li>Brehm, M. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lack+of+acute+xenogeneic+graft-versus-host+disease%2C+but+retention+of+T-cell+function+following+engraftment+of+human+peripheral+blood+mononuclear+cells+in+NSG+mice+deficient+in+MHC+class+I+and+II+expression%5BTitle%5D)+AND+%22FASEB+Journal%22%5BJournal%5D)">Lack of acute xenogeneic graft-versus-host disease, but retention of T-cell function following engraftment of human peripheral blood mononuclear cells in NSG mice deficient in MHC class I and II expression.</a> FASEB Journal. 33 (3), 3137-3151 (2019).</li>
<li>Abdulreda, M. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In+vivo+imaging+of+type+1+diabetes+immunopathology+using+eye-transplanted+islets+in+NOD+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Diabetologia%22%5BJournal%5D)">In vivo imaging of type 1 diabetes immunopathology using eye-transplanted islets in NOD mice.</a> Diabetologia. 62 (7), 1237-1250 (2019).</li>
</ol>

Los autores declaran que no tienen conflictos de intereses.

La DT1 es una enfermedad devastadora para la que actualmente no existe cura. La terapia de reemplazo de células beta ofrece un tratamiento prometedor para los pacientes con esta enfermedad, pero la barrera crítica para esta estrategia es el potencial de ataque autoinmune recurrente contra las células beta trasplantadas. La ingeniería genética de las células SC-beta para reducir su visibilidad o susceptibilidad inmune es una posible solución a este problema. Aquí se describe un protocolo para obtener imágenes no invasivas...

La diabetes tipo 1 (DT1) es causada por la destrucción autoinmune de las células beta productoras de insulina del páncreas. La pérdida de masa de células beta resulta en deficiencia de insulina e hiperglucemia. Los pacientes con DT1 dependen de múltiples inyecciones diarias de insulina exógena y experimentan episodios de hiperglucemia e hipoglucemia graves a lo largo de sus vidas. Las complicaciones relacionadas con estos episodios incluyen retinopatía diabética, disminución de la función renal y neuropatía1.
Las inyecciones de insulina son un tratamiento, pero no una cura para la DT1. Sin embargo, reemplazar la masa de células beta perdidas tiene el potencial de revertir la enfermedad al permitir que los pacientes produzcan su propia insulina. Sin embargo, el suministro de islotes donantes cadavéricos es limitado2. Los islotes derivados de células madre (islotes SC) pueden proporcionar un suministro prácticamente ilimitado de células beta para trasplante. Varios grupos han demostrado que las células madre embrionarias humanas (ESC) y las células madre pluripotentes inducidas (iPSC) pueden diferenciarse para generar células similares a beta funcionales 3,4,5. Los datos prometedores de los primeros ensayos clínicos indican que estas células mantienen su función después del trasplante y pueden permitir que los pacientes se vuelvan independientes de la insulina6. Sin embargo, se requiere inmunosupresión crónica, lo que aumenta su susceptibilidad al cáncer y la infección. Además, los agentes inmunosupresores pueden ser citotóxicos para los injertos a largo plazo7. Para eliminar la necesidad de inmunosupresión, los islotes SC pueden modificarse genéticamente para protegerlos de la autoinmunidad recurrente, así como de la aloinmunidad después del trasplante.
La investigación con células madre es muy exigente en costos y mano de obra. Las líneas celulares de ratón y los modelos animales son herramientas útiles para la identificación inicial y validación experimental de estrategias para proteger las células trasplantadas de la autoinmunidad. El ratón NOD desarrolla diabetes autoinmune espontánea con muchas similitudes con la DT1 humana8, y la línea celular de insulinoma NIT-1 comparte un fondo genético con esta cepa de ratón9. La diabetes puede ser transferida adoptivamente a la cepa de ratón NOD-scid inmunodeficiente relacionada a través de la inyección de esplenocitos diabéticos de ratones NOD para sincronizar temporalmente el inicio de la diabetes en ratones experimentales replicados10. Este modelo se puede utilizar para identificar objetivos genéticos de forma relativamente rápida y económica para su posterior validación en islotes SC. Recientemente, el método se aplicó para identificar y validar RNLS, un objetivo que se encontró que protege los islotes humanos primarios de la autoinmunidad in vivo y los islotes derivados de iPSC del estrés de las células beta in vitro11. Aquí se describe un protocolo sencillo para trasplantar células NIT-1 genéticamente modificadas y monitorear de forma no invasiva su supervivencia en un modelo de transferencia adoptiva de diabetes autoinmune en ratones.

<table><tbody><tr><td>0,05% Tripsina, 0,53 mM EDTA</td><td>Corning</td><td>25-052-CI</td><td></td></tr><tr><td>293FT</td><td>Invitrogen</td><td>R70007</td><td>Aislado clonal de crecimiento rápido y altamente transfectable derivado de células renales embrionarias humanas transformadas con el antígeno T grande SV40</td></tr><tr><td>Tampón de lisado ACK</td><td>Gibco</td><td>A10492-01</td><td></td></tr><tr><td>Almohadillas de preparación con alcohol, 70% de alcohol isopropílico</td><td>Amazon/Ever Ready First Aid B08NWF31DX</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Jeringa BD 5ml Punta Luer-Lok BD 309646</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Aguja BD PrecisionGlide 26G x 5/8 (0,45 mm x 16 mm) Sub-Q</td><td>BD</td><td>BD 305115</td><td></td></tr><tr><td>BD 1 mL Jeringa TB Punta deslizante</td><td>BD</td><td>309659</td><td></td></tr><tr><td>Blasticidina S HCl</td><td>Corning</td><td>&nbsp; 30-100-RB</td><td></td></tr><tr><td>Colador de células premium SureStrain, 70 &micro; m, estéril</td><td>Southern Labware</td><td>C4070</td><td>O use un filtro estéril similar con un tamaño de poro de 40-70um</td></tr><tr><td>Contador de células automatizado CellDrop</td><td>Denovix</td><td>CellDrop BF-PAYG</td><td>O use un dispositivo de contador de células similar</td></tr><tr><td>Corning 100 mL Solución de penicilina-estreptomicina, 100x</td><td>Corning</td><td>30-002-CI</td><td></td></tr><tr><td>Pipetas de aspiración desechables, poliestireno, estériles, capacidad = 2 mL</td><td>VWR</td><td>414004-265</td><td>O use una pipeta de aspiración</td></tr><tr><td>similar D-Luciferina, Sal de Potasio, Grado de Biología Molecular, Polvo, >99%</td><td>Goldbio</td><td>LUCK-100</td><td></td></tr><tr><td>DMEM, alto contenido de glucosa, piruvato, sin glutamina</td><td>Tubos Gibco</td><td>10313039</td><td></td></tr><tr><td>Falcon BD, 50 mL</td><td>Fisher Scientific</td><td>14-959-49A</td><td></td></tr><tr><td>Suero fetal bovino</td><td>Gibco</td><td>10437-028</td><td></td></tr><tr><td>Pinzas premium para pañuelos de papel, 1 x 2 dientes 5 pulgadas, German Steel</td><td>Fisher Scientific</td><td>13-820-074</td><td></td></tr><tr><td>Tira reactiva de glucosa en orina</td><td>California Pet Pharmacy</td><td>u-tsg100</td><td>O use una tira reactiva similar para mediciones de glucosa en orina/sangre</td></tr><tr><td>GlutaMAX&ndash; 1 (100x)</td><td>Gibco</td><td>35050-061</td><td></td></tr><tr><td>Lámpara de calefacción infrarroja</td><td>Cole Parmer</td><td>03057-00</td><td>O use una lámpara infrarroja similar&nbsp;</td></tr><tr><td>Jeringa de insulina 0,5 mL, U-100 29 G 0,5 en</td><td>Becton Dickinson</td><td>309306</td><td></td></tr><tr><td>Isoflurano, USP</td><td>Piramal Critical Care</td><td>6679401725</td><td></td></tr><tr><td>IVIS Spectrum sistema de imagen in vivo</td><td>Perkin Elmer</td><td></td><td>124262 Instrumento para la recogida no invasiva de imágenes bioluminiscentes de células trasplantadas Software de</td></tr><tr><td>análisis de imágenes vivas</td><td>Perkin Elmer</td><td>128113</td><td>Software para recoger y cuantificar la señal bioluminiscente</td></tr><tr><td>Tubos de microcentrífuga seal-rite, 1,5 mL</td><td>USA Scientific</td><td>1615-5510</td><td>O utilice tubos de microcentrífuga estériles similares</td></tr><tr><td>NIT-1</td><td>ATCC</td><td>CRL-2055</td><td>Línea de beta-celll pancreática derivada de ratones NOD/Lt</td></tr><tr><td>NOD. Cg-Prkdcscid/J</td><td>El Laboratorio Jackson</td><td>001303</td><td>Ratones homocigotos para la mutación espontánea de inmunodeficiencia combinada severa&nbsp; Prkdcscid, comúnmente conocido como&nbsp; Las IDCG se caracterizan por la ausencia de linfocitos T y B funcionales, linfopenia, hipogammaglobulinemia y un microambiente hematopoyético normal.</td></tr><tr><td>NOD/ShiLtJ</td><td>The Jackson Laboratory 001976</td><td></td><td>La cepa de ratones NOD/ShiLtJ (comúnmente llamada NOD) es un modelo poligénico para la diabetes autoinmune tipo 1</td></tr><tr><td>PBS, pH 7.4</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>10010031</td><td>Sin calcio, sin magnesio, sin rojo de fenol</td></tr><tr><td>pCMV-VSV-G</td><td>Addgene</td><td>8454</td><td></td></tr><tr><td>pLenti-luciferasa</td><td>blast Hecho en casa</td><td>Plásmido disponible a pedido</td><td>Ver Archivo Suplementario 1</td></tr><tr><td>pMD2.G</td><td>Addgene</td><td>12259</td><td></td></tr><tr><td>pMDLg/pRRE</td><td>Addgene</td><td>12251</td><td></td></tr><tr><td>Polietilenimina, Lineal, MW 25,000, Grado de Transfección (PEI 25K)</td><td>Fisher Scientific</td><td>NC1014320</td><td></td></tr><tr><td>pRSV-Rev</td><td>Addgene</td><td>12253</td><td></td></tr><tr><td>Restrictor para roedores, estilo escoba redondo 1 en</td><td>Fisher Scientific</td><td>01-288-32A</td><td></td></tr><tr><td>Tijeras, de punta afilada</td><td>Fisher Scientific</td><td>08-940</td><td>O utilice otras tijeras de acero inoxidable de grado quirúrgico</td></tr><tr><td>Placas de cultivo tratadas con cultivo de tejidos</td><td>Millipore Sigma</td><td>CLS430167-20EA</td><td>O utilice otras placas de Petri estériles tratadas con cultivo de células</td></tr><tr><td>Pinzas/Pinzas, punta media de precisión fina</td><td>Fisher Scientific</td><td>12-000-157</td><td></td></tr></tbody></table>

monitorización bioluminiscente de la supervivencia del injerto en un modelo de transferencia adoptiva de diabetes autoinmune en ratones

Bioluminescent Monitoring of Graft Survival in an Adoptive Transfer Model of Autoimmune Diabetes in Mice

La diabetes tipo 1 se caracteriza por la destrucción autoinmune de las células beta productoras de insulina del páncreas. Un tratamiento prometedor para esta enfermedad es el trasplante de células beta derivadas de células madre. Sin embargo, las modificaciones genéticas pueden ser necesarias para proteger las células trasplantadas de la autoinmunidad persistente. Los modelos de ratón diabético son una herramienta útil para la evaluación preliminar de estrategias para proteger las células trasplantadas del ataque autoinmune. Aquí se describe un método mínimamente invasivo para trasplantar e imágenes de injertos celulares en un modelo de transferencia adoptiva de diabetes en ratones. En este protocolo, las células de la línea celular beta pancreática murina NIT-1 que expresan el transgén luciferasa luc2 se trasplantan por vía subcutánea en ratones inmunodeficientes diabéticos no obesos (NOD) inmunodeficientes combinados graves (scid). Estos ratones se inyectan simultáneamente por vía intravenosa con esplenocitos de ratones NOD espontáneamente diabéticos para transferir la autoinmunidad. Los injertos se visualizan a intervalos regulares a través de imágenes bioluminiscentes no invasivas para monitorear la supervivencia celular. La supervivencia de las células mutantes se compara con la de las células de control trasplantadas en el mismo ratón.

En la figura 1 se describe una descripción general del protocolo. Se puede comparar la supervivencia de dos líneas celulares, como un mutante y un control no dirigido, o la supervivencia de una línea celular se puede medir en múltiples grupos de ratones, como los ratones tratados con medicamentos versus los controles tratados con vehículos. La Figura 3A muestra tres ratones hembra NOD-scid de 8 semanas de edad trasplantados con un control no dirigido (izquierda)...

Este protocolo describe un método sencillo y mínimamente invasivo para trasplantar e imágenes de células NIT-1 en ratones inmunodeficientes combinados diabéticos no obesos (NOD) graves desafiados con esplenocitos purificados de ratones NOD espontáneamente diabéticos.

Monitorización bioluminiscente de la supervivencia del injerto en un modelo de transferencia adoptiva de diabetes autoinmune en ratones

Type 1 diabetes is characterized by the autoimmune destruction of the insulin-producing beta cells of the pancreas. A promising treatment for this disease ...

Este protocolo puede ayudar a comprender los mecanismos de protección contra los ataques autoinmunes e identificar objetivos terapéuticos para el reemplazo de células beta en la diabetes tipo uno. La principal ventaja de esta técnica es el costo relativamente bajo, la simplicidad de los métodos de cultivo celular, trasplante e imagen, así como la mínima invasividad de las técnicas de ratón. Las personas que nunca han realizado una inyección en la vena de la cola antes pueden tener dificultades para insertar la aguja en la vena.Solicite una demostración por un experto antes de su primera inyección. Para comenzar, tome el ratón anestesiado y retire el vello de su lado dorsal usando una afeitadora eléctrica con un protector, exponiendo aproximadamente una pulgada por dos pulgadas de la piel. Devuelva el ratón afeitado a la cámara de derribo.Antes del trasplante, transfiera un ratón a la vez desde la cámara a una superficie limpia equipada con un cono nasal de isoflurano y guíe suavemente la cabeza del ratón hacia el cono de la nariz. Limpie el área afeitada con una almohadilla de preparación de alcohol isopropílico para eliminar el vello suelto y desinfectar la piel. A continuación, e

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Investigación

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Biología

Un método de injerto de forma fiable la luciferasa-etiquetados humanos malignos de los nervios periféricos células del tumor de la vaina en el nervio ciático de ratones inmunodeficientes se describe. El uso de imágenes de bioluminiscencia para demostrar establecimiento adecuado de los injertos de tumor y los criterios de segregación aleatoria de los animales en grupos de estudio también se discuten.

Xenotrasplante ortotópico de los Derechos Humanos-luciferasa Tagged células malignas del tumor vaina de nervio periférico para In vivo Pruebas de candidatos a agentes terapéuticos

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La inducción de la enfermedad de injerto contra huésped y<em&gt; En Vivo</em&gt; T Monitoreo Celular Utilizando un modelo murino MHC de concordancia

Este video muestra un modelo ortotópico de cáncer de páncreas que utiliza Matrigel para la administración celular localizada e imágenes de bioluminiscencia in vivo para el monitoreo no invasivo de la progresión tumoral. El modelo ortotópico es adecuado tanto para modelos singénicos como de xenoinjertos y podría utilizarse en ensayos preclínicos para investigar el impacto de nuevas terapias contra el cáncer en el crecimiento del tumor pancreático primario y la metástasis.

Modelo de ratón ortotópico bioluminiscente para cáncer de páncreas: una técnica no invasiva para monitorear la progresión del cáncer en ratones

Este video muestra un método basado en imágenes para visualizar células beta trasplantadas que expresan luciferasa en un ratón diabético inmunodeficiente no obeso. La introducción de esplenocitos de un ratón diabético conduce a la destrucción progresiva de las células beta, confirmada visualmente por la disminución de la luminiscencia después de la introducción del sustrato.

Obtención de imágenes de células beta transgénicas en un ratón inmunodeficiente desafiado con esplenocitos diabéticos

Fuente: Clark, A.J., et al. Imágenes de bioluminiscencia de un modelo animal inmunocompetente para el glioblastoma. J. Vis. Exp. (2016)Este video muestra imágenes de bioluminiscencia para rastrear la progresión del glioblastoma en un modelo de ratón inmunocompetente, utilizando células tumorales que expresan luciferasa y luciferina para cuantificar el crecimiento tumoral de forma no invasiva.

Imágenes de bioluminiscencia de un modelo de ratón inmunocompetente para el glioblastoma

Una mejor comprensión de la biología del cáncer de páncreas es una necesidad vital para permitir el desarrollo de mejores opciones terapéuticas para el tratamiento de cáncer de páncreas. Para hacer frente a esta necesidad, se demuestra un modelo ortotópico de cáncer de páncreas que permite la monitorización no invasiva de la progresión del cáncer...

Modelo ortotópico bioluminiscente de la progresión del cáncer de páncreas

GL261 proporcionan un modelo animal inmunocompetente útil de glioblastoma. Los objetivos de este protocolo son demostrar las técnicas adecuadas para monitorizar el crecimiento tumoral intracraneal mediante imágenes de bioluminiscencia in vivo, y verificar la utilidad de las células GL261 modificadas con luciferasa para el estudio de la inmunología tumoral y los enfoques inmunoterapéuticos para el tratamiento del glioblastoma.

La bioluminiscencia de imágenes de un Modelo inmunocompetentes Animal para Glioblastoma

Aquí utilizamos bioluminiscente, rayos x y emisión de positrones la tomografía/computado tomografía la proyección de imagen para estudiar cómo inhibidor mTOR actividad impactos tumores mieloma engrafted de médula ósea en un modelo de xenoinjerto. Esto permite fisiológicamente relevantes, no invasivo y multimodales análisis del efecto anti-mieloma de tratamientos contra tumores mieloma médula engrafted en vivo.

Proyección de imagen de tomografía multimodal bioluminiscente y emisión positrónica tomografía/computacional de xenoinjertos de médula ósea del mieloma múltiple en ratones NOG

La enfermedad de injerto contra huésped es una complicación importante después del trasplante alogénico de médula ósea. Las células dendríticas desempeñan un papel crítico en la patogénesis de la enfermedad del injerto contra el huésped. El artículo actual describe una nueva plataforma de trasplante de médula ósea para investigar el papel de las células dendríticas en el desarrollo de la enfermedad de injerto contra huésped y el efecto injerto-contra-leucemia.

Plataforma de trasplante de médula ósea para investigar el papel de las células dendríticas en la enfermedad de injerto contra huésped

El objetivo de este protocolo es monitorear continuamente la dinámica del proceso de injerto de islotes pancreáticos humanos y el huésped contribuyente frente a las células del donante. Esto se logra trasplantando islotes humanos en la cámara anterior del ojo (ACE) de un NOD. (Cg)-Gt(ROSA)26Sortm4-Rag2-/-receptor del ratón seguido de imágenes repetidas de 2 fotones.

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Aprenda a monitorizar injertos de células NIT-1 mediante bioluminiscencia en ratones NOD-SCID. Este método minimamente invasivo permite estudiar ataques autoinmunes y terapias para diabetes tipo 1.

Monitorización bioluminiscente de la supervivencia del injerto en un modelo de transferencia adoptiva de diabetes autoinmune en ratones (Video) | JoVE Journal

Monitorización bioluminiscente de la supervivencia del injerto en un modelo de transferencia adoptiva de diabetes autoinmune en ratones

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