Infección de células epiteliales nasales primarias cultivadas en una interfaz aire-líquido para caracterizar las interacciones entre el coronavirus y el huésped humano

Los protocolos descritos aquí abordan cuestiones clave como la cinética de replicación, el tropismo de la célula huésped, la inducción inmunitaria innata y la inducción de citotoxicidad en el epitelio nasal durante las infecciones con coronavirus humanos. Este protocolo permite el estudio de las interacciones del huésped del coronavirus humano en un microambiente organoide que recapitula de cerca las características del epitelio nasal in vivo, incluida su población celular heterogénea y sus funciones mucociliares. Esta técnica se puede aplicar a otros sistemas de cultivo de ALI, como los derivados de la vía aérea inferior.

Además, el sistema se puede utilizar para imitar estados clínicos de enfermedades como las vías respiratorias asmáticas o con fibrosis quística. Crecimiento y diferenciación de la interfase nasal aire-líquido, o cultivos ALI, en transpocillos que tienen una cámara basal y otra apical. Expandir las células nasales humanas disociadas en condiciones sumergidas, después de lo cual, retire el medio de la cámara apical para permitir la diferenciación de los cultivos en una interfaz aire-líquido.