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DOI: 10.3791/64885-v
Roberto Plebani1,2, Alessandra D'Alessandro2, Paola Lanuti2,3, Pasquale Simeone2,3, Massimiliano Cinalli1, Ilaria Righi4, Alessandro Palleschi4,5, Matteo Mucci1,2, Marco Marchisio2,3, Francesco Cappabianca1, Marina Camera6,7, Felice Mucilli1, Mario Romano1,2
1Department of Medical, Oral and Biotechnological Sciences,“G. d’Annunzio” University of Chieti-Pescara, 2Center on Advanced Studies and Technology (CAST),“G. d’Annunzio” University of Chieti-Pescara, 3Department of Medicine and Aging Sciences,University “G. d’Annunzio” of Chieti-Pescara, 4U.O. di Chirurgia Toracica e dei Trapianti di Polmone,Fondazione IRCCS Ca’ Granda - Ospedale Maggiore Policlinico di Milano, 5Dipartimento di Fisiopatologia Medico-Chirurgica e dei Trapianti,Università degli Studi di Milano, 6Department of Pharmaceutical Sciences,Università degli Studi di Milano, 7Unit of Cell and Molecular Biology in Cardiovascular Diseases,Centro Cardiologico Monzino IRCCS
Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.
This study outlines a protocol for isolating pulmonary endothelial cells, which is vital for investigating lung inflammation. The method yields high-purity endothelial cells from both macrovascular and microvascular sources.
Aunque es un desafío, el aislamiento de las células endoteliales pulmonares es esencial para los estudios sobre la inflamación pulmonar. El presente protocolo describe un procedimiento para el aislamiento de alto rendimiento y alta pureza de células endoteliales macrovasculares y microvasculares.
Este protocolo es relevante para el aislamiento de células endoteliales de muestras de tejido o trozos muy pequeños de vasos sanguíneos. La principal ventaja de esta técnica es que se puede reproducir en cualquier laboratorio de investigación y permite obtener una buena pureza de las células endoteliales, incluso a partir de muestras muy pequeñas. Comience a preparar la muestra de parénquima pulmonar lavando las muestras recolectadas en un tubo de 50 mililitros que contenga PBS sin cloruro de calcio y cloruro de magnesio, o PBS menos menos.
Transfiera las muestras a una placa de Petri estéril y córtelas manualmente en pequeños fragmentos de aproximadamente tres a cuatro milímetros usando tijeras quirúrgicas. Para el segmento arterial, lave las muestras recolectadas en un tubo de 50 mililitros que contenga PBS menos menos y transfiéralas a una placa de Petri estéril sin cortar. Para eliminar la mayor parte de la sangre residual, dé dos lavados de PBS menos menos el parénquima pulmonar cortado en cubitos o el segmento de la arteria pulmonar.
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