Name: Preparación de matrices descelularizadas 3D a partir de músculo esquelético fetal de ratón para cultivo celular (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2023-03-03T15:00:00.000+00:00
Duration: 7 min 44 s
Description: Aprende a preparar matrices descelularizadas 3D de músculo esquelético fetal de ratón para cultivar mioblastos C2C12. Este modelo permite estudiar miopatías congénitas y desarrollar nuevas terapias.

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Este trabajo fue financiado por la Asociación Francesa contra las Miopatías (AFM-Téléthon; contrato no. 23049), el proyecto MATRIHEALTH y la unidad de financiación del cE3c UIDB/00329/2020. Nos gustaría agradecer a nuestro donante Henrique Meirelles que eligió apoyar el Proyecto MATRIHEALTH. Este trabajo se benefició de las infraestructuras de la Instalación de Microscopía de la Facultad de Ciencias, un nodo de la Plataforma Portuguesa de BioImagen (referencia PPBI-POCI-01-0145-FEDER-022122), y agradecemos a Luís Marques por su ayuda con la adquisición y procesamiento de imágenes. Finalmente, agradecemos a Marta Palma por el apoyo técnico y a nuestro equipo de investigación por sus generosas contribuciones.

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<li>White, L. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+impact+of+detergents+on+the+tissue+decellularization+process%3A+a+ToF-SIMS+study%5BTitle%5D)+AND+%22Acta+Biomaterialia%22%5BJournal%5D)">The impact of detergents on the tissue decellularization process: a ToF-SIMS study.</a> Acta Biomaterialia. 50, 207-219 (2017).</li>
<li>Nakayama, K. H., Batchelder, C. A., Lee, C. I., Tarantal, A. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Renal+tissue+engineering+with+decellularized+rhesus+monkey+kidneys%3A+age-related+differences%5BTitle%5D)+AND+%22Tissue+Engineering.+Part+A%22%5BJournal%5D)">Renal tissue engineering with decellularized rhesus monkey kidneys: age-related differences.</a> Tissue Engineering. Part A. 17 (23-24), 2891-2901 (2011).</li>
<li>Ma, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Development+and+in+vivo+validation+of+tissue-engineered%2C+small-diameter+vascular+grafts+from+decellularized+aortae+of+fetal+pigs+and+canine+vascular+endothelial+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Cardiothoracic+Surgery%22%5BJournal%5D)">Development and in vivo validation of tissue-engineered, small-diameter vascular grafts from decellularized aortae of fetal pigs and canine vascular endothelial cells.</a> Journal of Cardiothoracic Surgery. 12 (1), 101(2017).</li>
<li>Wu Young, M. Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Decellularized+fetal+matrix+suppresses+fibrotic+gene+expression+and+promotes+myogenesis+in+a+rat+model+of+volumetric+muscle+loss%5BTitle%5D)+AND+%22Plastic+and+Reconstructive+Surgery%22%5BJournal%5D)">Decellularized fetal matrix suppresses fibrotic gene expression and promotes myogenesis in a rat model of volumetric muscle loss.</a> Plastic and Reconstructive Surgery. 146 (3), 552-562 (2020).</li>
</ol>

Los autores no tienen conflictos de intereses que revelar.

La ECM es una red compleja de macromoléculas que está presente en todos los tejidos y desempeña un papel crucial en la regulación del comportamiento y la función celular2. La ECM actúa como un andamio físico para que las células se adhieran y proporciona señales que modulan activamente los procesos celulares como la proliferación, la motilidad, la diferenciación y la apoptosis. Por lo tanto, la formación y el mantenimiento adecuados de la MCE son esenciales tanto para el desarrollo como para la ho...

La matriz extracelular (ECM) es un componente importante de los tejidos, que representa su componente no celular. Esta estructura tridimensional (3D) no solo proporciona soporte físico a las células, sino que también desempeña un papel crucial en los procesos bioquímicos involucrados en el desarrollo de los organismos1. La formación de una ECM específica del tejido ocurre durante el desarrollo, como resultado de las complejas interacciones entre las células y sus nichos, influenciadas por diversos estímulos intra y extracelulares. La ECM es una estructura altamente dinámica que sufre reordenamientos químicos y mecánicos de manera temporal-espacial e impacta directamente en el destino celular2. Una de las características más notables de la ECM es su diversidad funcional, ya que cada ECM tisular muestra una combinación única de moléculas que proporcionan diferentes topologías y propiedades que se adaptan a las células que contiene1.
La señalización y el apoyo de la ECM son cruciales para el desarrollo y la homeostasis, y cuando se interrumpen pueden conducir a múltiples condiciones patológicas 3,4. Un ejemplo es la distrofia congénita deficiente en LAMA2 (LAMA2-CMD), que es la forma más común de distrofia muscular congénita. El gen LAMA2 codifica para la cadena α2 de laminina, que está presente en la laminina 211 y la laminina 221, y cuando está mutada puede conducir a LAMA2-CMD 5. La laminina 211 es la principal isoforma que se encuentra en la membrana basal que rodea las fibras del músculo esquelético. Cuando la laminina 211 es anormal o está ausente, el vínculo entre la membrana basal y las células musculares se interrumpe, lo que lleva a la aparición de la enfermedad6. Los pacientes con LAMA2-CMD muestran un fenotipo de leve a grave dependiendo del tipo de mutación en el gen LAMA2.
Cuando la función de la proteína laminina α2 se ve afectada, los pacientes pueden experimentar hipotonía muscular severa al nacer y desarrollar inflamación crónica, fibrosis y atrofia muscular, lo que lleva a una esperanza de vida reducida. Hasta la fecha, no se han desarrollado tratamientos dirigidos y los enfoques terapéuticos se limitan a aliviar los síntomas de la enfermedad7. Por lo tanto, la comprensión de los mecanismos moleculares subyacentes involucrados en la aparición de esta enfermedad es crucial para el desarrollo de estrategias terapéuticas apropiadas 6,8. Trabajos previos con el ratón dyW 9, un modelo para LAMA2-CMD, sugieren que el inicio de la enfermedad comienza en el útero, específicamente durante la miogénesis fetal10. Una mejor comprensión de cómo surge el defecto de miogénesis fetal sería un cambio de juego en la generación de nuevos enfoques terapéuticos para LAMA2-CMD.
Los sistemas in vitro proporcionan un entorno controlado para estudiar las interacciones célula-célula y célula-ECM, pero los modelos de cultivo 2D carecen de la complejidad de los tejidos nativos. La descelularización de los tejidos produce andamios de ECM acelulares específicos para el tejido y la etapa de desarrollo que imitan con mayor precisión el microambiente celular natural en comparación con los modelos 2D y los andamios diseñados / sintéticos. Las matrices descelularizadas (dECMs) tienen el potencial de preservar las señales moleculares y mecánicas del tejido huésped, convirtiéndolas en mejores modelos alternativos para la comprensión de los procesos in vivo 11.
Existen diversas técnicas, reactivos y condiciones que pueden ser utilizadas para la descelularización12,13. En este estudio, un protocolo de descelularización para el corazón fetal del ratón, descrito por Silva et al.14,15, se adapta al músculo esquelético fetal del ratón y se encuentra que retiene todos los componentes de la ECM probados (laminina α2, lamininas totales, fibronectina, colágeno I y colágeno IV). El protocolo incluye tres pasos: lisis celular por choque osmótico (tampón hipotónico), disolución de la membrana plasmática y disociación de proteínas (dodecil sulfato de sodio al 0,05% [SDS]) y destrucción enzimática del ADN (tratamiento con DNasa). Hasta donde sabemos, este es el primer protocolo establecido para descelularizar el músculo esquelético fetal del ratón.
Para utilizar este sistema 3D in vitro para estudiar LAMA2-CMD, es crucial mantener la cadena α2 de laminina después de la descelularización. Por lo tanto, se implementó un protocolo de optimización donde se probaron diferentes detergentes (SDS y Triton X-100) y concentraciones (0.02%, 0.05%, 0.1%, 0.2% y 0.5%) (datos no mostrados). Se encontró que la opción óptima para la eliminación celular y la preservación de la proteína laminina α2 era 0.05% SDS. Se utilizaron células C2C12, una línea celular de mioblastos bien establecida16,17, para sembrar los dECM. Estas células invaden la dECM, proliferan y se diferencian dentro de estos andamios, sintetizando nuevas proteínas ECM. La producción exitosa de este modelo 3D in vitro ofrece un nuevo enfoque para comprender los procesos moleculares y celulares involucrados en la miogénesis fetal, el inicio de LAMA2-CMD, y puede extenderse a otras enfermedades musculares donde se interrumpe la comunicación entre la ECM y las células del músculo esquelético.

<table><tbody><tr><td>Placa de cultivo celular de 12 pocillos, plana, TC, estéril</td><td>Abdos Labware</td><td>P21021</td><td></td></tr><tr><td>4&prime;,6-diamidino-2-fenilindol diclorhidrato</td><td>Merck</td><td>D8417</td><td></td></tr><tr><td>4&ndash; 20% Mini-PROTEAN TGX Gel prefabricado</td><td>Bio-Rad</td><td>4561093</td><td></td></tr><tr><td>48 pocillos placa de cultivo celular, plana, TC, estéril</td><td>Abdos Labware</td><td>P21023</td><td></td></tr><tr><td>96 pocillos placa de cultivo celular, plana, TC, estéril</td><td>Abdos Labware</td><td>P21024</td><td></td></tr><tr><td>Albúmina de suero bovino, fracción V</td><td>NZYtech</td><td>MB04601</td><td></td></tr><tr><td>BX60 microscopio de fluorescencia</td><td>Olympus</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Cryostat CM1860 UV</td><td>Leica </td><td></td><td></td></tr><tr><td>Dithiothreitol</td><td>ThermoFisher</td><td>R0862</td><td></td></tr><tr><td>DMEM alta glucosa con glutamina estable con piruvato de sodio</td><td>Biowest</td><td>L0103-500</td><td></td></tr><tr><td>DNasa I</td><td>PanReac AppliChem</td><td>A3778</td><td></td></tr><tr><td>DNeasy Blood & Kit de tisú </td><td>Qiagen</td><td>69506</td><td></td></tr><tr><td>Ácido etilendiaminotetraacético (EDTA)</td><td>Merck</td><td>108418</td><td></td></tr><tr><td>Suero fetal bovino</td><td>Biowest</td><td>S1560-500</td><td></td></tr><tr><td>Pipeta de transferencia de punta fina</td><td>ThermoFisher</td><td>15387823</td><td></td></tr><tr><td>Suero de cabra</td><td>Biowest</td><td>S2000-100</td><td></td></tr><tr><td>Hera Guard Flow Cabinet</td><td>Heraeus</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Heracell 150 Incubadora de CO2</td><td>Thermo Scientific</td><td></td><td></td></tr><tr><td>HiMark Proteína preteñida</td><td>Invitrogen</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Estándar Suero de caballo, origen de Nueva Zelanda</td><td>Gibco</td><td>16050122</td><td></td></tr><tr><td>HRP-&alpha;- IgG de conejo</td><td>abcam</td><td>ab205718</td><td></td></tr><tr><td>HRP-&alpha;- IgG de rata</td><td>abcam</td><td>ab205720</td><td></td></tr><tr><td>HRP-&alpha;- Ratón IgG</td><td>abcam</td><td>ab205719</td><td></td></tr><tr><td>ImageJ v. 1.53t</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Verde de metilo</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>67060</td><td></td></tr><tr><td>MM400 Lyser de tejidos</td><td>Retsch</td><td></td><td></td></tr><tr><td>NanoDrop ND-1000 Espectrofotómetro </td><td>ThermoFisher</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Paraformaldehído, 16% c/v aq. soln., libre de metanol</td><td>Alfa Aesar</td><td>043368-9M</td><td></td></tr><tr><td>Penicilina-estreptomicina (100x) </td><td>GRiSP</td><td>GTC05.0100</td><td></td></tr><tr><td>Phalloidin Alexa 488 </td><td>Thermo Fisher Sci.</td><td>A12379</td><td></td></tr><tr><td>Placa de Petri de poliestireno 60x15mm con rejillas de ventilación (estéril)</td><td>Greiner Bio-One</td><td>628161</td><td></td></tr><tr><td>Qubit dsDNA HS</td><td>kit Thermo Scientific</td><td>Q32851</td><td></td></tr><tr><td>Qubit&trade; 3 Fluorómetro</td><td>Invitrogen</td><td>15387293</td><td></td></tr><tr><td>S6E Zoom Microscopio estereoscópico</td><td>Leica</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Sulfato de Dodecilo Sódico</td><td>Merck</td><td>11667289001</td><td></td></tr><tr><td>SuperFrost&reg; Portaobjetos de adherencia Plus</td><td>Thermo Scientific</td><td>631-9483</td><td></td></tr><tr><td>SuperSignal West Pico PLUS Sustrato quimioluminiscente</td><td></td><td></td> Microscopio confocal Thermo Scientific 15626144 <td></td></tr><tr><td>TCS SPE</td><td>Leica </td><td></td><td></td></tr><tr><td>Tris-(hidroximetil) aminometano (Tris base) &ge; 99 %</td><td>VWR Chemicals</td><td>28811.295</td><td></td></tr><tr><td>Triton X-100</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>X100-100ML</td><td></td></tr><tr><td>Solución de azul de tripano, 0,4 %</td><td>Gibco</td><td>15250061</td><td></td></tr><tr><td>tripsina-EDTA (0,05 %) en DPBS (1X)</td><td>GRiSP</td><td>GTC02.0100</td><td></td></tr><tr><td>TWEEN 20 (solución al 50 %)</td><td>Rollo</td> de membrana PVDF-CL ThermoFisher <td>3005</td><td></td></tr><tr><td>WesternBright (0,22 y micro; m)</td><td>Advansta</td><td>L-08024-001</td><td></td></tr><tr><td>&alpha;-Colágeno I</td><td>abcam</td><td>ab21286</td><td></td></tr><tr><td>&alpha;-Colágeno IV</td><td>Millipore</td><td>AB756P</td><td></td></tr><tr><td>&alpha;-Colágeno IV</td><td>Santa Cruz Biotechnology</td><td>sc-398655</td><td></td></tr><tr><td>&alpha;-Fibronectina</td><td>Sigma</td><td>F-3648</td><td></td></tr><tr><td>&alpha;-Laminina &alpha; 2 </td><td>Sigma</td><td>L-0663</td><td></td></tr><tr><td>&alpha;-MHC</td><td>D.S.H.B.</td><td>MF20</td><td></td></tr><tr><td>&alpha;-Sondas moleculares de ratón Alexa 488</td><td></td><td>A11017</td><td></td></tr><tr><td>&alpha;-Sondas moleculares de ratón Alexa 568</td><td></td><td>A11019</td><td></td></tr><tr><td>&alpha;-pan-laminina</td><td>Sigma</td><td>L- 9393</td><td></td></tr><tr><td>&alpha;-fosfo-histona 3</td><td>Merk Millipore</td><td>06-570</td><td></td></tr><tr><td>&alpha;-Sondas</td><td></td> <td>moleculares de Rabbit Alexa 568A21069</td><td></td></tr><tr><td>&alpha;-Sondas moleculares Rabbit Alexa 488</td><td></td><td>A11070</td><td></td></tr><tr><td>&alpha;-Sondas moleculares Rat Alexa 488</td><td></td><td>A11006</td><td></td></tr></tbody></table>

preparación de matrices descelularizadas 3d a partir de músculo esquelético fetal de ratón para cultivo celular

Preparation of 3D Decellularized Matrices from Fetal Mouse Skeletal Muscle for Cell Culture

La matriz extracelular (ECM) juega un papel crucial en proporcionar soporte estructural para las células y transmitir señales que son importantes para diversos procesos celulares. Los modelos de cultivo celular bidimensionales (2D) simplifican en exceso las complejas interacciones entre las células y la ECM, ya que la falta de un soporte tridimensional completo (3D) puede alterar el comportamiento celular, haciéndolos inadecuados para comprender los procesos in vivo . Las deficiencias en la composición de la ECM y las interacciones célula-ECM son contribuyentes importantes a una variedad de enfermedades diferentes. 
Un ejemplo es la distrofia muscular congénita LAMA2 (LAMA2-CMD), donde la ausencia o reducción de laminina funcional 211 y 221 puede conducir a hipotonía severa, detectable en o poco después del nacimiento. Trabajos previos utilizando un modelo de ratón de la enfermedad sugieren que su inicio ocurre durante la miogénesis fetal. El presente estudio tuvo como objetivo desarrollar un modelo 3D in vitro que permitiera el estudio de las interacciones entre las células musculares y la ECM del músculo fetal, imitando el microambiente nativo. Este protocolo utiliza músculos profundos de la espalda diseccionados de fetos de ratón E18.5, tratados con un tampón hipotónico, un detergente aniónico y DNasa. Las matrices descelularizadas resultantes (dECM) retuvieron todas las proteínas ECM probadas (laminina α2, lamininas totales, fibronectina, colágeno I y colágeno IV) en comparación con el tejido nativo. 
Cuando los mioblastos C2C12 se sembraron sobre estos dECM, penetraron y colonizaron los dECM, lo que apoyó su proliferación y diferenciación. Además, las células C2C12 produjeron proteínas ECM, contribuyendo a la remodelación de su nicho dentro de las dECM. El establecimiento de esta plataforma in vitro proporciona un nuevo enfoque prometedor para desentrañar los procesos involucrados en la aparición de LAMA2-CMD, y tiene el potencial de adaptarse a otras enfermedades del músculo esquelético donde las deficiencias en la comunicación entre la ECM y las células del músculo esquelético contribuyen a la progresión de la enfermedad.

El objetivo del protocolo de descelularización es producir dECMs que se asemejen mucho a la composición del tejido nativo. Para determinar la efectividad del proceso de descelularización, se emplearon varios métodos, incluido el examen de la morfología del tejido, la medición de los niveles de ADN, la tinción de F-actina y el análisis de componentes clave de la ECM utilizando inmunohistoquímica y técnicas de western blotting. Específicamente, se analizaron cinco componentes principales de ECM de los tejidos del músculo e...

En este trabajo, se optimizó un protocolo de descelularización para obtener matrices descelularizadas del músculo esquelético fetal del ratón. Los mioblastos C2C12 pueden colonizar estas matrices, proliferar y diferenciarse. Este modelo in vitro se puede utilizar para estudiar el comportamiento celular en el contexto de enfermedades del músculo esquelético, como las distrofias musculares.

Preparación de matrices descelularizadas 3D a partir de músculo esquelético fetal de ratón para cultivo celular

The extracellular matrix (ECM) plays a crucial role in providing structural support for cells and conveying signals that are important for various ...

Hasta donde sabemos, este protocolo es el primero en producir matrices descelularizadas a partir del músculo esquelético fetal, proporcionando un enfoque novedoso para estudiar las miopatías que comienzan a desarrollarse en el útero. Este protocolo genera métricas específicas de desarrollo y tejido que se pueden utilizar para estudiar el comportamiento de las células musculares y las interacciones con la matriz extracelular en un entorno controlado. LAMA2-CMD es una distrofia muscular congénita que comienza a manifestarse al nacer.Este modelo puede ayudar a desentrañar los mecanismos de patrón involucrados en su inicio y conducir a nuevas terapias objetivo. Este protocolo se puede adaptar a diferentes tejidos y modelos de enfermedades. Se pueden lograr diferentes niveles de complejidad dependiendo de la matriz y los tipos de células, lo que demuestra la versatilidad del sistema.Este es un protocolo muy sencillo. La parte más difícil es la recolección y el manejo de las muestras. Pero, con la práctica, las habilidades técnicas se pueden mejorar fácilmente.Comience transfiriendo un feto sacrificado a la vez a una placa de Petri que contenga PBS helado. Después de extirpar la piel y l

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Research

Investigación

JoVE Journal

Developmental Biology

Biología del Desarrollo

Estos detalles del trabajo de la preparación de la fibrina andamios 3D para el cultivo y diferenciación de las células madre plutipotent. Tales andamios puede ser utilizado para cribar los efectos de diversos compuestos biológicos sobre el comportamiento de células madre, así como modificado para contener los sistemas de suministro de fármacos.

Preparación de fibrina Andamios 3D para Aplicaciones madre para cultivo celular

Tejido muscular Engineered tiene un gran potencial en medicina regenerativa, como modelo de la enfermedad y también como una fuente alternativa para la carne. Aquí se describe la ingeniería de una construcción de músculo, en este caso a partir de células progenitoras de mioblastos de ratón y la estimulación por impulsos eléctricos.

Los tejidos de ingeniería músculo esquelético de células mioblastos murinos progenitoras y aplicación de estimulación eléctrica

Hasta la fecha, los defectos de tejido grueso se reconstruyen típicamente mediante la aplicación de colgajos de tejido autólogo o tejidos de ingeniería. En este protocolo, presentamos un nuevo método para diseñar un colgajo de tejido vascularizado con un pedículo autólogo, para que sirva como sustituto de los colgajos autólogos.

Diseñado vascularizado colgajo de músculo

En estos estudios, se entrega metodología para la novela, andamios cardiacos neonatales, murinos para su uso en estudios de regeneración.

Los andamios neonatal cardíaca: Matrices novedosos para Estudios regenerativos

La matriz extracelular específica del tejido (ECM) es un mediador clave de la función celular. Este artículo describe métodos para la síntesis de espumas y microportadores que son estables en cultivo sin la necesidad de reticulación química para aplicaciones en 3D avanzados en modelos de cultivo celular in vitro o como matrices biodegradables pro-regenerativas puros ECM-derivado.

La fabricación de espumas y microportadores derivados de la matriz extracelular como específica de tejido de cultivo celular y las plataformas de entrega

La matriz extracelular cardiaca (ECM) es una compleja red de moléculas que orquestar procesos clave en los tejidos y órganos mientras aguantando remodelación fisiológica durante toda la vida. Descelularización estandarizado del corazón fetal y adulto permite estudios experimentales comparativos de ambos tejidos en un contexto 3D mediante la captura de arquitectura original y propiedades biomecánicas.

Descelularización comparable de explantes de tejido cardíaco Fetal y adulto como 3D-como plataformas para estudios In Vitro

Este protocolo describe la producción de filamento de policaprolactona (PCL) con microesferas de ácido (PLA) de poliláctico incrustados que contienen matrices decellularized (DM) para la impresión 3D de ingeniería construcciones de tejidos estructurales.

Novedoso proceso para la impresión 3D Decellularized Matrices

El objetivo de este protocolo es la producción de fibras de la matriz extracelular todo destinados a la reparación de la herida que son adecuados para la evaluación preclínica como parte de un implante de andamio regenerativa. Estas fibras se producen por la cultura de los fibroblastos en las membranas de fibra hueca y extraídas por disolución de las membranas.

Producción de fibras de la matriz extracelular mediante cultivo de células de membrana de fibra hueca sacrificio

La identificación precisa de las células progenitoras fibroadipogénicas (FAP) y las células madre musculares (MuSC) es fundamental para estudiar su función biológica en condiciones fisiológicas y patológicas. Este protocolo proporciona pautas para el aislamiento, purificación y cultivo de FAP y MuSC de músculos de ratones adultos.

FACS-aislamiento y cultivo de progenitores fibroadipogénicos y células madre musculares a partir de músculo esquelético de ratón imperturbable y lesionado

Este protocolo proporciona métodos para generar tejidos cardíacos y esqueléticos diseñados en 3D y describe su uso en modalidades preclínicas de detección de fármacos. Los métodos descritos utilizan un sistema de detección magnética para facilitar la evaluación simultánea de 24 tejidos en paralelo.

Pruebas preclínicas de fármacos en tejidos musculares escalables diseñados en 3D

Este protocolo describe la fabricación de construcciones óseas 3D utilizando osteocitos humanos incrustados en hidrogelatinas metacriladas (GelMA) suplementadas con matriz extracelular descelularizada. El método es de bajo coste, escalable y compatible con equipos básicos de laboratorio, proporcionando una plataforma traslacional para estudiar los procesos de enfermedad musculoesquelética.

Una plataforma de cultivo óseo 3D que utiliza osteocitos humanos y matriz extracelular descelularizada para modelar enfermedades musculoesqueléticas

Aprende a preparar matrices descelularizadas 3D de músculo esquelético fetal de ratón para cultivar mioblastos C2C12. Este modelo permite estudiar miopatías congénitas y desarrollar nuevas terapias.

Preparación de matrices descelularizadas 3D a partir de músculo esquelético fetal de ratón para cultivo celular

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