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DOI: 10.3791/65184-v
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Aquí, presentamos una compilación de ensayos para medir directamente la función mitocondrial en células de mamíferos independientemente de su capacidad para consumir oxígeno molecular.
Nuestra investigación se centra en cómo las mitocondrias detectan y se adaptan a los factores estresantes metabólicos. Un factor estresante metabólico clave es la hipoxia, que ocurre cuando las células carecen de oxígeno. Estamos desarrollando mejores ensayos para estudiar la función mitocondrial en ambientes con poco oxígeno.
Se empleó espectrometría de masas de mayor resolución para estudiar los niveles de metabolitos celulares y tisulares. Utilizamos estudios de rastreo de isótopos estables para rastrear el destino de metabolitos específicos y descubrir nuevas vías metabólicas relevantes para la fisiología de mamíferos sanos y enfermos. El grupo ha descubierto que las mitocondrias de los mamíferos pueden mantener funciones críticas en ambientes con poco oxígeno.
Mecánicamente, emplean fumarato como un cetro electrónico alternativo para la cadena de transporte de electrones. Este protocolo recopila varios ensayos que los investigadores pueden usar para evaluar mejor la función mitocondrial en células de mamíferos. Es importante destacar que estos protocolos se pueden utilizar para estudiar la función mitocondrial en hipoxia, ya que los experimentos clásicos de respirometría no serán suficientes.
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