Aislamiento y cultivo de macrófagos sinoviales primarios y fibroblastos a partir de tejido murino de artritis

El presente estudio proporciona un protocolo modificado para aislar macrófagos sinoviales y fibroblastos del tejido de artritis inflamatoria murina.

Se requieren ensayos basados en células para aclarar las funciones moleculares. En los estudios de artritis, el método para aislar las células primarias está bien establecido en los fibroblastos sinoviales, pero no en los macrófagos sinoviales. Por lo tanto, desarrollamos un protocolo para aislar y expandir tanto los macrófagos sinoviales como los fibroblastos sinoviales a partir de modelos de artritis.

Los fibroblastos sinoviales primarios del tejido de la artritis murina han contribuido a la elucidación de los mecanismos moleculares en la patogénesis de la artritis. Por otro lado, los macrófagos derivados de la médula ósea, los macrófagos derivados de monocitos sanguíneos y las líneas celulares de macrófagos se han utilizado a menudo como recursos de macrófagos para estudios de artritis. Dado que los macrófagos pueden adquirir funciones asociadas con su microambiente, las fuentes generales de macrófagos pueden carecer de respuestas específicas para el tejido de la artritis.

Además, es difícil obtener suficientes células sinoviales mediante la clasificación, ya que la membrana sinovial murina es un tejido muy pequeño incluso en modelos de artritis. En el método anterior para aislar fibroblastos sinoviales, se descartaron los macrófagos sinoviales. Además, se informó de un método para aislar y expandir los macrófagos residentes de algunos órganos.

Por lo tanto, los protocolos existentes se modificaron en combinación para aislar y expandir tanto los macrófagos sinoviales como los fibroblastos sinoviales del tejido de la artritis murina. Este método puede aislar tanto macrófagos como fibroblastos de la membrana sinovial inflamatoria con alta pureza, y es simple y reproducible. Este método permite la expansión de macrófagos sinoviales en cocultivo con fibroblastos sinoviales.

Además, el método proporciona una ventaja, ya que los fibroblastos sinoviales se pueden usar con menos pasajes. El protocolo establecido sería una ventaja para la elucidación de los mecanismos patológicos en la artritis reumatoide.