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Agrobacterium tumefaciens-Ingeniería genética mediada por microalgas verdes, Chlorel...
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JoVE Journal Bioengineering
Agrobacterium tumefaciens-Mediated Genetic Engineering of Green Microalgae, Chlorella vulgaris

Agrobacterium tumefaciens-Ingeniería genética mediada por microalgas verdes, Chlorella vulgaris

Full Text
4,735 Views
08:00 min
October 27, 2023

DOI: 10.3791/65382-v

M. Reza Roushan1, Chuchi Chen1, Parisa Ahmadi1, Valerie C. A. Ward1

1Department of Chemical Engineering,University of Waterloo

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Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

Este protocolo describe la utilización de la transformación mediada por Agrobacterium tumefaciens (AMT) para integrar genes de interés en el genoma nuclear de la microalga verde Chlorella vulgaris, lo que conduce a la producción de transformantes estables.

El alcance de la investigación se centró en el desarrollo y optimización de un protocolo para la transformación de chlorella vulgaris. Nuestro objetivo fue crear una cepa transgénica estable de chlorella vulgaris utilizando agrobacterium tumefaciens y un plásmido específico, pCAMBIA1302, que les permitiera insertar genes de interés y potencial para aplicaciones biotecnológicas. Ingeniería metabólica y biología sintética, microscopía e imágenes, edición de genes CRISPR-Cas9, bioinformática, modelado computacional, teledetección e imágenes satelitales, nanotecnología, bioprocesamiento y procesamiento posterior.

Este estudio presenta un protocolo optimizado de transformación de medios de agrobacterium tumefaciens para la microalga chlorella vulgaris utilizando un plásmido y un marcador específicos. Sienta las bases para la mejora de las microalgas mediante la tecnología, superando las limitaciones anteriores en herramientas de transformación fiables para C. vulgaris.

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Transformación mediada por Agrobacterium tumefaciens Ingeniería genética Microalgas verdes Chlorella vulgaris Protocolo AMT Gen reportero Proteína verde fluorescente (mGFP5) Marcador de resistencia a antibióticos Higromicina B Selección de mutantes Medios de acetato de tris (TAP) Transformación estable Cassette de ADN-T Colonias transgénicas PCAMBIA1302 vector de expresión de plantas

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