Métodos para la electroporación y confirmación de transformación en Limosilactobacillus reuteri DSM20016

L.Reuteri, y específicamente la cepa, DSM20016 es un comensal intestinal humano robusto y natural, con una gran promesa para la administración terapéutica y la detección de enfermedades en todo el tracto gastrointestinal. Este trabajo ayudará a posicionar DSM20016 como un chasis de biología sintética para ese tipo de aplicaciones. Los lactobacilales no tienen un organismo modelo específico.

Las especies preferidas existen, pero generalmente se eligen con un sesgo hacia objetivos de investigación particulares. La variación dentro de la familia bacteriana ha llevado a protocolos fragmentados, algunos con iteraciones de modificaciones que se remontan a través de publicaciones. Es muy difícil para las personas que comienzan filtrar exactamente lo que es y no es útil.

Existe un documento para la transformación de DSM20016, pero no es moderno. Existen protocolos modernos para otros miembros de la familia Lactobacillales, pero no son DSM20016. Aquí nos esforzamos por proporcionar un conjunto de protocolos fácil de usar, centralizado, modernizado y completo para DSM20016 electroporación.

Este conjunto de protocolos ofrece una modernización sustancial con respecto al protocolo de exploración DSM20016 anterior, y aclara algunos hilos colgantes, además de enfatizar partes que antes eran menos claras. El conjunto de protocolos también es completo, y específicamente para DSM20016, una cepa para la cual otros protocolos no DSM20016 no son totalmente compatibles. Uno de nuestros principales objetivos es utilizar microbios como sensores y sistemas de entrega de bajo costo.

Estamos trabajando con expertos en enfermedades intestinales para usar DSM20016 para detectar las condiciones en el tracto gastrointestinal y administrar terapias según sea necesario.