Inducir pseudoembarazo en ratones hembra sin necesidad de machos vasectomizados antes de la transferencia embrionaria no quirúrgica o la inseminación artificial
7 de julio de 2023
El método de manipulación cervical presentado puede inducir pseudoembarazo en ratones sin necesidad de reproductoras con machos vasectomizados. La inducción del pseudoembarazo es necesaria para el éxito de la transferencia embrionaria no quirúrgica y de la inseminación artificial no quirúrgica, que también se presentan.
Nuestro principal foco de investigación es el desarrollo de técnicas de reproducción asistida que aporten mejoras y reducciones acordes con las 3R de la experimentación animal. Hemos desarrollado procedimientos no quirúrgicos de transferencia embrionaria e inseminación artificial no quirúrgica para ratones y un procedimiento no quirúrgico de transferencia embrionaria para ratas. Con la adición del procedimiento de manipulación cervical para proporcionar hembras pseudo preñadas, creamos mejoras de las 3R y reproducción asistida en roedores.
Los protocolos descritos aquí proporcionan métodos simplificados para la recuperación de cachorros utilizando métodos de transferencia de embriones no quirúrgicos e inseminación artificial en ratones. El protocolo de manipulación cervical proporciona un refinamiento de los procedimientos que producen receptoras pseudo embarazadas para técnicas de reproducción asistida. Reduce el número de hembras necesarias como receptoras pseudo embarazadas y elimina la necesidad de machos vasectomizados.
Los protocolos descritos aquí se pueden utilizar para la gestión estratégica del vivero. Los protocolos se pueden utilizar con criopreservación, fertilización in vitro, rederivación, producción de cohortes de edad y producción de animales modificados genéticamente.
Descripción general
Este estudio introduce un método de manipulación cervical que induce pseudogestación en ratones, lo cual es necesario para una transferencia de embriones y una inseminación artificial exitosas sin necesidad de cirugía. Este avance reduce la necesidad de cría y mejora el bienestar animal al adherirse a los principios de las 3R.
Componentes clave del estudio
Área de investigación
- Técnicas de reproducción asistida
- Bienestar animal y las 3R
- Modelos de roedores
Antecedentes
- Desafíos actuales en los métodos de cría para hembras pseudogestantes
- Importancia de reducir el número de animales de cría
- Necesidad de procedimientos eficientes en la transferencia de embriones en roedores
Métodos utilizados
- Manipulación cervical para inducir pseudogestación
- Ratones (cepa CD1)
- Técnicas de transferencia de embriones y de inseminación artificial sin necesidad de cirugía
Resultados principales
- La manipulación cervical crea con éxito hembras pseudogestantes sin la necesidad de machos vasectomizados.
- Los protocolos optimizados mejoran la recuperación de crías mediante técnicas no quirúrgicas.
- Los métodos son valiosos para la criopreservación, la fertilización in vitro y la producción de animales genéticamente modificados.
Conclusiones
- El estudio demuestra un método eficaz para producir hembras de ratón pseudogestantes, mejorando la reproducción asistida.
- Los hallazgos son significativos para mejorar la eficiencia en la gestión de vivarios y proporcionar mejores estándares de bienestar en la investigación.
Preguntas frecuentes
Executive Industry Relevance
Efficient induction of pseudopregnancy in female mice is critical for scalable, reproducible assisted reproduction workflows in preclinical research. The standardized cervical manipulation technique eliminates the need for vasectomized males, streamlining vivarium operations and supporting the 3Rs principles. This advancement enhances the reliability and predictability of generating pseudopregnant recipients for embryo transfer and artificial insemination, directly impacting resource allocation and experimental throughput.
Strategic Applications in Biopharma R&D
Early Discovery & Target Validation
- Enables rapid generation of recipient cohorts for genetically modified and age-matched animal models.
- Supports efficient rederivation and cryopreservation workflows by ensuring timely availability of pseudopregnant females.
- Reduces biological variability by standardizing recipient preparation across experiments.
Screening & Assay Development
- Facilitates preparation of validated animal models for downstream phenotypic screening and functional assays.
- Improves reproducibility and scalability of embryo transfer and artificial insemination protocols.
- Enables consistent quantitative outputs for evaluating reproductive and developmental endpoints.
Translational & Preclinical Research
- Aligns with translational continuity by supporting production of genetically engineered models for disease studies.
- Reduces operational bottlenecks in preclinical model generation and cohort expansion.
- Supports risk-adjusted advancement by minimizing procedural failures and animal use.
Pipeline & Workflow Integration
This cervical manipulation protocol integrates into the assisted reproduction continuum, from early discovery through preclinical model development and cohort management.
- Discovery Biology: Streamlines hypothesis testing and model validation by ensuring reliable recipient preparation.
- Screening: Standardizes animal model readiness for high-throughput reproductive and developmental assays.
- Analytics: Provides quantitative pregnancy and litter size data to inform experimental design and resource planning.
- Translational Research: Enables continuity in generating and maintaining disease-relevant animal models.
- Enterprise Reuse: Offers a reusable, non-surgical capability for multiple assisted reproduction applications across research programs.
Operational & Enterprise Impact
- Scientific Value: Increases predictive confidence in reproductive outcomes and reduces mechanistic ambiguity in model generation.
- Operational Value: Enhances standardization, reproducibility, and scalability of assisted reproduction workflows.
- Strategic Value: Improves go/no-go decision-making and capital efficiency by reducing animal use and procedural complexity.
- Portfolio Impact: Supports risk-adjusted prioritization and advancement of genetically engineered and disease-relevant models.
Implementation Considerations
- Requires technical expertise in estrus synchronization and cervical manipulation procedures.
- Needs access to basic instrumentation such as pipettes, specula, and microscopy for cytological evaluation.
- Demands cross-team standardization to ensure reproducibility and minimize variability.
- Adaptable across mouse strains and potentially other rodent models with protocol optimization.
- Limitations include the need for precise estrus staging and operator training to maximize efficiency.
