Enfoque simplificado de imágenes intravitales para la monitorización a largo plazo de la dinámica del tejido epitelial en un microscopio confocal invertido
June 30th, 2023
El protocolo presenta una nueva herramienta para simplificar la obtención de imágenes intravitales mediante microscopía confocal invertida.
Desarrollamos una herramienta para realizar imágenes intravitales en ratones vivos utilizando un microscopio confocal invertido. Esto nos permite rastrear la dinámica de las células de la piel a lo largo de la homeostasis y comparar los comportamientos celulares durante el inicio y la progresión de la enfermedad. La microscopía multifotónica es el enfoque principal aplicado para lograr el seguimiento celular intravital.
Sin embargo, las desventajas de estos microscopios incluyen la limitada versatilidad de las imágenes diarias, el alto costo y la complejidad técnica. Nuestra nueva herramienta permite el uso de microscopios confocales invertidos versátiles para la obtención de imágenes intravitales in vivo. Al modificar el archivo de diseño, las dimensiones del inserto de la platina se pueden personalizar para adaptarse a cualquier marca de microscopio invertido.
El orificio del objetivo se puede redimensionar y reposicionar para adaptarse a cualquier modelo animal y tejido de elección.
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Descripción general
Este estudio introduce una herramienta novedosa para realizar imágenes intravitales utilizando microscopía confocal invertida en ratones vivos, permitiendo a los investigadores rastrear la dinámica de las células de la piel durante la homeostasis y la progresión de la enfermedad. La nueva herramienta aborda las limitaciones de la microscopía multi-fotónica, haciendo que la imagen intravital sea más accesible y versátil.
Componentes clave del estudio
Área de investigación
- Imágenes intravitales
- Dinámica de las células de la piel
- Técnicas de microscopía
Antecedentes
- Las limitaciones actuales de la microscopía multi-fotónica incluyen altos costos y complejidad técnica.
- Los microscopios confocal invertidos ofrecen opciones de imagen versátiles para tejidos vivos.
- El diseño personalizado permite la adaptabilidad a diferentes modelos animales.
Métodos utilizados
- Microscopía confocal invertida con insertos impresos en 3D personalizados
- Ratones vivos como sistema biológico
- Configuración de imágenes personalizable para varios tejidos
Resultados principales
- Adquisición exitosa de pilas Z de tejido auricular marcado fluorescentemente con deriva mínima.
- Imagen continua de células de la piel (positivas para mCherry y GFP) durante períodos de tiempo prolongados.
- Validó la eficacia de los insertos de imagen en vivo impresos en 3D para una imagen estable.
Conclusiones
- Este estudio demuestra un enfoque innovador para mejorar las capacidades de imagen intravital.
- La herramienta mejora la capacidad de estudiar la dinámica celular en modelos vivos, impulsando la investigación en biología celular.
