Name: Un método eficiente y reproducible para producir plantas compuestas mediante la transformación de raíces peludas basadas en Agrobacterium rhizogenes (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2023-06-30T14:20:00.000+00:00
Duration: 4 min 9 s
Description: Aprende un método eficiente de un paso para producir plantas compuestas mediante transformación de raíces peludas con Agrobacterium rhizogenes. Esta técnica simplifica el estudio de la función génica vegetal.

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Este trabajo contó con el apoyo del Fondo de Investigación de la Universidad de Liaocheng (318012028) y la Fundación de Ciencias Naturales de la Provincia de Shandong (ZR2020MC034).

1. Condiciones de crecimiento de las plantas y cultivo de A. rhizogenes 
<ol><li>Siembra de semillas NOTA: Se recolectaron semillas de soja silvestre en el condado de Yanggu, Liaocheng, China; Las semillas de S. americanum y la variedad local de calabaza Yinsu se compraron en un mercado.<ol><li>Recoja semillas de soja silvestre , S. americanum y la variedad local de calabaza, siémbralas en vermiculita a una profundidad de 1 cm y riéguelas bien. Planta 20 semillas en cajas de plástico de 8 cm x 11 cm x 9 cm. Cultivar las plantas en una cámara de crecimiento a 24 ± 2 °C con un ciclo de 16 h de luz/8 h de oscuridad a aproximadamente un 70% de humedad relativa. NOTA: Las capas de semillas de soja silvestre deben romperse antes de la siembra. Si la pregunta de investigación se centra en las interacciones entre las plantas y los microorganismos, las semillas, la vermiculita, las cajas de plástico y el agua deben esterilizarse antes de su uso.</li>
		<li>Activación y cultivo de A. rhizogenes K599 NOTA: La cepa K599 de A. rhizogenes tenía un vector binario pRed13052 portador de un gen reportero fluorescente rojo DsRed2.
		<ol><li>Retirar la cepa K599 de A. rhizogenes de un congelador a -80 °C y activar las bacterias en medio LB sólido (con 50 mg/L de kanamicina y 50 mg/L de estreptomicina) a 28 °C durante 48 h.</li>
			<li>Seleccionar un solo clon de la cepa K599 y cultivarlo en 1 mL de medio LB líquido que contenga antibióticos durante 12 h.</li>
			<li>Distribuir uniformemente 500 μL de la suspensión bacteriana en un medio LB sólido que contenga antibióticos, seguido de una incubación a 28 °C durante 24 h.</li>
		</ol></li>
	</ol></li>
</ol>2. Método de transformación de raíces pilosas mediada por A. rizogenes en un solo paso
<ol><li>Incisión de hipocótilo<ol><li>Después de 7 días (defina la siembra de las semillas como el día 0), los cotiledones de las plántulas acaban de desplegarse (Figura 1A), use un bisturí esterilizado y afilado para cortar aproximadamente 0,5-1 cm del hipocótilo (Figura 1B). Deseche la raíz primaria y parte del hipocótilo parcial. NOTA: Utilice el bisturí con cuidado.</li>
	</ol></li>
	<li>Inoculación de K599<ol><li>Cubra la incisión del hipocótilo con la bacteria K599 (Figura 1C).</li>
		<li>Plante las plántulas en vermiculita húmeda (Figura 1D).</li>
		<li>Infecta 30 plantas de cada especie a través de la transformación de la raíz peluda mediada por A. rhizogenes. Riegue cada planta con 5 mL de suspensión bacteriana K599 resuspendida (OD600 = 0.5-0.6) en un medio básico Gamborg B-5 de concentración de un cuarto (0.25x) (Figura 1E).</li>
		<li>Cubra las macetas con una bolsa de plástico muy transparente (Figura 1F) y colóquelas en una cámara de crecimiento.</li>
	</ol></li>
</ol>3. Producción de raíces pilosas
<ol><li>Cultive las plantas durante ~ 12 días después de la inoculación, se inducirán y generarán nuevas raíces peludas en el sitio de la incisión. Después de 15 días, la longitud de las raíces pilosas suele alcanzar los 2-5 cm (Figura 2).</li>
	<li>Para determinar si las raíces pilosas producidas son transgénicas, se examina la expresión de genes reporteros dependientes del vector transformado en K599.<ol><li>Detecte la expresión del gen reportero DsRed2 utilizando un sistema de imágenes de quimioluminiscencia con luz de excitación verde a 540 nm y emisión a 600 nm (Figura 2B, Figura 2D y Figura 2F).</li>
	</ol></li>
</ol>

Método de transformación de raíces peludas de un solo paso para avanzar en la biología relacionada con las raíces

<ol><li>Chilton, M. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Agrobacterium+rhizogenes+inserts+T-DNA+into+the+genome+of+the+host+plant+root+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Agrobacterium rhizogenes inserts T-DNA into the genome of the host plant root cells.</a> Nature. 295, 432-434 (1982).</li>
<li>Fan, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+fast%2C+simple%2C+high+efficient+and+one-step+generation+of+composite+cucumber+plants+with+transgenic+roots+by+Agrobacterium+rhizogenes-mediated+transformation%5BTitle%5D)+AND+%22Plant+Cell%2C+Tissue+and+Organ+Culture+%28PCTOC%29%22%5BJournal%5D)">A fast, simple, high efficient and one-step generation of composite cucumber plants with transgenic roots by Agrobacterium rhizogenes-mediated transformation.</a> Plant Cell, Tissue and Organ Culture (PCTOC). 141, 207-216 (2020).</li>
<li>Du, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Efficient+targeted+mutagenesis+in+soybean+by+TALENs+and+CRISPR%2FCas9%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Biotechnology%22%5BJournal%5D)">Efficient targeted mutagenesis in soybean by TALENs and CRISPR/Cas9.</a> Journal of Biotechnology. 217, 90-97 (2016).</li>
<li>Nguyen, D. V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+efficient+hairy+root+system+for+validation+of+plant+transformation+vector+and+CRISPR%2FCas+construct+activities+in+cucumber+%28Cucumis+sativus+L.%29%5BTitle%5D)+AND+%22Frontiers+in+Plant+Science%22%5BJournal%5D)">An efficient hairy root system for validation of plant transformation vector and CRISPR/Cas construct activities in cucumber (Cucumis sativus L.).</a> Frontiers in Plant Science. 12, 770062(2022).</li>
<li>Liu, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((AtGCS+promoter-driven+clustered+regularly+interspaced+short+palindromic+repeats%2FCas9+highly+efficiently+generates+homozygous%2Fbiallelic+mutations+in+the+transformed+roots+by+Agrobacterium+rhizogenes-mediated+transformation%5BTitle%5D)+AND+%22Frontiers+in+Plant+Science%22%5BJournal%5D)">AtGCS promoter-driven clustered regularly interspaced short palindromic repeats/Cas9 highly efficiently generates homozygous/biallelic mutations in the transformed roots by Agrobacterium rhizogenes-mediated transformation.</a> Frontiers in Plant Science. 13, 952428(2022).</li>
<li>Irigoyen, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Plant+hairy+roots+enable+high+throughput+identification+of+antimicrobials+against+Candidatus+Liberibacter+spp%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Communications%22%5BJournal%5D)">Plant hairy roots enable high throughput identification of antimicrobials against Candidatus Liberibacter spp.</a> Nature Communications. 11 (1), 5802(2020).</li>
<li>Plasencia, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Eucalyptus+hairy+roots%2C+a+fast%2C+efficient+and+versatile+tool+to+explore+function+and+expression+of+genes+involved+in+wood+formation%5BTitle%5D)+AND+%22Plant+Biotechnology+Journal%22%5BJournal%5D)">Eucalyptus hairy roots, a fast, efficient and versatile tool to explore function and expression of genes involved in wood formation.</a> Plant Biotechnology Journal. 14 (6), 1381-1393 (2016).</li>
<li>Gutierrez-Valdes, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hairy+root+cultures-a+versatile+tool+with+multiple+applications%5BTitle%5D)+AND+%22Frontiers+in+Plant+Science%22%5BJournal%5D)">Hairy root cultures-a versatile tool with multiple applications.</a> Frontiers in Plant Science. 11, 33(2020).</li>
<li>Stougaard, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Agrobacterium+rhizogenes+as+a+vector+for+transforming+higher+plants.+Application+in+Lotus+corniculatus+transformation%5BTitle%5D)+AND+%22Methods+in+Molecular+Biology%22%5BJournal%5D)">Agrobacterium rhizogenes as a vector for transforming higher plants. Application in Lotus corniculatus transformation.</a> Methods in Molecular Biology. 49, 49-61 (1995).</li>
<li>Kereszt, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Agrobacterium+rhizogenes-mediated+transformation+of+soybean+to+study+root+biology%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Protocols%22%5BJournal%5D)">Agrobacterium rhizogenes-mediated transformation of soybean to study root biology.</a> Nature Protocols. 2 (4), 948-952 (2007).</li>
<li>Ho-Plágaro, T., Huertas, R., Tamayo-Navarrete, M. I., Ocampo, J. A., García-Garrido, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+improved+method+for+Agrobacterium+rhizogenes-mediated+transformation+of+tomato+suitable+for+the+study+of+arbuscular+mycorrhizal+symbiosis%5BTitle%5D)+AND+%22Plant+Methods%22%5BJournal%5D)">An improved method for Agrobacterium rhizogenes-mediated transformation of tomato suitable for the study of arbuscular mycorrhizal symbiosis.</a> Plant Methods. 14, 34(2018).</li>
<li>Yu, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Overexpression+of+phosphatidylserine+synthase+IbPSS1+affords+cellular+Na%2B+homeostasis+and+salt+tolerance+by+activating+plasma+membrane+Na%2B%2FH%2B+antiport+activity+in+sweet+potato+roots%5BTitle%5D)+AND+%22Horticulture+Research%22%5BJournal%5D)">Overexpression of phosphatidylserine synthase IbPSS1 affords cellular Na+ homeostasis and salt tolerance by activating plasma membrane Na+/H+ antiport activity in sweet potato roots.</a> Horticulture Research. 7, 131(2020).</li>
<li>Boisson-Dernier, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Agrobacterium+rhizogenes-transformed+roots+of+Medicago+truncatula+for+the+study+of+nitrogen-fixing+and+endomycorrhizal+symbiotic+associations%5BTitle%5D)+AND+%22Molecular+Plant-Microbe+Interactions%3A+MPMI%22%5BJournal%5D)">Agrobacterium rhizogenes-transformed roots of Medicago truncatula for the study of nitrogen-fixing and endomycorrhizal symbiotic associations.</a> Molecular Plant-Microbe Interactions: MPMI. 14 (6), 695-700 (2001).</li>
<li>Fan, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((One-step+generation+of+composite+soybean+plants+with+transgenic+roots+by+Agrobacterium+rhizogenes-mediated+transformation%5BTitle%5D)+AND+%22BMC+Plant+Biology%22%5BJournal%5D)">One-step generation of composite soybean plants with transgenic roots by Agrobacterium rhizogenes-mediated transformation.</a> BMC Plant Biology. 20 (1), 208(2020).</li>
<li>Fan, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Anthocyanin%2C+a+novel+and+user-friendly+reporter+for+convenient%2C+non-destructive%2C+low+cost%2C+directly+visual+selection+of+transgenic+hairy+roots+in+the+study+of+rhizobia-legume+symbiosis%5BTitle%5D)+AND+%22Plant+Methods%22%5BJournal%5D)">Anthocyanin, a novel and user-friendly reporter for convenient, non-destructive, low cost, directly visual selection of transgenic hairy roots in the study of rhizobia-legume symbiosis.</a> Plant Methods. 16, 94(2020).</li>
<li>Wang, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Application+of+AtMYB75+as+a+reporter+gene+in+the+study+of+symbiosis+between+tomato+and+Funneliformis+mosseae%5BTitle%5D)+AND+%22Mycorrhiza%22%5BJournal%5D)">Application of AtMYB75 as a reporter gene in the study of symbiosis between tomato and Funneliformis mosseae.</a> Mycorrhiza. 33 (3), 181-185 (2023).</li>
<li>Wang, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Development+of+a+set+of+novel+binary+expression+vectors+for+plant+gene+function+analysis+and+genetic+transformation%5BTitle%5D)+AND+%22Frontiers+in+Plant+Science%22%5BJournal%5D)">Development of a set of novel binary expression vectors for plant gene function analysis and genetic transformation.</a> Frontiers in Plant Science. 13, 1104905(2023).</li>
<li>Li, Q. Q., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Phytochrome+B+inhibits+darkness-induced+hypocotyl+adventitious+root+formation+by+stabilizing+IAA14+and+suppressing+ARF7+and+ARF19%5BTitle%5D)+AND+%22The+Plant+Journal%3A+For+Cell+and+Molecular+Biology%22%5BJournal%5D)">Phytochrome B inhibits darkness-induced hypocotyl adventitious root formation by stabilizing IAA14 and suppressing ARF7 and ARF19.</a> The Plant Journal: For Cell and Molecular Biology. 105 (6), 1689-1702 (2021).</li>
</ol>

Los autores no tienen conflictos de intereses que declarar.

El método de raíz pilosa mediada por A. rizogenes en un solo paso es un método más simple y eficiente para producir plantas compuestas que el método de inyección de hipocótilo. El método ARM de un solo paso mejora significativamente la eficiencia de la transformación de las raíces pilosas, acorta el tiempo para producir raíces pilosas, aumenta el número de raíces pilosas y reduce la cantidad de trabajo involucrado. El protocolo de transformación mejorado es óptimo para estudios de simbiosis entre leguminosas y r...

Agrobacterium rhizogenes es una bacteria gramnegativa del suelo de la familia Rhizobiaceae. A. rhizogenes puede infectar casi todas las dicotiledóneas, algunas monocotiledóneas y gimnospermas individuales a través de heridas, produciendo raíces pilosas en las plantas infectadas. La bacteria es portadora del plásmido Ri (inductor de raíces), y el ADN-T del plásmido Ri es portador del gen de síntesis de opina y de los genes de rol (genes del locus de la raíz). Después de que el ADN-T del plásmido Ri entra en una célula vegetal y se integra en un cromosoma huésped, la expresión de los genes del rol induce la producciónde raíces pilosas. Un vector de expresión binaria de una planta portador de un gen diana se transforma en A. rhizogenes, y el A. rhizogenes transformado se utiliza para infectar una planta. Las raíces transgénicas pueden ser inducidas en plantas infectadas, produciendo plantas compuestas que contienen raíces transgénicas y tallos y yemas no transgénicos. Generalmente, una planta compuesta se puede obtener en un plazo de 14 a 20 días. La transformación de la raíz pilosa mediada por A. rizogenes generalmente no está limitada por el genotipo en las plantas dicotiledóneas2. Las raíces peludas producidas por plantas infectadas con A. rizogenes se caracterizan por una tasa de crecimiento rápida, una herencia estable y una fácil operación. La transformación de la raíz pilosa mediada por A. rhizogenes se utiliza actualmente ampliamente para estudiar la biología relacionada con la raíz. Además, la transformación de las raíces pilosas también se puede utilizar para validar y optimizar la eficiencia de edición de objetivos del sistema CRISPR/Cas9 3,4,5 y la localización subcelular de proteínas. Por lo tanto, la transformación de la raíz pilosa es una herramienta importante en la investigación sobre la función de los genes de las plantas, la ingeniería metabólica y las interacciones entre las raíces y los microorganismos de la rizosfera 6,7,8.
Las plantas compuestas que contienen raíces transgénicas obtenidas a través de la transformación de raíces pilosas se han producido ampliamente en plantas dicotiledóneas, especialmente en leguminosas. El método tradicional de inyectar el hipocótilo con A. rhizogenes se ha utilizado para producir Lotus corniculatus9, soja 10, tomate11, batata12 y muchas otras plantas 5,8. El método de inyección de hipocótilo es ineficiente y es probable que cause la muerte de plantas jóvenes o diminutas de hipocótilo. Por lo tanto, el método se mejoró cortando las raíces embrionarias, cubriendo la incisión de la plántula con A. rhizogenes y luego colocando el hipocótilo en un medio de cultivo estéril para el cultivo de enraizamiento13. Sin embargo, esos pasos se realizan en un entorno estéril y los pasos de la operación son relativamente engorrosos. En particular, las plantas compuestas resultantes deben trasplantarse, lo que aumenta la cantidad de trabajo. En trabajos anteriores, se estableció la transformación de la raíz pilosa mediada por A. rizogenes (ARM) en un solo paso en pepino, soja, Lotus japonicus, Medicago truncatula y tomate 2,14,15,16,17. Se eliminaron la raíz primaria y el hipocótilo parcial, el sitio de incisión del hipocótilo restante se recubrió con A. rizogenes transformado y la plántula se plantó en vermiculita estéril húmeda. Después de 12 días de cultivo, se produjeron raíces pilosas en el sitio de la incisión. El método ARM de un solo paso es altamente eficiente y requiere menos tiempo para producir raíces pilosas. Tampoco es necesario trasplantar después de formar raíces peludas. Debido a que la contaminación microbiana se puede evitar sin trasplante, el método ARM de un solo paso puede ser particularmente útil cuando se estudian las interacciones entre plantas y microorganismos, como la fijación simbiótica de nitrógeno entre plantas leguminosas y rizobios, y simbiosis entre plantas y hongos micorrícicos arbusculares. En este artículo, se proporciona un protocolo detallado de transformación de raíces pilosas mediada por A. rizogenes de un solo paso con ejemplos de plantas compuestas producidas en soja silvestre, Solanum americanum y calabaza. Con el protocolo, los investigadores pueden realizar sin problemas la transformación de ARM en un solo paso.

<table><tbody><tr><td>kanamicina</td><td>Sangon Biotech (Shanghai) Co., Ltd.</td><td></td><td></td>A506636</tr><tr><td>LB medio</td><td>Sangon Biotech (Shanghai) Co., Ltd.</td><td></td><td></td>B540113</tr><tr><td>caja de plástico</td><td>LiaoSu</td><td></td><td>8 cm x 11 cm x 9 cm</td></tr><tr><td>calabaza</td><td></td><td></td><td>variedad local Yinsu</td></tr><tr><td>estreptomicina</td><td>Sangon Biotech (Shanghai) Co., Ltd.</td><td>A610494&nbsp;</td><td></td></tr><tr><td>Tanon-5200Multi máquina</td><td>Tanon Co., Ltd., China</td><td>5200Sistema</td> de <td>imagen de quimioluminiscencia</td>múltiple</tr><tr><td>tomate</td><td></td><td></td><td>variedad local Zhongshu4</td></tr><tr><td>soja</td><td></td><td></td> silvestre <td>recolectada en el condado de Yanggu, Liaocheng, China</td></tr></tbody></table>

un método eficiente y reproducible para producir plantas compuestas mediante la transformación de raíces peludas basadas en agrobacterium rhizogenes

An Efficient and Reproducible Method for Producing Composite Plants by Agrobacterium rhizogenes-Based Hairy Root Transformation

La producción de plantas compuestas con raíces transgénicas y tallos y yemas no transgénicos utilizando la transformación de raíces pilosas mediada por Agrobacterium rhizogenes es una herramienta poderosa para estudiar la biología relacionada con las raíces. La transformación de la raíz pilosa se establece en una amplia gama de dicotiledóneas y en varias especies de monocotiledóneas y es casi independiente del genotipo. El método tradicional de inyección de hipocótilo con A. rhizogenes para obtener plantas compuestas es ineficiente, requiere mucho tiempo, es laborioso y con frecuencia causa la muerte de plantas de hipocótilo tiernas y diminutas. Previamente se estableció una transformación de raíz pilosa altamente eficiente de un solo paso mediada por A. rhizogenes , lo que elimina la necesidad de trasplante después de producir raíces pilosas. En este estudio, se extirpó un hipocótilo parcial y una raíz primaria, se recubrió el sitio de incisión del hipocótilo con A. rhizogenes y luego se plantaron hipocótilos en vermiculita estéril. Después de 12 días de cultivo, la incisión del hipocótilo se expandió y se indujeron nuevas raíces pilosas. Este artículo proporciona el protocolo detallado de un método de transformación de un solo paso mediado por A. rhizogenes, cuya eficacia se ha demostrado mediante la producción de plantas compuestas de soja silvestre, Solanum americanum y calabaza.

Transformación de raíces pilosas mediada por A. rizogenes en un solo paso altamente eficiente Las raíces pilosas se produjeron en el sitio de incisión del hipocótilo 12 días después de la inoculación con K599 diseñado. Las raíces pilosas transgénicas se determinaron a partir de la expresión del gen reportero contenido en el vector binario. Se observaron raíces transgénicas transformadas con el gen reportero DsRed2 de soja silvestre compuesta, S. americanum y calabaza bajo lu...

Aquí, proporcionamos el protocolo detallado de un método de transformación de un solo paso mediado por Agrobacterium tumefaciens para producir plantas compuestas.

Un método eficiente y reproducible para producir plantas compuestas mediante la transformación de raíces peludas basadas en Agrobacterium rhizogenes

Producing composite plants with transgenic roots and nontransgenic stems and buds using Agrobacterium rhizogenes-mediated hairy root transformation is a ...

Nuestro equipo se centra en la transformación de raíces pilosas basada en Agrobacterium rhizogenes. La transformación de las raíces pilosas es crucial para estudiar la función de los genes de las plantas, la ingeniería metabólica y las interacciones entre las raíces y los microorganismos de la rizosfera. Este artículo proporciona un método de transformación de un solo paso, mediado por Agrobacterium rhizogenes.La transformación de la raíz pilosa se establece en varias especies de dicotiledóneas y monocotiledóneas, y es casi independiente del genotipo. El método de un solo paso mediado por Agrobacterium rhizogenes para inducir raíces pilosas es más simple y eficiente para crear plantas compuestas en comparación con el método de inyección de hipocótilo. El método de inyección de hipocótilo es ineficiente y es probable que cause la muerte de plantas jóvenes o diminutas de hipocótilo.El método mediado por Agrobacterium rhizogenes en un solo paso es altamente eficiente y requiere menos tiempo para producir raíces pilosas. Además, no es necesario trasplantar más allá de la formación de raíces peludas. Los genes de regulación de signos alfa y los genes de síntesis de signos beta se utilizaron como marcadores de cribado viral en la transformación de raíces pilosas mediada por Agrobacterium rhizogenes.

an-efficient-reproducible-method-for-producing-composite-plants

Research

Investigación

JoVE Journal

Biology

Biología

Se demuestra cómo las plantas peludas raíces compuesto puede ser utilizado para estudiar las interacciones planta-rizobio y la nodulación en las difíciles de transformar las...

Generación de plantas compuestas en Medicago truncatula Utilizado para los ensayos nodulación

Usando el montaje de ADN, múltiples vectores de CRISPR pueden ser construidos en paralelo en una única reacción de clonación, por lo que la construcción de un gran número de vectores de CRISPR una tarea simple. Tomate raíces peludas son un excelente sistema modelo para validar vectores de CRISPR y generar materiales mutantes.

De alto rendimiento CRISPR vector de la construcción y caracterización de las modificaciones del ADN mediante la generación de raíces peludas tomate

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Un método eficiente y reproducible para producir plantas compuestas mediante la transformación de raíces peludas basadas en Agrobacterium rhizogenes (Video) | JoVE Journal

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