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DOI: 10.3791/65730-v
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Las células mononucleares aisladas de sangre periférica se pueden utilizar para el análisis de funciones y trastornos inmunitarios, enfermedades metabólicas o funciones mitocondriales. En este trabajo se describe un método estandarizado para la preparación de PBMCs a partir de sangre total y su posterior criopreservación. La criopreservación hace que este tiempo y lugar sean independientes.
Con la ayuda de este método, queremos describir un procedimiento que es adecuado para criopreservar PBMC de tal manera que después de la descongelación, los parámetros bioenergéticos no se modifiquen. Uno de los principales desafíos experimentales de la criopreservación es que el proceso de congelación y descongelación puede dañar las PBMC, lo que afecta las siguientes mediciones bioenergéticas. Con nuestro protocolo, intentamos mostrar una forma de preservar las PBMC de forma fiable sin dañar las células, de modo que los parámetros bioenergéticos medidos no se vean afectados.
La posibilidad de conservar los PBMC permite recoger muestras de diferentes centros y medirlas en un solo lugar. También hace que la medición sea más independiente del tiempo. La criopreservación de PBMC permite realizar estudios simultáneamente en múltiples sitios donde se recolectan y conservan las células.
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