Name: Aislamiento, identificación conductual y evaluación de la patogenicidad de hongos entomopatógenos de un barrenador forestal (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2023-09-29T12:20:00.000+00:00
Duration: 6 min 58 s
Description: Aprende a aislar e identificar hongos entomopatógenos de Monochamus alternatus mediante PCR y secuenciación. Este protocolo evalúa la patogenicidad para aplicaciones de biocontrol en plagas forestales.

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<meta charset="utf8"></head><body>Exploración de los recursos de hongos entomopatógenos de los barrenadores forestales de la madera

<table><tbody><tr><td>Tubos de centrífuga de 1,5 mL, 2 mL Biosharp</td><td></td><td>BS-15-M</td><td></td></tr><tr><td>10 y micro; L puntas de pipeta</td><td>Sangon Biotech</td><td>F601216</td><td></td></tr><tr><td>10 &micro; L, 20 y micro; L, 100 y micro; L, 200 y micro; L, 1.000 y micro; L pipetas</td><td>Rainin</td><td></td><td></td></tr><tr><td>1.000 y micro; Puntas de pipeta</td><td>L Sangon Biotech</td><td>F630102</td><td></td></tr><tr><td>viales criogénicos de 2 mL</td><td>Corning</td><td>430659</td><td></td></tr><tr><td>20x tampón PBS</td><td>Sangon Biotech</td><td>B548117-0500</td><td></td></tr><tr><td>200 &micro; Puntas de pipeta</td><td>L Sangon Biotech</td><td>F601227</td><td></td></tr><tr><td>fabricante de 2.000 bp</td><td>TaKaRar</td><td>SD0531</td><td></td></tr><tr><td>Tubos de 50 mL</td><td>Nest</td><td>602052</td><td></td></tr><tr><td>solución de glutaraldehído al 50%</td><td>Sangon Biotech</td><td>G916054</td><td></td></tr><tr><td>50x Tampón TAE</td><td>Sangon Biotech</td><td>B548101</td><td></td></tr><tr><td>6x tampón de carga</td><td>TaKaRar</td><td>SD0503</td><td></td></tr><tr><td>Agarosa</td><td>Sangon Biotech</td><td>A610013</td><td></td></tr><tr><td>etanol anhidro</td><td>Jkchemical</td><td>LB10V37</td><td></td></tr><tr><td>Bioquímica Gabinete de cultivo</td><td>Shanghaiyiheng</td><td>LRH-250F</td><td></td></tr><tr><td>Cloroformo</td><td>Juhua</td><td>61553</td><td></td></tr><tr><td>Trampas comerciales para escarabajos</td><td>FEIMENGDI</td><td>BF-8 www.yinyouji.com</td><td></td></tr><tr><td>Generador de imágenes en gel</td><td>Bio-Rad</td><td>GelDoc XR+</td><td></td></tr><tr><td>Glicerol</td><td>Sangon Biotech</td><td>A600232</td><td></td></tr><tr><td>Centrífuga refrigerada de alta velocidad</td><td>Sigma</td><td>D-37520</td><td></td></tr><tr><td>Olla de esterilización por vapor a alta presión</td><td>Mettler Toledo</td><td>JA5003</td><td></td></tr><tr><td>Alcohol isopropílico</td><td>Reactivo general</td><td>G75885B</td><td></td></tr><tr><td>Colorante de ácido nucleico</td><td>Sangon Biotech</td><td>A616696</td><td></td></tr><tr><td>Microscopio óptico, OM</td><td>Leica</td><td>DM2000</td><td></td></tr><tr><td>Parafilm</td><td>Parafilm</td><td>PM996</td><td></td></tr><tr><td>Medidor de PCR</td><td>Fuerza de curación</td><td>Trident960</td><td></td></tr><tr><td>Penicilina G</td><td>Marklin</td><td>GB15743</td><td></td></tr><tr><td>Agar patata dextrosa, PDA</td><td>Oxoid</td><td>CM0139</td><td></td></tr><tr><td>Caldo de patata dextrosa, PDB</td><td>Solarbio</td><td>P9240</td><td></td></tr><tr><td>Imprimaciones</td><td>Sangon Biotech</td><td>/</td><td></td></tr><tr><td>Primers</td><td>Taq TaKaRar</td><td>RR902A</td><td></td></tr><tr><td>Kit de aislamiento de ADN genómico rápido de hongos</td><td>Sangon Biotech Microscopio</td><td></td> electrónico de barrido B518229<td></td></tr><tr><td>, SEM</td><td>Hitachi</td><td>S-3400N</td><td></td></tr><tr><td>Estreptomicina</td><td>Marklin</td><td>S6153</td><td></td></tr><tr><td>Tetraciclina</td><td>Marklin</td><td>T829835</td><td></td></tr><tr><td>Tween-80</td><td>Marklin</td><td>T6336</td><td></td></tr><tr><td>Liofilizador al vacío</td><td>Yamato</td><td>DC801</td><td></td></tr><tr><td>Agitador de vórtice</td><td>HLD</td><td>WH-861</td><td></td></tr><tr><td>&beta;-Mercaptoetanol</td><td>Marklin</td><td>M6230</td><td></td></tr></tbody></table>

aislamiento, identificación conductual y evaluación de la patogenicidad de hongos entomopatógenos de un barrenador forestal

Isolation, Behavioral Identification, and Pathogenicity Assessment of Entomopathogenic Fungi from a Forest Wood Borer

Aislamiento e identificación de aislados fúngicos de M. Alternatus Con la ayuda de trampas atrayentes, un gran número (aproximadamente 500 escarabajos en total) de M. Se recolectaron alternatus en cinco regiones geográficas. Se recogieron cadáveres de escarabajos con síntomas típicos de infección por hongos entomopatógenos; Luego, los tegumentos corporales de cada escarabajo se diseccionaron en varias posiciones, como se describe en el paso 1.3 del protocolo. Como ...

Aislamiento, identificación conductual y evaluación de la patogenicidad de hongos entomopatógenos de un barrenador forestal

Forest wood borers (FWB) cause severe tree damage and economic losses worldwide. The release of entomopathogenic fungi (EPF) during the FWB emergence ...

isolation-behavioral-identification-pathogenicity-assessment

Research

Investigación

JoVE Journal

Biology

Biología

Aquí presentamos un protocolo basado en el sistema de cebo del gusano de la harina (Tenebrio molitor) que se utilizó para aislar y seleccionar hongos entomopatógenos (EPF) a partir de muestras de suelo. Se utiliza una fórmula efectiva de número de conidios (ECN) para seleccionar EPF altamente tolerante al estrés en función de las características fisiológicas para el control microbiano de plagas en el campo.

Aislamiento y selección de hongos entomopatógenos a partir de muestras de suelo y evaluación de la virulencia fúngica contra plagas de insectos

Las colonias de hongos entomopatógenos se aíslan de muestras de suelo tropical utilizando cebo Tenebrio , cebo Galleria , así como medio artificial selectivo, es decir, agar de dextrosa de papa enriquecido con extracto de levadura suplementado con cloranfenicol, tiabendazol y cicloheximida (medio CTC).

Comparación de métodos para aislar hongos entomopatógenos de muestras de suelo

En este video se describe un método para evaluar la reacción psicofisiológica persona al estrés utilizando biofeedback. También presentará las directrices generales para la planificación del tratamiento.

Evaluación psicofisiológica de estrés uso de Biofeedback

Vampiric Aislamiento de líquido extracelular de<em&gt; Caenorhabditis elegans</em

En este reporte se describe un protocolo para el aislamiento de las poblaciones altamente purificadas de leucocitos que se infiltran en los tumores. Este protocolo es una adaptación del protocolo de Miltenyi Biotech para mejorar el rendimiento y la pureza para el aislamiento de las células del tejido tumoral compleja.

El aislamiento de las células inmunes de tumores primarios

Se describe un método para medir directamente la fuerza muscular, la fuerza muscular, la cinética de contracción y fatigabilidad de los músculos esqueléticos aislados en...

Evaluación ex vivo de la contractilidad, fatigabilidad y alternancia en aislados músculos esqueléticos

La comparación del potencial de membrana mitocondrial entre muestras proporciona información valiosa sobre el estado celular. Se describen los pasos detallados para aislar las mitocondrias y evaluar la respuesta a los inhibidores y desacopladores mediante fluorescencia. El método y la utilidad de este protocolo se ilustran mediante el uso de un cultivo celular y un modelo animal de estrés celular.

Aislamiento y análisis funcional de las mitocondrias de las células cultivadas y ratón de Tejidos

Los hongos entomopatógenos han ganado importancia como agentes de control biológico de plagas de insectos agrícolas. En este estudio, la producción en masa de un número suficiente de propágulos infecciosos resistentes de aislados sudafricanos de Metarhizium robertsii y M. pinghaense para su aplicación comercial contra plagas de insectos se llevó a cabo con éxito utilizando productos de granos agrícolas.

Producción en masa de hongos entomopatógenos, Metarhizium robertsii y Metarhizium pinghaense, para aplicación comercial contra plagas de insectos

Aquí, presentamos un protocolo para el cribado de la biodiversidad del suelo para buscar cepas de hongos involucradas en la degradación de materiales recalcitrantes. En primer lugar, se aíslan cepas fúngicas capaces de crecer con ácidos húmicos o lignocelulosa. Su actividad se prueba tanto en ensayos enzimáticos como en contaminantes como hidrocarburos y plásticos.

Aislamiento y cribado de la biodiversidad del suelo para hongos involucrados en la degradación de materiales recalcitrantes

Este protocolo detalla un método para la disección de depósitos adiposos de ratón y el aislamiento y la digestión de las arterias respectivas para liberar y luego identificar la población de células endoteliales. Las células recién aisladas utilizadas en aplicaciones posteriores avanzarán en la comprensión de la biología celular vascular y los mecanismos de la disfunción vascular.

Aislamiento e identificación de células endoteliales vasculares de distintos depósitos adiposos para aplicaciones posteriores

Aprende a aislar e identificar hongos entomopatógenos de Monochamus alternatus mediante PCR y secuenciación. Este protocolo evalúa la patogenicidad para aplicaciones de biocontrol en plagas forestales.

Aislamiento, identificación conductual y evaluación de la patogenicidad de hongos entomopatógenos de un barrenador forestal

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