Agroinfiltración forzada al vacío para la transformación in planta de plantas recalcitrantes: el cacao como caso de estudio

Se requieren métodos genéticos in vivo para estudiar la función biológica de los genes en especies tropicales perennes y cultivos arbóreos hortícolas. Sin embargo, muchas de estas especies son recalcitrantes a la transformación en cada generación. El objetivo de esta investigación es desarrollar un método de transformación genética sencillo y eficiente aplicable a plantas de gran tamaño.

Voy a ilustrar las cosas. La transformación genética mediada por agrobacterias de plantas con tejidos difíciles de infiltrar ha sido posible gracias a la infiltración forzada mediante una bomba de vacío. Sin embargo, los protocolos actualmente en uso se limitan a plantas de pequeño tamaño debido a las limitaciones físicas y económicas de someter plantas de gran tamaño a una cámara de vacío.

El tamaño de las cámaras de vacío, que suelen ser desecadores de laboratorio, evita la infiltración por vacío de plantas que son demasiado grandes para caber en desecadores, como es el caso de las plantas leñosas tropicales. Hemos desarrollado un protocolo para la infiltración al vacío localizada eficiente de plantas leñosas tropicales, lo que hace posible estudios de transformación genética in vivo de especies de plantas grandes. Este protocolo nos permitió superar las limitaciones de tamaño de las plantas para la infiltración al vacío mediada por Agrobacterium en cultivos de árboles hortícolas como el cacao y el aguacate.

La transformación mediada por agrobacterias de las hojas adheridas mediante infiltración de vacío localizada puede realizarse de manera rápida, sencilla y rentable por los laboratorios que ya utilizan la infiltración al vacío, ya que se puede utilizar la misma bomba y el mismo recipiente de vacío sin necesidad de añadir equipos costosos.