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DOI: 10.3791/66275-v
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Las regiones intrínsecamente desordenadas (IDR) son dominios proteicos flexibles que modifican su conformación en respuesta a los cambios ambientales. La transferencia de energía por resonancia de fluorescencia de conjunto (FRET) puede estimar las dimensiones de las proteínas en diferentes condiciones. Presentamos un enfoque FRET para evaluar la sensibilidad estructural de IDR en células vivas de Saccharomyces cerevisiae bajo estrés hiperosmótico.
Nuestro objetivo es comprender cómo las regiones intrínsecamente desordenadas detectan y responden a los cambios en las propiedades físico-químicas del medio ambiente. Combinamos técnicas biofísicas, bioquímicas, genéticas y de biología celular para monitorizar cómo cambia el conjunto estructural de las regiones desordenadas en las células vivas. En la actualidad se utilizan técnicas de biofísica de proteínas para estudiar la confirmación de los IVR.
Estos incluyen la resonancia magnética nuclear, el dicroísmo circular, la dispersión de rayos X de ángulo pequeño y el FRET. La mayoría de estas técnicas solo se pueden utilizar in vitro. Estudiar la confirmación de los IVR en un contexto celular es un reto con técnicas de alto coste y que consumen mucho tiempo.
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