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DOI: 10.3791/66471-v
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Describimos un procedimiento sencillo para la complementación cromosómica de una sola copia de un gen de bomba de eflujo utilizando un sistema de expresión basado en mini-Tn7 en una cepa de Acinetobacter baumannii deficiente en eflujo modificada. Esta precisa herramienta genética permite controlar la expresión génica, lo cual es clave para la caracterización de las bombas de eflujo en patógenos multirresistentes.
Estudiamos los sistemas de eflujo multirresistentes en bacterias gramnegativas. Estamos interesados en conocer las funciones naturales de estas bombas y cómo se pueden utilizar como una posible diana farmacológica. La expresión de los sistemas de eflujo de resistencia a múltiples fármacos está estrechamente regulada, lo que dificulta el estudio de sus funciones.
Por lo tanto, un sistema de expresión que evite el sistema regulador puede ser bastante útil en la caracterización de estas bombas. Este protocolo permite la expresión de genes a niveles que normalmente se observan en entornos naturales. Por lo tanto, la actividad de los productos génicos imita lo que se observa en la naturaleza.
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