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Microinyección embrionaria para la transgénesis en Drosophila
Microinyección embrionaria para la transgénesis en Drosophila
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JoVE Journal Genetics
Embryo Microinjection for Transgenesis in Drosophila

Microinyección embrionaria para la transgénesis en Drosophila

Full Text
2,809 Views
05:32 min
June 7, 2024

DOI: 10.3791/66679-v

Guang Chen*1,2, Xinyi Zhang*1,3, Si Xu1,4, Xiaotao Zhou1, Wen Xue1, Xuelian Liu1, Jialong Yan1, Nana Zhang1, Jiwu Wang1,2,4

1Clinical Research Institute, The Affiliated Nanhua Hospital, Hengyang Medical School,University of South China, 2Department of Clinical Laboratory, The Affiliated Nanhua Hospital, Hengyang Medical School,University of South China, 3Institute of Biochemistry and Molecular Biology, Hengyang Medical School,University of South China, 4Department of Neurology, The Affiliated Nanhua Hospital, Hengyang Medical School,University of South China

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Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

Summary

Este artículo toma como ejemplo la transgénesis mediada por la integrasa phiC31 en Drosophila y presenta un protocolo optimizado para la microinyección de embriones, un paso crucial para la creación de moscas transgénicas.

Transcript

La transgénesis en Drosophila es esencial para estudiar la función de los genes a nivel de organismo. La microinyección de embriones es un paso crucial para la construcción de moscas transgénicas. Aquí, tomamos como ejemplo la transgénesis mediada por la integrasa phiC31 en Drosophila y presentamos un protocolo detallado para la microinyección de embriones para la transgénesis en Drosophila.

Las agujas de inyección cuyas puntas están biseladas por un molinillo no suelen bloquearse ni provocar grandes fugas citoplasmáticas. Sin embargo, la solución de molienda puede entrar en la punta biselada de una aguja durante el proceso de molienda y la solución de molienda dentro de la punta no se seca naturalmente rápidamente. Nuestro protocolo utiliza una bomba de aire de pie con un manómetro para aplicar presión de aire a una aguja mientras se muele su punta.

Esto evita que la solución de molienda se sifone, por lo tanto, se evita que la solución de molienda ingrese a la punta biselada, lo que permite que la aguja biselada se use de inmediato.

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Palabras clave: Drosophila Transgénesis Microinyección de embriones PhiC31 Integrasa Plásmido Pre-blastodermo Blastodermo sincitial Filtro de células Molienda de aguja Microinyector Micromanipulador Microscopio invertido Microscopio estereoscópico

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