Name: Una radiosíntesis automatizada de 68Ga Ga-FAPI-46 para uso clínico rutinario (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2024-05-24T14:20:00.000+00:00
Duration: 10 min 33 s
Description: Aprende la radiosíntesis automatizada de [68Ga]Ga-FAPI-46 para imagen PET en oncología usando el sintetizador iPHASE MultiSyn. Este método mejora la seguridad y cumple con normas GMP para uso clínico.

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Los autores reconocen y agradecen a SOFIE Biosciences Inc. por suministrar el precursor químico FAPI-46 y el estándar [natGa]Ga-FAPI-46, a la Fundación Charlies para la Investigación por su apoyo financiero, a Stan Poniger de iPHASE Pty Ltd, y al equipo de Producción de Radiofármacos (RAPID) en el Departamento de Tecnología Médica y Física del Hospital Sir Charles Gairdner por su apoyo científico y técnico. Los autores también agradecen la asistencia del Nodo de la Instalación Nacional de Imágenes de WA, que cuenta con el apoyo de fondos de infraestructura del Gobierno del Estado de Australia Occidental en asociación con el Gobierno Federal de Australia, a través de la capacidad de la Estrategia Nacional de Infraestructura de Investigación Colaborativa (NCRIS).

Automated Production of [68Ga]Ga-FAPI-46 on the iPHASE MultiSyn Synthesizer

<ol><li>Imlimthan, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((New+frontiers+in+cancer+imaging+and+therapy+based+on+radiolabeled+fibroblast+activation+protein+inhibitors%3A+a+rational+review+and+current+progress%5BTitle%5D)+AND+%22Pharmaceuticals%22%5BJournal%5D)">New frontiers in cancer imaging and therapy based on radiolabeled fibroblast activation protein inhibitors: a rational review and current progress.</a> Pharmaceuticals. 14 (10), 1023(2021).</li>
<li>Siveke, J. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fibroblast-activating+protein%3A+targeting+the+roots+of+the+tumor+microenvironment%5BTitle%5D)+AND+%22J+Nucl+Med%22%5BJournal%5D)">Fibroblast-activating protein: targeting the roots of the tumor microenvironment.</a> J Nucl Med. 59 (9), 1415-1423 (2018).</li>
<li>Koczorowska, M. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fibroblast+activation+protein-%CE%B1%2C+a+stromal+cell+surface+protease%2C+shapes+key+features+of+cancer+associated+fibroblasts+through+proteome+and+degradome+alterations%5BTitle%5D)+AND+%22Mol+Oncol%22%5BJournal%5D)">Fibroblast activation protein-α, a stromal cell surface protease, shapes key features of cancer associated fibroblasts through proteome and degradome alterations.</a> Mol Oncol. 10 (1), 40-58 (2016).</li>
<li>Altmann, A., Haberkorn, U., Siveke, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+latest+developments+in+imaging+of+fibroblast+activation+protein%5BTitle%5D)+AND+%22J+Nucl+Med%22%5BJournal%5D)">The latest developments in imaging of fibroblast activation protein.</a> J Nucl Med. 62 (2), 160-167 (2021).</li>
<li>Lindner,, et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Targeting+of+activated+fibroblasts+for+imaging+and+therapy%5BTitle%5D)+AND+%22EJNMMI+Radiopharm+Chem%22%5BJournal%5D)">Targeting of activated fibroblasts for imaging and therapy.</a> EJNMMI Radiopharm Chem. 4, 16(2019).</li>
<li>Linder, T., Giesel, F. L., Kratochwil, C., Serfling, S. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Radioligands+targeting+fibroblast+activation+protein+%28FAP%29%5BTitle%5D)+AND+%22Cancers%22%5BJournal%5D)">Radioligands targeting fibroblast activation protein (FAP).</a> Cancers. 13 (22), 5744(2021).</li>
<li>Loktev, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+tumor-imaging+method+targeting+cancer-associated+fibroblast%5BTitle%5D)+AND+%22J+Nucl+Med%22%5BJournal%5D)">A tumor-imaging method targeting cancer-associated fibroblast.</a> J Nucl Med. 59 (9), 1423-1429 (2018).</li>
<li>Lindner, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Development+of+quinoline-based+theranostic+ligands+for+the+targeting+of+fibroblast+activation+protein%5BTitle%5D)+AND+%22J+Nucl+Med%22%5BJournal%5D)">Development of quinoline-based theranostic ligands for the targeting of fibroblast activation protein.</a> J Nucl Med. 59 (9), 1415-1422 (2018).</li>
<li>Giesel, F. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((68Ga-FAPI+PET%2FCT%3A+biodistribution+and+preliminary+dosimetry+estimate+of+2+DOTA-containing+FAP-targeting+agents+in+patients+with+various+cancers%5BTitle%5D)+AND+%22J+Nucl+Med%22%5BJournal%5D)">68Ga-FAPI PET/CT: biodistribution and preliminary dosimetry estimate of 2 DOTA-containing FAP-targeting agents in patients with various cancers.</a> J Nucl Med. 60 (3), 386-392 (2019).</li>
<li>Loktev, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Development+of+fibroblast+activation+protein-targeted+radiotracers+with+improved+tumor+retention%5BTitle%5D)+AND+%22J+Nucl+Med%22%5BJournal%5D)">Development of fibroblast activation protein-targeted radiotracers with improved tumor retention.</a> J Nucl Med. 60, 1421-1429 (2019).</li>
<li>Giesel, F. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((FAPI-74+PET%2FCT+using+either+18F-AlF+or+cold-kit+68Ga+labeling%3A+biodistribution%2C+radiation+dosimetry%2C+and+tumor+delineation+in+lung+cancer+patients%5BTitle%5D)+AND+%22J+Nucl+Med%22%5BJournal%5D)">FAPI-74 PET/CT using either 18F-AlF or cold-kit 68Ga labeling: biodistribution, radiation dosimetry, and tumor delineation in lung cancer patients.</a> J Nucl Med. 62 (2), 201-207 (2021).</li>
<li>Jansen, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Selective+inhibitors+of+fibroblast+activation+protein+%28FAP%29+with+a+%284-quinolinoyl%29-glycyl-2-cyanopyrrolidine+scaffold%5BTitle%5D)+AND+%22ACS+Med+Chem+Lett%22%5BJournal%5D)">Selective inhibitors of fibroblast activation protein (FAP) with a (4-quinolinoyl)-glycyl-2-cyanopyrrolidine scaffold.</a> ACS Med Chem Lett. 4 (5), 491-496 (2013).</li>
<li>Tsai, T. -Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Substituted+4-carboxymethylpyroglutamic+acid+diamides+as+potent+and+selective+inhibitors+of+fibroblast+activation+protein%5BTitle%5D)+AND+%22J+Med+Chem%22%5BJournal%5D)">Substituted 4-carboxymethylpyroglutamic acid diamides as potent and selective inhibitors of fibroblast activation protein.</a> J Med Chem. 53 (18), 6572-6583 (2010).</li>
<li>Zboralski, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Preclinical+evaluation+of+FAP-2286+for+fibroblast+activation+protein+targeted+radionuclide+imaging+and+therapy%5BTitle%5D)+AND+%22Eur+J+Nucl+Med+Mol+Imaging%22%5BJournal%5D)">Preclinical evaluation of FAP-2286 for fibroblast activation protein targeted radionuclide imaging and therapy.</a> Eur J Nucl Med Mol Imaging. 49 (11), 3651-3667 (2022).</li>
<li>Greifenstein, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((3BP-3940%2C+a+highly+potent+FAP-targeting+peptide+for+theranostics+-+production%2C+validation+and+first+in+human+experience+with+Ga-68+and+Lu-177%5BTitle%5D)+AND+%22iScience%22%5BJournal%5D)">3BP-3940, a highly potent FAP-targeting peptide for theranostics - production, validation and first in human experience with Ga-68 and Lu-177.</a> iScience. 26 (12), 108541(2023).</li>
<li>Kratochwil, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((68Ga-FAPI+PET%2FCT%3A+tracer+uptake+in+28+different+kinds+of+cancer%5BTitle%5D)+AND+%22J+Nucl+Med%22%5BJournal%5D)">68Ga-FAPI PET/CT: tracer uptake in 28 different kinds of cancer.</a> J Nucl Med. 60 (6), 801-805 (2019).</li>
<li>Guglielmo, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Head-to-head+comparison+of+FDG+and+radiolabeled+FAPI+PET+A+systematic+review+of+the+literature%5BTitle%5D)+AND+%22Life%22%5BJournal%5D)">Head-to-head comparison of FDG and radiolabeled FAPI PET A systematic review of the literature.</a> Life. 13 (9), 1821(2023).</li>
<li>Chen, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Usefulness+of+%5B68Ga%5DGa-DOTA-FAPI-04+PET%2FCT+in+patients+presenting+with+inconclusive+%5B18F%5DFDG+PET%2FCT+findings%5BTitle%5D)+AND+%22Eur+J+Nucl+Med+Mol+Imaging%22%5BJournal%5D)">Usefulness of [68Ga]Ga-DOTA-FAPI-04 PET/CT in patients presenting with inconclusive [18F]FDG PET/CT findings.</a> Eur J Nucl Med Mol Imaging. 48 (1), 73-86 (2021).</li>
<li>Hicks, R. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((FAPI+PET%2FCT%3A+Will+it+end+the+hegemony+of+18F-FDG+in+oncology%5BTitle%5D)+AND+%22JNucl+Med%22%5BJournal%5D)">FAPI PET/CT: Will it end the hegemony of 18F-FDG in oncology.</a> JNucl Med. 62 (3), 296-302 (2021).</li>
<li>Kuwert, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((FAPI+PET+opens+a+new+window+to+understanding+immune-mediated+inflammatory+diseases%5BTitle%5D)+AND+%22JNucl+Med%22%5BJournal%5D)">FAPI PET opens a new window to understanding immune-mediated inflammatory diseases.</a> JNucl Med. 63 (8), 1136-1137 (2022).</li>
<li>Haberkorn, U., et al. FAP inhibitor. (International publication no. WO 2019/154886 A1). WIPO. , Available from: 
 <a target="_blank" href="https://patentscope.wipo.int/search/en/detail.jsf?docId=WO2019154886">https://patentscope.wipo.int/search/en/detail.jsf?docId=WO2019154886</a> (2019).</li>
<li>Bouscaillou, M., Dawn, A. SOFIE and GE HealthCare Enter Licensing Agreement to Develop FAP PET Radiotracers. GE Healthcare. , Available from: 
 <a target="_blank" href="https://www.gehealthcare.com/about/newsroom/press-releases/sofie-and-ge-healthcare-enter-licensing-agreement-to-develop-fap-pet-radiotracers">https://www.gehealthcare.com/about/newsroom/press-releases/sofie-and-ge-healthcare-enter-licensing-agreement-to-develop-fap-pet-radiotracers</a> (2023).</li>
<li>Meyer, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Radiation+dosimetry+and+biodistribution+of+68Ga-FAPI-46+PET+imaging+in+cancer+patients%5BTitle%5D)+AND+%22JNucl+Med%22%5BJournal%5D)">Radiation dosimetry and biodistribution of 68Ga-FAPI-46 PET imaging in cancer patients.</a> JNucl Med. 61 (8), 1171-1177 (2020).</li>
<li>Liu, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fibroblast+activation+protein+targeted+therapy+using+%5B177Lu%5DFAPI-46+compared+with+%5B225Ac%5DFAPI-46+in+a+pancreatic+cancer+model%5BTitle%5D)+AND+%22Eur+J+Nucl+Med+Mol+Imaging%22%5BJournal%5D)">Fibroblast activation protein targeted therapy using [177Lu]FAPI-46 compared with [225Ac]FAPI-46 in a pancreatic cancer model.</a> Eur J Nucl Med Mol Imaging. 49 (3), 871-880 (2022).</li>
<li>Meisenheimer, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Manual+vs+automated+68Ga-radiolabelling-A+comparison+of+optimized+processes%5BTitle%5D)+AND+%22J+Labelled+Comp+Radiopharm%22%5BJournal%5D)">Manual vs automated 68Ga-radiolabelling-A comparison of optimized processes.</a> J Labelled Comp Radiopharm. 63, 162-173 (2020).</li>
<li>Spreckelmeyer, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fully+automated+production+of+%5B68Ga%5DGa-FAPI-46+for+clinical+application%5BTitle%5D)+AND+%22EJNMMI+Radiopharm+Chem%22%5BJournal%5D)">Fully automated production of [68Ga]Ga-FAPI-46 for clinical application.</a> EJNMMI Radiopharm Chem. 5 (31), (2020).</li>
<li>Boonkawin, N., Chotipanich, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+first+radiolabeled+68Ga-FAPI-46+for+clinical+PET+applications+using+a+fully+automated+iQS-TS+synthesis+system+in+Thailand%5BTitle%5D)+AND+%22J+Chulabhorn+Royal+Acad%22%5BJournal%5D)">The first radiolabeled 68Ga-FAPI-46 for clinical PET applications using a fully automated iQS-TS synthesis system in Thailand.</a> J Chulabhorn Royal Acad. 3 (3), 180-188 (2021).</li>
<li>Nader, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((%5B68Ga%5D%2F%5B90Y%5DFAPI-46%3A+Automated+production+and+analytical+validation+of+a+theranostic+pair%5BTitle%5D)+AND+%22Nucl+Med+Biol%22%5BJournal%5D)">[68Ga]/[90Y]FAPI-46: Automated production and analytical validation of a theranostic pair.</a> Nucl Med Biol. 110-111, 37-44 (2022).</li>
<li>Da Pieve, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((New+fully+automated+preparation+of+high+apparent+molar+activity+68Ga-FAPI-46+on+a+Trasis+AiO+platform%5BTitle%5D)+AND+%22Molecules%22%5BJournal%5D)">New fully automated preparation of high apparent molar activity 68Ga-FAPI-46 on a Trasis AiO platform.</a> Molecules. 27 (3), 675(2022).</li>
<li>Alfteimi, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Automated+synthesis+of+%5B68Ga%5DGa-FAPI-46+without+pre-purification+of+the+generator+eluate+on+three+common+synthesis+modules+and+two+generator+types%5BTitle%5D)+AND+%22EJNMMI+Radiopharm+Chem%22%5BJournal%5D)">Automated synthesis of [68Ga]Ga-FAPI-46 without pre-purification of the generator eluate on three common synthesis modules and two generator types.</a> EJNMMI Radiopharm Chem. 7 (1), 20(2022).</li>
<li>Plhak, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Automated+synthesis+of+%5B68Ga%5DGa-FAPI-46+on+a+Scintomics+GRP+synthesizer%5BTitle%5D)+AND+%22Pharmaceuticals%22%5BJournal%5D)">Automated synthesis of [68Ga]Ga-FAPI-46 on a Scintomics GRP synthesizer.</a> Pharmaceuticals. 16 (8), 1138(2023).</li>
<li>Rubira, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((68Ga%5DGa-FAPI-46+synthesis+on+a+GAIA%C2%AE+module+system%3A+Thorough+study+of+the+automated+radiolabeling+reaction+conditions%5BTitle%5D)+AND+%22Appl+Radiat+Isot%22%5BJournal%5D)">68Ga]Ga-FAPI-46 synthesis on a GAIA® module system: Thorough study of the automated radiolabeling reaction conditions.</a> Appl Radiat Isot. 206, 111211(2024).</li>
<li>Mallapura,, et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Microfuidic-based+production+of+%5B68Ga%5DGa-FAPI-46+and+%5B68Ga%5DGa-DOTA-TOC+using+the+cassette-based+iMiDEV+microfluidic+radiosynthesizer%5BTitle%5D)+AND+%22EJNMMI+Radiopharm+Chem%22%5BJournal%5D)">Microfuidic-based production of [68Ga]Ga-FAPI-46 and [68Ga]Ga-DOTA-TOC using the cassette-based iMiDEV microfluidic radiosynthesizer.</a> EJNMMI Radiopharm Chem. 8 (42), (2023).</li>
<li>Rosenberg, A. J., Cheung, Y. -Y., Sollert, C., Peterson, T. E., Kropski, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fully+automated+radiosynthesis+of+%5B68Ga%5D+Ga-FAPI-46+with+cyclotron+produced+gallium%5BTitle%5D)+AND+%22EJNMMI+Radiopharm+Chem%22%5BJournal%5D)">Fully automated radiosynthesis of [68Ga] Ga-FAPI-46 with cyclotron produced gallium.</a> EJNMMI Radiopharm Chem. 8 (29), (2023).</li>
<li>Eryilmaz, K., Kilbas, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fully+automated+synthesis+of+177Lu+labelled+FAPI+derivatives+on+the+module+modular+lab-Eazy%5BTitle%5D)+AND+%22EJNMMI+Radiopharm+Chem%22%5BJournal%5D)">Fully automated synthesis of 177Lu labelled FAPI derivatives on the module modular lab-Eazy.</a> EJNMMI Radiopharm Chem. 6, 16(2021).</li>
<li>Greifenstein, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((From+automated+synthesis+to+in+vivo+application+in+multiple+types+of+cancer-clinical+results+with+%5B68Ga%5DGa-DATA5m.SA.FAPi%5BTitle%5D)+AND+%22Pharmaceuticals%22%5BJournal%5D)">From automated synthesis to in vivo application in multiple types of cancer-clinical results with [68Ga]Ga-DATA5m.SA.FAPi.</a> Pharmaceuticals. 15 (8), 1000(2022).</li>
<li>Haskali, M. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Automated+preparation+of+clinical+grade+%5B68Ga%5DGa-DOTA-CP04%2C+a+cholecystokinin-2+receptor+agonist%2C+using+iPHASE+MultiSyn+synthesis+platform%5BTitle%5D)+AND+%22EJNMMI+Radiopharm+Chem%22%5BJournal%5D)">Automated preparation of clinical grade [68Ga]Ga-DOTA-CP04, a cholecystokinin-2 receptor agonist, using iPHASE MultiSyn synthesis platform.</a> EJNMMI Radiopharm Chem. 4 (1), 23(2019).</li>
<li>Wichmann, C. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Automated+radiosynthesis+of+%5B68Ga%5DGa-PSMA-11+and+%5B177Lu%5DLu-PSMA-617+on+the+iPHASE+MultiSyn+module+for+clinical+applications%5BTitle%5D)+AND+%22J+Labelled+Comp+Radiopharm%22%5BJournal%5D)">Automated radiosynthesis of [68Ga]Ga-PSMA-11 and [177Lu]Lu-PSMA-617 on the iPHASE MultiSyn module for clinical applications.</a> J Labelled Comp Radiopharm. 64 (3), 140-146 (2021).</li>
<li>Wichmann, C. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Automated+radiosynthesis+of+%5B89Zr%5DZr-DFOSq-Durvalumab+for+imaging+of+PD-L1+expressing+tumours+in+vivo%5BTitle%5D)+AND+%22Nucl+Med+Biol%22%5BJournal%5D)">Automated radiosynthesis of [89Zr]Zr-DFOSq-Durvalumab for imaging of PD-L1 expressing tumours in vivo.</a> Nucl Med Biol. , 108351 120-121 (2023).</li>
<li>European Pharmacopoeia. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=%22European+Pharmacopoeia.+11+edn%22">European Pharmacopoeia. 11 edn</a>. , Directorate for the Quality of Medicines and HealthCare of the Council of Europe (2024).</li>
<li>Mu, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Identification%2C+characterization+and+suppression+of+side-products+formed+during+the+synthesis+of+high+dose+68Ga-DOTA-TATE%5BTitle%5D)+AND+%22Appl+Radiat+Isot%22%5BJournal%5D)">Identification, characterization and suppression of side-products formed during the synthesis of high dose 68Ga-DOTA-TATE.</a> Appl Radiat Isot. 76, 63-69 (2013).</li>
</ol>

Los autores no tienen asociaciones comerciales o fuentes de financiación que puedan dar lugar a un conflicto de intereses real o percibido en relación con este trabajo para divulgar.

Este trabajo describe la producción confiable y de alto rendimiento de [68Ga]Ga-FAPI-46 en el sintetizador MS para aplicaciones clínicas. El estudio preliminar de este protocolo probó, en la misma serie de experimentos, diferentes tiempos de reacción para la síntesis de [68Ga]Ga-FAPI-46, así como cuatro cartuchos de SPE diferentes para la purificación del producto final. Con el fin de (i) reducir la dosis de radiación para el operador y (ii) recrear las condiciones en las que se iba a desarrollar la producción rutinaria de [68Ga]Ga-FAPI-46, estos experimentos preliminares también se llevaron a cabo utilizando el sintetizador MS siempre que fue posible. Se creó una secuencia [68Ga]Ga-FAPI-46 utilizando parámetros similares utilizados para la producción de [68Ga]Ga-PSMA-11 y [68Ga]Ga-DOTA-TATE. La secuencia se basa en una programación simple y paso a paso en una hoja de cálculo de Excel y se puede editar fácilmente. Los kits y reactivos se ensamblaron solo para la primera parte de la síntesis [68Ga]Ga-FAPI-46 (elución y purificación de 68Ga; reacción de etiquetado), omitiendo los pasos finales (purificación de SPE y filtración estéril final) ya que estos experimentos preliminares se realizaron manualmente en el material crudo. Como resultado, no fue necesario instalar el cartucho de SPE posterior a la purificación (Strata X 60 mg), así como los viales de etanol, agua y solución salina en el colector 4 y el vial del producto final.
La literatura publicada sobre la producción de [68Ga]Ga-FAPI-46 describe la purificación del producto final utilizando diferentes cartuchos de SPE: OASIS HLB 30 mg sorbente23,29, OASIS HLB Plus 225 mg28, CM26,34, C18 Plus Sep-Pak30,32 y Sep-Pak Light C1831. Este trabajo compara tres de los diferentes cartuchos de SPE utilizados en la literatura (HLB 30 mg; C18 SepPak Plus Short y HLB 225 mg) con el Strata X 60 mg que se proporciona con nuestros casetes existentes para la purificación de [68Ga]Ga-PSMA-11 y [68Ga]Ga-DOTA-TATE. Hasta donde sabemos, el cartucho Strata X 60 mg SPE aún no había sido evaluado para la purificación de [68Ga]Ga-FAPI-46. Los Strata X 60 mg mostraron similares (HLB 30 mg; C18 SepPak Plus Short) o mejor rendimiento (HLB 225 mg) que otros SPE utilizados en la literatura para la purificación de [68Ga]Ga-FAPI-46, con respecto a la eficiencia de captura y elución (Tabla 3). La elución del HLB 225 mg con un mililitro extra de etanol no dio lugar a una mejoría significativa (resultados no mostrados). Se seleccionó el cartucho Strata X 60 mg para la validación de la síntesis totalmente automatizada descrita en este protocolo.
La síntesis automatizada de [68Ga]Ga-FAPI-46 descrita en el protocolo anterior se puede describir en cuatro pasos principales. El primer paso es la elución de uno o dos generadores de 68Ge/68Ga con HCl de 0,1 M y el posterior atrapamiento de [68Ga]GaCl3 en el cartucho de intercambio iónico. A esto le sigue la elución de [68Ga]Ga3+ del cartucho de intercambio iónico en el recipiente de reacción (precargado con la solución precursora que contiene 50 μg de precursor FAPI-46, 1,4 ml de agua que contiene una concentración de nivel traza de metal y 7 mg de ácido ascórbico) utilizando una solución acidificada de cloruro de sodio 5 M. El pH de la reacción de etiquetado es 3.5-4. El siguiente paso es la reacción de radiomarcaje durante la cual el reactor se calienta a 95 ° C durante 10 min para permitir la complejación del [68Ga] Ga3+ por la fracción DOTA del precursor FAPI-46. Después de enfriar la mezcla de reacción a 40 °C, el cuarto y último paso es la purificación de [68Ga]Ga-FAPI-46 que consiste en (i) atrapar y purificar la mezcla de reacción en el cartucho de SPE Strata X 60 mg posterior a la purificación, (ii) enjuagar el cartucho Strata X 60 mg SPE con agua inyectable, (iii) elución del producto final con etanol, (iv) dilución con solución salina para inyección y (v) transferencia al vial del producto final a través de un filtro ventilado esterilizante de 0,22 μm. La reacción se puede monitorear en tiempo real mediante inspección visual y lecturas de sensores (por ejemplo, temperatura, presión, vacío, lectura de radiación y temporizadores de cuenta regresiva). En la Figura 1A, B se muestra una captura de pantalla representativa de la interfaz de usuario. El perfil de radiactividad que se muestra en la Figura 2 es particularmente útil para monitorear el progreso de la síntesis al mostrar la transferencia de radiactividad a través de los pasos críticos descritos anteriormente.
Se realizaron seis ciclos de validación que superaron todas las especificaciones de control de calidad, utilizando uno o dos generadores de 68Ge/68Ga (2,41 GBq). Se completaron tres ejecuciones utilizando 68Ga de una sola elución de generador, lo que produjo 0,59-0,63 GBq de [68Ga]Ga-FAPI-46. Se completaron tres ejecuciones utilizando 68Ga eluidos de dos generadores, produciendo 1,54-1,71 GBq de [68Ga]Ga-FAPI-46. Cada carrera se completó en ~ 25 min. El método de generador único se diseñó anticipando la necesidad de que se produzcan actividades superiores en el futuro. En consecuencia, se agregaron 7 mg de estabilizador de ácido ascórbico a la mezcla de reacción para evitar la radiólisis durante el paso de radiomarcado, como lo describieron anteriormente Mu et al. para la producción de [68Ga]Ga-DOTA-TATE41. Da Pieve et al.29 y Alfteimi et al.30 también han informado de la adición de 0,3 mg de estabilizador de ácido ascórbico a la mezcla de reacción para la producción automatizada de [68Ga]Ga-FAPI-46 (Tabla complementaria S1-Archivo complementario 1). De hecho, observamos una radiólisis significativa para una síntesis de alta actividad (~ 2,8 GBq en el reactor) cuando se omitió el estabilizador de ácido ascórbico de la mezcla de reacción (Figura complementaria S3-Archivo complementario 1). Además, para evitar la radiólisis del producto final, se agregaron manualmente 5 mg de ascorbato de sodio en 1 ml de solución salina al 0,9% para inyección al vial del producto final a través del filtro esterilizador, lo que resultó en un volumen de producto final de 11 ml. Cada lote se probó hasta 3 h después de la producción y tanto las producciones de baja actividad (elución de un solo generador) como de alta actividad (elución de doble generador) demostraron una excelente estabilidad radioquímica (>95% por HPLC y TLC). Es importante destacar que la aplicación de este protocolo implica la manipulación de materiales radiactivos no sellados y sólo debe ser realizada por personal debidamente capacitado. El protocolo debe realizarse detrás de un blindaje contra la radiación, preferiblemente dentro de una celda caliente ventilada. El propósito esperado de la síntesis de [68Ga]Ga-FAPI-46 utilizando este protocolo es la administración a pacientes para diagnóstico por imágenes. Como tal, se deben seguir estrictas técnicas asépticas en todo momento. Las pruebas de control de calidad de [68Ga]Ga-FAPI-46 como se describe en el protocolo anterior son fundamentales para garantizar la calidad del producto final.
Se prevé que cualquier sitio de fabricación de [68Ga]Ga-PSMA-11 o [68Ga]Ga-DOTA-TATE en el sintetizador MS debe estar completamente equipado para preparar [68Ga]Ga-FAPI-46 utilizando el protocolo descrito aquí, con solo modificaciones menores requeridas para el uso de generadores o reactivos alternativos. Debido a la creciente demanda de [68Ga]Ga-FAPI-46 en las clínicas, el trabajo presentado aquí fue diseñado para satisfacer diversas necesidades y capacidades del sitio, desde la producción de 1-2 dosis para pacientes de [68Ga]Ga-FAPI-46 por síntesis en el método de generador único y hasta 4-5 pacientes por síntesis para el método de generador dual, dependiendo de la disponibilidad de cámaras PET.

La proteína de activación de fibroblastos (FAP) se ha convertido en un objetivo destacado para las imágenes y la terapia del cáncer1,2. La FAP es un marcador específico de fibroblastos asociados al cáncer (CAF), un tipo de célula estromal que constituye gran parte del microambiente de los cánceres sólidos. Los CAF juegan un papel clave en el crecimiento tumoral, la invasión y la metástasis3. Se encuentran en la mayoría de los tumores sólidos, incluidos los cánceres de mama, próstata y páncreas1. Al dirigirse a la FAP con inhibidores de moléculas pequeñas marcados con radionúclidos diagnósticos o terapéuticos, se pueden lograr imágenes selectivas no invasivas y terapia de estos cánceres4,5,6. Las moléculas inhibidoras de FAP (FAPI) como FAPI-02, FAPI-04, FAPI-46 y FAPI-74 marcadas con 68Ga y 18F representan una clase de agentes dirigidos a FAP basados en quinolina que fueron desarrollados por equipos del Hospital Universitario de Heidelberg y el Centro Alemán de Investigación del Cáncer (DKFZ), Alemania7,8,9,10,11, basándose en trabajos anteriores que identifican el muy prometedor andamio N-(4-quinolinoil)-glicil-(2-cianopirrolidina) para la inhibición de FAP12,13. Más recientemente, se han desarrollado inhibidores de FAP de péptido cíclico como FAP-228614 y 3BP-394015 tanto para imágenes como para terapia.
[68Ga]Ga-FAPI-04 ha demostrado su aceptación en 28 tipos diferentes de cáncer, incluyendo cáncer de mama, pulmón, próstata, páncreas y colorrectal16. Además de la ventaja práctica de no requerir ayuno y reposo9, FAPI-PET ha demostrado una ventaja diagnóstica sobre (o un papel complementario con) FDG-PET, como en el cáncer gastrointestinal, de mama, de ovario y de hígado, en las metástasis cerebrales del cáncer de pulmón17, y en los casos en que los hallazgos de FDG no son concluyentes18. Artículo 68El FAPI marcado con Ga también ha mostrado algunas aplicaciones no oncológicas interesantes en enfermedades inflamatorias relacionadas con el sistema inmunitario, como la fibrosis y la artritis reumatoide19,20. El [68Ga]Ga-FAPI-46 presentado más recientemente, una variante de [68Ga]Ga-FAPI-04, que tiene un enlace modificado al ácido dodecane tetraacético (DOTA), exhibe propiedades farmacocinéticas mejoradas y una retención tumoral mejorada, lo que da como resultado imágenes de mayor contraste que las obtenidas con [68Ga]Ga-FAPI-02 o [68Ga]Ga-FAPI-046,10. El uso de inhibidores de FAP marcados para el diagnóstico y el tratamiento está bajo patente internacional21 y el uso de [68Ga]Ga-FAPI-46 está actualmente bajo licencia22.
Las preparaciones reportadas de [68Ga]Ga-FAPI-46 utilizando ciclotrón producido por 68Ga o 68Ga eluido de un generador de 68Ge/68Ga incluyen el uso de protocolos manuales y sintetizadores automatizados. Se ha descrito un protocolo de etiquetado manual para [68Ga]Ga-FAPI-46, basado en los métodos reportados anteriormente para [68Ga]Ga-FAPI-02 y [68Ga]Ga-FAPI-0423,24. Aunque el etiquetado manual no requiere equipos especializados, este enfoque puede conducir a un aumento de la dosis de radiación del operador y a una posible variabilidad dentro de la producción25; De ahí la necesidad de automatizar la producción para aplicaciones clínicas rutinarias. Además, el uso de un sintetizador automatizado cumple mejor con las regulaciones internacionales GMP. La preparación de [68Ga]Ga-FAPI-46 se desarrolló en una variedad de sintetizadores comerciales, utilizando 68Ga de diferentes generadores26,27,28,29,30,31,32,33 o ciclotrón 68Ga34. Los detalles de estos métodos automatizados se resumen en la Tabla Suplementaria S1 (Archivo Suplementario 1). En los últimos años también se han publicado métodos de síntesis automatizados para otros inhibidores de FAP marcados con 68Ga- y 177Lu35,36.
En el Centro RAPID del Hospital Sir Charles Gairdner, hemos desarrollado y validado la preparación de [68Ga]Ga-FAPI-46 en el sintetizador iPHASE MultiSyn (en lo sucesivo, el sintetizador MS). Este sintetizador se utiliza de forma rutinaria en nuestro laboratorio, así como en otras instalaciones de producción en Australia para la preparación de radiofármacos marcados con 68Ga, 177Lu y 89Zr37,38,39. El sintetizador MS funciona descargando una lista de pasos de secuencia de Excel en su memoria interna. Esta lista de pasos de secuencia es fácil de usar y modificable. Además, el sintetizador permite intervenciones a mitad de la producción, como repetir pasos, volver a los pasos anteriores, omitir pasos y pausar la producción cuando sea necesario. Está equipado con detectores de radiación colocados en lugares estratégicos, lo que permite al usuario monitorear el proceso de producción en tiempo real. El sintetizador MS es compatible con todos los generadores comerciales de 68Ga y permite la elución de uno o dos generadores. El procedimiento descrito en este trabajo utiliza 68Ga de uno o dos generadores de 68Ge/68Ga e implica tanto la prepurificación de 68Ga como la postpurificación del producto final. Como parte de este estudio, también se evaluó el tiempo de reacción óptimo y la comparación del rendimiento de tres tipos diferentes de cartuchos de extracción en fase sólida (SPE) de pospurificación con el proporcionado en el casete del proveedor.

<table><tbody><tr><td>0.1 M Ácido clorhídrico (HCl) ultra puro</td><td>Compuesto bioquímico avanzado ABX (Radberg, Alemania)</td><td>HCl-103-G</td><td>Utilizado para la elución de generadores(s)</td></tr><tr><td>Acetato de amonio</td><td>Sigma Aldrich Pty Ltd (NSW, Australia)</td><td>A1542-250G</td><td>Se utiliza para fabricar iTLC fase móvil</td></tr><tr><td>C18 SepPak Plus corto (360 mg)</td><td>Aguas</td><td>WAT020515</td><td>Sílice post-purificación SPE</td></tr><tr><td>Rendimiento de cromolito RP-18 con tapa final 100-4.6 monolítico</td><td>Merck Pty Ltd (Victoria (Australia)</td><td>1021290001</td><td>Columna con tapa final de HPLC RP-18, utilizada para el control de calidad de HPLC</td></tr><tr><td>Calibrador de dosis</td><td>Capintec</td><td>CRC-15PET</td><td>Se utiliza para calibrar y medir la actividad de 68Ga</td></tr><tr><td>Escaneo dual-RAM&nbsp;</td><td>LabLogic Limited (VA, EE. UU.)</td> <td>Escáner SR-1A</td><td>Radio-TLC para analizar el papel iTLC</td></tr><tr><td>Precursor FAPI-46 (GMP)</td><td>Compuesto bioquímico avanzado ABX (Radberg, Alemania)</td><td>3601.0000.050</td><td>Precursor de péptidos</td></tr><tr><td>Facilidad de llenado Vial de vacío estéril (10 mL)</td><td>HUAYI iosotopes</td><td>SVV-10C</td><td>Se utiliza para muestras de esterilidad y retención</td></tr><tr><td>Facilidad de llenado Vial de vacío estéril (25 mL)</td><td>HUAYI iosotopes</td><td>SVV-25A</td><td>Se utiliza para</td></tr><tr><td>el radiomarcaje de péptidos Ga68 del producto final con prepurificación del generador</td><td>iPHASE Technologies (Melbourne, Australia)</td><td>MSR-120G-(RK-3296)Conjunto de</td> <td>reactivos&nbsp;</td></tr><tr><td>Radiomarcaje Ga68 con prepurificación del generador</td><td>iPHASE Technologies (Melbourne, Australia)</td><td>MSH-120</td><td>Hardware Cassette + conjunto de auxiliares&nbsp;</td></tr><tr><td>Sistema de cromatografía de gases (GC)</td><td>Agilent technologies (Vic, Australia)</td><td>G2630A</td><td>Se utiliza para medir el disolvente residual</td></tr><tr><td>Fuente estándar GS (Ba133)</td><td>Global Medical Solutions Pty Ltd (Australia)</td><td>D-102-19</td><td>Se utiliza para calibrar el espectrómetro gamma</td></tr><tr><td>GS Fuente estándar (Co60)</td><td>Global Medical Solutions Pty Ltd (Australia)</td><td>1559-84</td><td>Se utiliza para calibrar el espectrómetro gamma</td></tr><tr><td>Sistema de cromatografía líquida (HPLC) de alta resolución</td><td>Shimadzu Scientific Instruments (NSW, Australia)</td><td>Equipo de HPLC</td> <td>LC-20</td></tr><tr><td>Aguja de ventilación de aire hidrofóbica</td><td>Baldwin Medical (Victoria, Australia)</td><td>1088</td><td>Utilizado con vial de producto final</td></tr><tr><td>&nbsp; IGG100&nbsp;</td><td>Eckert & Productos de isótopos de Ziegler&nbsp; (Berlín, Alemania)</td><td>IGG100-65M-NT</td><td>Generador de 68Ge/68Ga</td></tr><tr><td>Jeringa de 5 mL (Jeringa Injekt luer lock solo)</td><td>B Braun (Melsungen, Alemania)</td><td>4606710V</td><td>Jeringas de polipropileno (PP)/polietileno (PE), sin látex, PVC y silicona Jeringa sin aceite utilizada para reactivos</td></tr><tr><td>Papel iTLC-SG</td><td>Agilent technologies (Vic, Australia)</td><td>SGI0001</td><td>Se utiliza para el análisis de iTLC</td></tr><tr><td>Software LabLogic (LAURA)</td><td>LabLogic Limited (VA, EE. UU.)</td><td>LAURA versión de software 6.1</td><td>Se utiliza para el análisis de radio-TLC</td></tr><tr><td>Ácido L-ascórbico Trace select</td><td>Fluka Sigma</td><td>05878-100G</td><td>Se utiliza como eliminador de radicales en la mezcla de reacción</td></tr><tr><td>Lichrosolv Acetonitrilo (ACN)</td><td>Sigma Aldrich Pty Ltd (NSW, Australia)</td><td>1.00030.2500</td><td>Se utiliza para hacer HPLC fase móvil</td></tr><tr><td>orgánica Lichrosolv Water</td><td>Sigma Aldrich Pty Ltd (NSW, Australia)</td><td>1.15333.2500</td><td>Se utiliza para fabricar el detector</td></tr> de <tr><td>metanol (MeOH)</td> de fase móvil acuosa de HPLCSigma <td>Aldrich Pty Ltd (NSW, Australia)</td><td>1060182500</td><td>Se utiliza para fabricar</td></tr> el <tr><td>detector de > de fase móvil de Na+I-</sup</td><td>LabLogic Limited (VA, EE. UU.)</td> Radiodetector de 1<td>" NaI / PMT</td><td>utilizado para radio-HPLC</td></tr><tr><td>Oasis HLB (30 mg)</td> <td>Waters (Milford, MA, USA)</td><td>WAT094225</td><td>Copolímero de postpurificación SPE</td></tr><tr><td>Oasis HLB Plus corto (225 mg)</td><td>Waters (Milford, MA, USA)</td><td>186000132</td><td>Copolímero de postpurificación SPE</td></tr><tr><td>Tiras de pH</td><td>Thermo Fisher Scientific Australia Tty Ltd</td><td>90424</td><td>Se utiliza para medir el pH del producto</td></tr><tr><td>Detector de PS&nbsp;</td><td>LabLogic Limited (VA, EE. UU.)</td><td>Radiodetector de plástico/PMT</td><td>PS utilizado para radio-TLC</td></tr><tr><td>&nbsp; Tubo Safe Lock (1,5 mL)</td><td>Eppendorf</td><td>0030 120.086</td><td>Utilizado para muestras de control de calidad</td></tr><tr><td>(+)-L-ascorbato de sodio</td><td>Merck Pty Ltd (Victoria (Australia)</td><td>11140-250G</td><td>Estabilizador del producto final</td></tr><tr><td>Solución de cloruro de sodio (NaCl) (solución salina)</td><td>Pfizer</td><td>PS111</td><td>0,9%, para inyección, grado USP</td></tr><tr><td>Sterican 100 Agujas</td><td>B Braun (Melsungen, Alemania)</td><td>4667093</td><td>Utilizado para producto final</td></tr><tr><td>Filtro de jeringa estéril (0,22 y micro; m)</td><td>Millipore Sigma (Burlington, MA, EE. UU.)</td><td>SLGSV255F</td><td>Millex-GV</td></tr><tr><td>Strata SCX (en kit de casete de hardware)</td><td>Kit de hardware interior Phenomenex de iPHASE Technologies (Melbourne, Australia)</td><td>MSH-120</td><td>SPE de sílice de prepurificación dentro de casete de hardware</td></tr><tr><td>Strata X (en kit de casete de hardware)</td><td>Kit de hardware interior Phenomenex de iPHASE Technologies (Melbourne, Australia)</td><td>MSH-120</td><td>Sílice de postpurificación SPE en el interior del casete de hardware</td></tr><tr><td>Trace Select Water para el análisis de trazas</td><td>Honeywell Riedel-de-Haen</td><td>95305-2.5L</td><td>Se utiliza para la mezcla de reacción y para preacondicionar el cartucho SPE de prepurificación</td></tr><tr><td>Ácido trifluoracético (TFA)</td><td>Sigma Aldrich Pty Ltd (NSW, Australia)</td><td>302031-10X1mL</td><td>Se utiliza para fabricar la fase móvil acuosa de HPLC</td></tr><tr><td>Jeringa de insulina ultrafina (0,5 mL)</td><td>BD</td><td>326769</td><td>Se utiliza para la dispensación de muestras de control de calidad</td></tr><tr><td>Filtro ventilado Cathivex-GV 0.22 & m, membrana de PVDF Durapore de baja unión a proteínas</td><td>Merk Millipore (Cork, Irlanda)</td><td>SLGV02505</td><td>Se utiliza para filtrar el producto final</td></tr></tbody></table>

una radiosíntesis automatizada de [68ga]ga-fapi-46 para uso clínico rutinario

An Automated Radiosynthesis of [68Ga]Ga-FAPI-46 for Routine Clinical Use

[68Ga]Ga-FAPI-46 es un nuevo trazador prometedor para la obtención de imágenes de la proteína de activación de fibroblastos (FAP) mediante tomografía por emisión de positrones (PET). Los inhibidores marcados de la FAP (FAPI) han demostrado su absorción en varios tipos de cáncer, incluidos el cáncer de mama, pulmón, próstata, páncreas y colorrectal. FAPI-PET también posee una ventaja práctica sobre FDG-PET, ya que no se requiere ayuno ni reposo. [68Ga]Ga-FAPI-46 exhibe propiedades farmacocinéticas mejoradas, retención tumoral mejorada e imágenes de mayor contraste que las [68Ga]Ga-FAPI-02 y [68Ga]Ga-FAPI-04 presentadas anteriormente. Aunque inicialmente se describió un protocolo de síntesis manual para [68Ga]Ga-FAPI-46, en los últimos años se han reportado métodos automatizados que utilizan diferentes sintetizadores comerciales.
En este trabajo, describimos el desarrollo de la síntesis automatizada de [68Ga]Ga-FAPI-46 utilizando el sintetizador iPHASE MultiSyn para aplicaciones clínicas. Inicialmente, se investigó la optimización del tiempo de reacción y la comparación del rendimiento de cuatro cartuchos diferentes de extracción en fase sólida (SPE) para la purificación del producto final. A continuación, se llevó a cabo el desarrollo y la validación de la producción de 0,6-1,7 GBq de [68Ga]Ga-FAPI-46 utilizando estos parámetros optimizados. El producto se sintetizó en 89.8 ± rendimiento corregido de decaimiento del 4.8% (n = 6) durante 25 min. El producto final cumplió con todas las especificaciones de control de calidad recomendadas y fue estable hasta 3 h después de la síntesis.

Se informa de la eficiencia de radiomarcado evaluada entre 5 y 20 min de reacción a 95 °C en la Tabla 2. Los cartuchos de purificación posterior por SPE HLB 30 mg, Strata X 60 mg y Sep-Pak C18 Plus Short 360 mg mostraron recuperaciones muy similares (94,3 ± 0,5 % corregido por decaimiento [DC]) (Tabla 3). En nuestros experimentos, la recuperación del cartucho HLB 225 mg fue mucho menor (63,8 ± 3,5 % DC).
Tabla 2: Resumen de la conversión radioquímica de la reacción cruda medida mediante cromatografía en capa fina (TLC) tras 5, 10, 15 y 20 minutos de tiempo de reacción (n = 3). Abreviaturas: TLC = cromatografía en capa fina; Exp. = experimento. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66708/66708_Table%202_Summary%20of%20the%20radiochemical...xlsx" target="_blank">Haga clic aquí para descargar esta tabla.</a>
Tabla 3: Resumen del porcentaje de recuperación y de los análisis de pureza radioquímica mediante cromatografía en capa fina (TLC) y cromatografía líquida de alta eficacia (HPLC) de [68Ga]Ga-FAPI-46 al final de la síntesis (EOS), utilizando cuatro cartuchos diferentes de extracción en fase sólida (n = 3). Abreviaturas: SPE = extracción en fase sólida; FAPI = inhibidor de la proteína de activación de fibroblastos; EOS = final de la síntesis; RSD = desviación estándar relativa; TLC = cromatografía en capa fina; HPLC = cromatografía líquida de alta eficacia. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66708/66708_Table%203.zip" target="_blank">Haga clic aquí para descargar esta tabla.</a>
El protocolo automatizado para la producción de [68Ga]Ga-FAPI-46 se desarrolló utilizando un tiempo de reacción de 10 minutos y un cartucho de extracción en fase sólida (SPE) Strata X de 60 mg. Se realizaron dos series de tres lotes de validación utilizando eluciones de un solo generador y de doble generador, obteniéndose actividades finales promedio del producto de 0,60 GBq y 1,6 GBq, respectivamente (Tabla 4). En ambas series, el [68El producto Ga]Ga-FAPI-46 superó todas las pruebas de control de calidad (Tabla 4). La estabilidad del [68El producto [⁶⁸Ga]Ga-FAPI-46 se evaluó determinando la pureza radioquímica del producto mediante análisis por TLC y HPLC (Figura 3 y Figura 4) para las seis producciones durante hasta 3 h posteriores a la síntesis y fue mayor al 98,0 ± 1,8 % (n = 3) y 99,1 ± 0,9 % (n = 3), respectivamente. En general, la síntesis de [68Ga]Ga-FAPI-46 se validó con un rendimiento corregido por decaimiento del 89,8 ± 4,8% (n = 6). La producción automatizada se está utilizando actualmente para la producción de [68Ga]Ga-FAPI-46 para apoyar ensayos clínicos.
Tabla 4: Resumen de los resultados del control de calidad para las corridas de validación de [68Ga]Ga-FAPI-46 (n = 6): a baja actividad a partir de una única elución de generador (n = 3) y a alta actividad a partir de una elución doble de generador (n = 3). <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66708/Table%204_Summary%20of%20the%20QC..._Revision%202.xlsx" target="_blank">Haga clic aquí para descargar esta tabla.</a>
<img alt="Gráfico de radiactividad frente a distancia para compuestos de \[^{68}\text{Ga}\]; resultados de separación cromatográfica." class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66708/66708fig03.jpg" data-altupdatedat="1788304762000" data-alt="Figure 3"> 
Figura 3: Cromatograma de TLC de [68Ga]Ga-FAPI-46: (aplicación de 5 µL) al final de la síntesis (EOS) utilizando papel iTLC-SG y una fase móvil de acetato de amonio 1 M/metanol (1:1 v/v). La radiactividad se midió mediante un escáner de radio-TLC equipado con un detector de radio PS Plastic, integrando cada incremento de 1 mm a una velocidad de 1 mm/s. Abreviaturas: TLC = cromatografía en capa fina; FAPI = inhibidor de la proteína de activación de fibroblastos; EOS = final de la síntesis; iTLC-SG = cromatografía en capa fina instantánea en gel de sílice. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66708/66708fig03large.jpg" target="_blank">Haga clic aquí para ver una versión más grande de esta figura.</a>
<img alt="Gráfico de cromatografía; detección UV y radiodetección de Ga-FAPI-46; intensidad del pico frente al tiempo." class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66708/66708fig04.jpg" data-altupdatedat="1788304762000" data-alt="Figure 4"> 
Figura 4: Análisis por HPLC del producto final [68Ga]Ga-FAPI-46. Columna RP-18 encapsulada, fase móvil A: ácido trifluoroacético al 0,1 %, fase móvil B: acetonitrilo puro. Gradiente: 0-0,5 min 2 % B, 0,5-10,0 min 2 %-35 % B, 10,0-12,0 min 35 % B, y 12,0-15,0 min 35 % B. La longitud de onda UV fue de 280 nm y el caudal de 2 mL/min. (A) Cromatograma UV del producto [68Ga]Ga-FAPI-46, que incluye la señal UV del ascorbato sódico a 1,0 min y los dos picos pequeños a 4,5 y 4,8 min, correspondientes a [natGa]Ga-FAPI-46 y al precursor FAPI-46, respectivamente. Los cromatogramas UV de la muestra patrón de [natGa]Ga-FAPI-46 a 10 mg/L y del precursor FAPI-46 a 10 mg/L se muestran en la Figura S2 suplementaria (Archivo suplementario 1). (B) Radiochromatograma de [68Ga]Ga-FAPI-46 (Rt [68Ga]Ga-FAPI-46 = 4,6 min - Rt [68Ga]Ga3+ libre = 1,1 min). Abreviaturas: HPLC = cromatografía líquida de alta eficacia; FAPI = inhibidor de la proteína de activación de fibroblastos; Na+Asc- = ascorbato sódico. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66708/66708fig04large.jpg" target="_blank">Haga clic aquí para ver una versión más grande de esta figura.</a>
Archivo suplementario 1: Este documento incluye: Tabla suplementaria S1 - Síntesis automatizadas y detalles de control de calidad reportados para [68Ga]Ga-FAPI-46, Sección suplementaria 1 - Experimentos preliminares: Optimización del tiempo de reacción y selección del cartucho de SPE postpurificación para la producción automatizada de [68Ga]Ga-FAPI-46 en el sintetizador radioquímico MS, Figura suplementaria S1 - Imágenes de los reactivos y configuración final para la síntesis automatizada de [68Ga]Ga-FAPI-46 en el sintetizador MS, Figura suplementaria S2 - Cromatogramas UV de [natGa]Ga-FAPI-46 y del precursor FAPI-46, y Figura suplementaria S3 - Cromatograma radioactivo de [68Ga]Ga-FAPI-46 para la radiomarcación con alta actividad (2,8 GBq) sin ácido ascórbico en el reactor. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66708/66708_Supplemental%20file_Final_14052024.zip" target="_blank">Haga clic aquí para descargar este archivo.</a>

Este trabajo describe la producción automatizada de hasta 1,7 GBq de [68Ga]Ga-FAPI-46 en el sintetizador iPHASE MultiSyn para la obtención de imágenes PET de la proteína de activación de fibroblastos.

Una radiosíntesis automatizada de [68Ga]Ga-FAPI-46 para uso clínico rutinario

[68Ga]Ga-FAPI-46 is a promising new tracer for the imaging of fibroblast activation protein (FAP) by positron emission tomography (PET). Labeled FAP ...

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Research

Investigación

JoVE Journal

Chemistry

Química

Demostramos la semi-automatizada síntesis radioquímica de [ 18 F] 3F4AP y procedimientos de control de calidad.

Síntesis radioquímica automatizada de [<sup&gt; 18</sup&gt; F] 3F4AP: un nuevo trazador de PET para imágenes de enfermedades desmielinizantes

Emisión de positrones tomografía (PET) de los sitios que participan en múltiples ensayos de investigación clínica temprana necesitan capacidades de fabricación robusto y versátil del radiotrazador. Con la radiosonda [18F] clofarabina como ejemplo, ilustramos cómo automatizar la síntesis de un radiotrazador utilizando un radiosynthesizer flexible, basada en cassette y validar la síntesis para uso clínico.

Automatización de un protocolo de emisión de positrones la tomografía (PET) radiosonda síntesis de producción clínica

Este artículo describe la radiosíntesis, la formulación y el control de calidad de una nueva sonda radiomarcada (es decir, NANOBODY NM-02 marcada con 68Ga) y su uso para la obtención de imágenes PET/CT de animales pequeños en un modelo de xenoinjerto.

Imágenes de radiosíntesis, control de calidad y tomografía por emisión de positrones en animales pequeños de 68nanomoléculas marcadas con Ga

Esta investigación describe el proceso automatizado para la producción de [68Ga]Ga-3BP-3940 con el sintetizador GAIA V2, para la obtención de imágenes PET de la proteína de activación de fibroblastos. También se presentan los resultados de las pruebas de control de calidad realizadas en tres lotes de ensayo.

Preparación automatizada de [68Ga]Ga-3BP-3940 en un módulo de síntesis para la obtención de imágenes PET del microambiente tumoral

Este video ilustrar un método rápido y eficiente de metacrilato de poli (etilenglicol), lo que permite polimerizaciones de cadena y la síntesis de hidrogel. Demostrará cómo introducir de manera similar funcionalidades metacrilamida en péptidos, detalle los métodos analíticos comunes para evaluar la eficiencia de funcionalización, proporcionar sugerencias para la solución de problemas y modificaciones avanzadas y demostrar las técnicas típicas de caracterización de hidrogel.

Funcionalización asistida por microondas de poli (etilenglicol) y los péptidos sobre resina para uso en polimerizaciones de cadena y Formación de hidrogel

Debido a su vida media radiactiva de varios días y a sus propiedades favorables de desintegración, el radiometal emisor de positrones 89Zr es extremadamente adecuado para su uso en radiofármacos basados en anticuerpos para la obtención de imágenes PET. En este protocolo se describirá la bioconjugación, radiosíntesis y aplicación preclínica de 89anticuerpos marcados con Zr.

El bioconjugación y Radiosíntesis de<sup&gt; 89</sup&gt; Los anticuerpos marcados con Zr-DFO

Los protocolos presentados describen dos técnicas basadas en el ensayo de inmunoabsorción enzimática (ELISA) para la investigación rápida de interacciones ligando-receptor: El primer ensayo permite la determinación de la constante de disociación entre ligando y receptor. El segundo ensayo permite una detección rápida de péptidos bloqueadores para las interacciones ligando-receptor.

Un ELISA basado Encuadernación y método Competencia determinación rápida interacciones ligando-receptor

Proton Transfer Reaction Time of Flight permite el análisis de compuestos orgánicos volátiles, rápido y no invasivo. Para demostrar su potencial, ponemos tres ejemplos: la fermentación láctica del yogur (monitorización on-line de bioprocesos), diferentes genotipos de manzana (cribado a gran escala) y el espacio retronasal tras beber café (análisis del espacio nasal).

PTR-ToF-MS combinado con un sistema automatizado de muestreo y análisis de datos a medida para estudios alimentarios: monitoreo de bioprocesos, tamizaje y análisis de la nariz y el espacio

La moderna difracción de polvo de rayos X de alta resolución (XRPD) en el laboratorio se utiliza como una herramienta eficiente para determinar estructuras cristalinas de productos de corrosión conocidos desde hace mucho tiempo en objetos históricos.

Difracción de polvo de rayos X en Ciencias de la Conservación: Hacia rutina de determinación de estructura cristalina de los productos de corrosión de objetos de arte del patrimonio

Este artículo presenta un protocolo para la visualización de corrientes gaseosas de una fuente de ionización ambiental utilizando fotografía de Schlieren y espectrometría de masas.

La visualización del ambiente Espectrometría de Masas con el uso de la fotografía Schlieren

Aprende la radiosíntesis automatizada de [68Ga]Ga-FAPI-46 para imagen PET en oncología usando el sintetizador iPHASE MultiSyn. Este método mejora la seguridad y cumple con normas GMP para uso clínico.

Una radiosíntesis automatizada de [⁶⁸Ga]Ga-FAPI-46 para uso clínico rutinario

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