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DOI: 10.3791/66735-v
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This article describes a sample preparation strategy for imaging early zebrafish embryos within an intact chorion using a light-sheet microscope. It focuses on the orientations of embryos at the 70% epiboly and bud stages and outlines imaging strategies for achieving cellular-scale resolution.
Se describe una estrategia de preparación de muestras para obtener imágenes de embriones tempranos de pez cebra dentro de un corion intacto utilizando un microscopio de lámina de luz. Analiza las diferentes orientaciones que adquieren los embriones dentro del corion en las etapas de epibolia y yema del 70% y detalla estrategias de imagen para obtener una resolución a escala celular en todo el embrión utilizando el sistema de lámina de luz.
A pesar de las asimetrías internas a lo largo del eje izquierda-derecha, en la mayoría de los organismos superiores, las estructuras externas como el esqueleto y el músculo se desarrollan de manera simétrica. Usando embriones de pez cebra, combinamos imágenes en vivo de alta resolución, análisis cuantitativo y modelado teórico para investigar los principios del establecimiento de la simetría. El campo depende en gran medida de diversas técnicas de microscopía para obtener imágenes de embriones en desarrollo con alta resolución espacio-temporal, seguidas de un análisis cuantitativo de las imágenes adquiridas.
Las diferentes formas de microscopía ofrecen ventajas únicas. Sin embargo, en los últimos tiempos, la microscopía de lámina de luz y la microscopía de superresolución en vivo han avanzado significativamente nuestra visión de los procesos dinámicos en el desarrollo embrionario. La microscopía confocal y multifotónica tradicional a menudo conduce a fotoblanqueo y fototoxicidad, además de un campo de visión limitado cuando se obtienen imágenes de embriones vivos.
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