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Medición de la respiración mitocondrial en fibras musculares esqueléticas humanas y de ratón medi...
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Biology
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JoVE Journal Biology
Measurement of Mitochondrial Respiration in Human and Mouse Skeletal Muscle Fibers by High-Resolution Respirometry

Medición de la respiración mitocondrial en fibras musculares esqueléticas humanas y de ratón mediante respirometría de alta resolución

Full Text
2,300 Views
08:12 min
October 4, 2024

DOI: 10.3791/66834-v

Terri A. Pietka1,2, Rita T. Brookheart1,3

1John T. Milliken Department of Medicine, Division of Nutritional Sciences and Obesity Medicine,Washington University School of Medicine, 2Nutrition and Obesity Research Center, Cellular and Molecular Biology Core,Washington University School of Medicine, 3Nutrition and Obesity Research Center, Animal Model Research Core,Washington University School of Medicine

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Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

Aquí, describimos un método integral para medir la fosforilación oxidativa mitocondrial en fibras de músculo esquelético permeabilizadas frescas a partir de músculo humano o de ratón. Este método permite la cuantificación en tiempo real de la respiración mitocondrial y la evaluación de la preferencia de combustible y la flexibilidad metabólica, al tiempo que preserva las redes mitocondriales existentes y la integridad de la membrana.

Nuestra investigación se centra en la intersección del metabolismo y las respuestas al estrés en las enfermedades metabólicas, un tema importante del programa NORD de la Universidad de Washington. A través de las sinergias entre nuestros núcleos NORD, somos capaces de abordar cuestiones complejas sobre el metabolismo nutricional y las enfermedades a través de un enfoque interdisciplinario y colaborativo. Los ensayos tradicionales de respiración mitocondrial examinaron mitocondrias aisladas.

El aislamiento de las mitocondrias lleva mucho tiempo y puede comprometer la integridad de la membrana mitocondrial externa. Además, las mitocondrias no funcionan solas, sino que forman parte de una red dinámica de adaptación metabólica celular. Nuestro protocolo mantiene esta red para proporcionar una evaluación fisiológicamente relevante de la función mitocondrial.

Nuestro enfoque se ha extendido a la identificación de reguladores de la adaptación metabólica que son importantes en la salud y la enfermedad. Las preguntas clave que nos hacemos incluyen: ¿son estos reguladores, como la proteasa del sitio-1, igualmente importantes en diferentes tipos de tejidos? ¿Y cuál es su significado fisiológico?

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Biología Número 212 metabolismo fibras musculares esqueléticas mitocondrias consumo de oxígeno ratón humano metodología respirometría

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