Name: Transferencia mitocondrial a través de nanotubos de tunelización entre células madre mesenquimales y epitelio pigmentario de la retina in vitro (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2024-10-04T13:55:00.000+00:00
Duration: 6 min 50 s
Description: Aprende la transferencia bidireccional de mitocondrias entre células madre mesenquimales y epitelio pigmentario de la retina mediante nanotubos de tunelización. Este método permite estudiar la comunicación celular y los mecanismos de rescate tisular.

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<meta charset="utf8"></head><body>Investigación de la transferencia mitocondrial en cocultivos MSC y ARPE19

<ol><li>Caprara, C., Grimm, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((From+oxygen+to+erythropoietin%3A+Relevance+of+hypoxia+for+retinal+development%2C+health+and+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Prog+Retin+Eye+Res%22%5BJournal%5D)">From oxygen to erythropoietin: Relevance of hypoxia for retinal development, health and disease.</a> Prog Retin Eye Res. 31 (1), 89-119 (2012).</li>
<li>Ferrington, D. A., Fisher, C. R., Kowluru, R. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mitochondrial+defects+drive+degenerative+retinal+diseases%5BTitle%5D)+AND+%22Trends+Mol+Med%22%5BJournal%5D)">Mitochondrial defects drive degenerative retinal diseases.</a> Trends Mol Med. 26 (1), 105-118 (2020).</li>
<li>Spees, J. L., Olson, S. D., Whitney, M. J., Prockop, D. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mitochondrial+transfer+between+cells+can+rescue+aerobic+respiration%5BTitle%5D)+AND+%22Proc+Natl+Acad+Sci+U+S+A%22%5BJournal%5D)">Mitochondrial transfer between cells can rescue aerobic respiration.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 103 (5), 1283-1288 (2006).</li>
<li>Wei, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mitochondrial+transfer+from+bone+mesenchymal+stem+cells+protects+against+tendinopathy+both+in+vitro+and+in+vivo%5BTitle%5D)+AND+%22Stem+Cell+Res+Ther%22%5BJournal%5D)">Mitochondrial transfer from bone mesenchymal stem cells protects against tendinopathy both in vitro and in vivo.</a> Stem Cell Res Ther. 14 (1), 104(2023).</li>
<li>Borcherding, N., Brestoff, J. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+power+and+potential+of+mitochondria+transfer%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">The power and potential of mitochondria transfer.</a> Nature. 623 (7986), 283-291 (2023).</li>
<li>Liu, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Intercellular+mitochondrial+transfer+as+a+means+of+tissue+revitalization%5BTitle%5D)+AND+%22Signal+Transduct+Target+Ther%22%5BJournal%5D)">Intercellular mitochondrial transfer as a means of tissue revitalization.</a> Signal Transduct Target Ther. 6 (1), 65(2021).</li>
<li>Rustom, A., Saffrich, R., Markovic, I., Walther, P., Gerdes, H. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Nanotubular+highways+for+intercellular+organelle+transport%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Nanotubular highways for intercellular organelle transport.</a> Science. 303 (5660), 1007-1010 (2004).</li>
<li>Cordero Cervantes, D., Zurzolo, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Peering+into+tunneling+nanotubes-the+path+forward%5BTitle%5D)+AND+%22Embo+j%22%5BJournal%5D)">Peering into tunneling nanotubes-the path forward.</a> Embo j. 40 (8), e105789(2021).</li>
<li>Qin, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+functions%2C+methods%2C+and+mobility+of+mitochondrial+transfer+between+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Oncol%22%5BJournal%5D)">The functions, methods, and mobility of mitochondrial transfer between cells.</a> Front Oncol. 11, 672781(2021).</li>
<li>Jiang, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Bioenergetic+crosstalk+between+mesenchymal+stem+cells+and+various+ocular+cells+through+the+intercellular+trafficking+of+mitochondria%5BTitle%5D)+AND+%22Theranostics%22%5BJournal%5D)">Bioenergetic crosstalk between mesenchymal stem cells and various ocular cells through the intercellular trafficking of mitochondria.</a> Theranostics. 10 (16), 7260-7272 (2020).</li>
<li>Domhan, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Intercellular+communication+by+exchange+of+cytoplasmic+material+via+tunneling+nano-tube+like+structures+in+primary+human+renal+epithelial+cells%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Intercellular communication by exchange of cytoplasmic material via tunneling nano-tube like structures in primary human renal epithelial cells.</a> PLoS One. 6 (6), e21283(2011).</li>
<li>Zhang, J., Zhang, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Membrane+nanotubes%3A+Novel+communication+between+distant+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+China+Life+Sci%22%5BJournal%5D)">Membrane nanotubes: Novel communication between distant cells.</a> Sci China Life Sci. 56 (11), 994-999 (2013).</li>
<li>Cheng, X. Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Human+ipscs+derived+astrocytes+rescue+rotenone-induced+mitochondrial+dysfunction+and+dopaminergic+neurodegeneration+in+vitro+by+donating+functional+mitochondria%5BTitle%5D)+AND+%22Transl+Neurodegener%22%5BJournal%5D)">Human ipscs derived astrocytes rescue rotenone-induced mitochondrial dysfunction and dopaminergic neurodegeneration in vitro by donating functional mitochondria.</a> Transl Neurodegener. 9 (1), 13(2020).</li>
<li>Ahmad, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Miro1+regulates+intercellular+mitochondrial+transport+%26+enhances+mesenchymal+stem+cell+rescue+efficacy%5BTitle%5D)+AND+%22Embo+J%22%5BJournal%5D)">Miro1 regulates intercellular mitochondrial transport & enhances mesenchymal stem cell rescue efficacy.</a> Embo J. 33 (9), 994-1010 (2014).</li>
<li>Li, C. J., Chen, P. K., Sun, L. Y., Pang, C. Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Enhancement+of+mitochondrial+transfer+by+antioxidants+in+human+mesenchymal+stem+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Oxid+Med+Cell+Longev%22%5BJournal%5D)">Enhancement of mitochondrial transfer by antioxidants in human mesenchymal stem cells.</a> Oxid Med Cell Longev. 2017, 8510805(2017).</li>
<li>Paliwal, S., Chaudhuri, R., Agrawal, A., Mohanty, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Regenerative+abilities+of+mesenchymal+stem+cells+through+mitochondrial+transfer%5BTitle%5D)+AND+%22J+Biomed+Sci%22%5BJournal%5D)">Regenerative abilities of mesenchymal stem cells through mitochondrial transfer.</a> J Biomed Sci. 25 (1), 31(2018).</li>
<li>Lin, T. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mitochondrial+transfer+of+wharton%27s+jelly+mesenchymal+stem+cells+eliminates+mutation+burden+and+rescues+mitochondrial+bioenergetics+in+rotenone-stressed+melas+fibroblasts%5BTitle%5D)+AND+%22Oxid+Med+Cell+Longev%22%5BJournal%5D)">Mitochondrial transfer of wharton's jelly mesenchymal stem cells eliminates mutation burden and rescues mitochondrial bioenergetics in rotenone-stressed melas fibroblasts.</a> Oxid Med Cell Longev. 2019, 9537504(2019).</li>
<li>Hu, X., Duan, T., Wu, Z., Xiong, Y., Cao, Z. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Intercellular+mitochondria+transfer%3A+A+new+perspective+for+the+treatment+of+metabolic+diseases%5BTitle%5D)+AND+%22Acta+Biochim+Biophys+Sin+%28Shanghai%29%22%5BJournal%5D)">Intercellular mitochondria transfer: A new perspective for the treatment of metabolic diseases.</a> Acta Biochim Biophys Sin (Shanghai). 53 (7), 958-960 (2021).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>0,25% Tripsina-EDTA</td><td>Gibco</td><td>25200-056</td><td></td></tr><tr><td>4% paraformaldehído</td><td>Solarbio</td><td>P1110</td><td></td></tr><tr><td>Placa de 6 pocillos</td><td>NEST</td><td>703001</td><td></td></tr><tr><td>tubo de centrífuga de 15 mL</td><td>BD Falcon</td><td>352097</td><td></td></tr><tr><td>placa de 24 pocillos</td><td>NEST</td><td>702001</td><td></td></tr><tr><td>células ARPE19</td><td>ATCC</td><td>CRL-2302</td><td>Líneas celulares</td></tr><tr><td>Albúmina sérica bovina (BSA)</td><td>Beyotime</td><td>ST025</td><td></td></tr><tr><td>CellTrace violeta</td><td>Invitrogen</td><td>C34557</td><td></td></tr><tr><td>Portaobjetos</td><td>NEST</td><td>801007</td><td></td></tr><tr><td>DMSO</td><td>sigma</td><td>D2650</td><td></td></tr><tr><td>DPBS</td><td>Gibco</td><td>C141905005BT</td><td></td></tr><tr><td>DMEM/F-12-GlutaMAX</td><td>Gibco</td><td>10565-042</td><td></td></tr><tr><td>Fetal Bovino Suero (FBS)</td><td>VivaCell</td><td>C04002-500</td><td></td></tr><tr><td>FluorSave Reactivo</td><td>Millipore</td><td>345789</td><td></td></tr><tr><td>MSCs</td><td>Nuwacell</td><td>RC02003</td><td>Líneas celulares</td></tr><tr><td>ncMission</td><td>Shownin</td><td>RP02010</td><td></td></tr><tr><td>Pen Strep</td><td>Gibco</td><td>15140-122</td><td></td></tr><tr><td>pCT-Mito-GFP</td><td>SBI</td><td>CYTO102-PA-1</td><td>Plásmido; Desde&nbsp; https://www.systembio.com/mitochondria-cyto-tracer-pct-mito-gfp-cmv</td></tr><tr><td>Puromicina</td><td>MCE</td><td>HY-B1743A</td><td></td></tr><tr><td>Pipeta</td><td>Axygen</td><td>TF-1000-R-S</td><td></td></tr><tr><td>Phalloidin</td><td>Invitrogen</td><td>A22287</td><td></td></tr><tr><td>Triton X-100</td><td>Solarbio</td><td>T8200</td><td></td></tr><tr><td>Placa Transwell</td><td>Corning</td><td>3470</td><td></td></tr></tbody></table>

transferencia mitocondrial a través de nanotubos de tunelización entre células madre mesenquimales y epitelio pigmentario de la retina in vitro

Mitochondrial Transfer Via Tunneling Nanotubes Between Mesenchymal Stem Cells and Retinal Pigment Epithelium In Vitro

En la Figura 1 se muestra el diagrama esquemático que ilustra el cocultivo directo de células madre mesenquimales (MSC) y células ARPE19. Las MSC, diseñadas para expresar mito-GFP, como células donantes, y las células ARPE19-mito-RFP con membranas citoplasmáticas marcadas con violeta como células receptoras, se cocultivaron en una proporción de 1:1. Después de un período de cocultivo de 24 horas, las células se tiñeron para detectar faloidina y se examinaron mediante microscopía confocal. Las poblaciones celulares resultantes incluyeron células MSC-mito-GFP, células ARPE19-mito-RFP, células ARPE19-mito-RFP que contenían mito-GFP y células MSC-mito-GFP que contenían mito-RFP. En particular, la presencia de mito-GFP en las células ARPE19 y mito-RFP en las MSC sugirió una transferencia bidireccional mitocondrial.
Los detalles específicos de la formación de TNT se presentan en la Figura 2. Estas estructuras pueden establecer conexiones intercelulares entre células del mismo tipo (Figura 2A-C), así como entre células de diferentes tipos (Figura 2D). Los nanotubos tuneleros (TNT) sirven como conductos que conectan las células adyacentes, exhibiendo una estructura de membrana distintiva rica en F-actina con extremos abiertos que facilitan la continuidad citoplasmática y el transporte de mitocondrias. Utilizando imágenes del eje Z, es evidente que los TNT no están firmemente anclados a la matriz extracelular, sino más bien suspendidos dentro del medio de cultivo, lo que los distingue de las protuberancias celulares convencionales. La transferencia mitocondrial es evidente en la Figura 3, donde las células ARPE19 positivas para violeta exhiben fluorescencia dispersa con puntos verdes indicativa de mitocondrias que se originan en MSC (Figura 3A). Las MSC violeta negativas que contienen fluorescencia de punto rojo representan la transferencia mitocondrial de las células ARPE19 (Figura 3B). La Figura 4 muestra la formación de TNT y la transferencia mitocondrial bajo imágenes de superresolución, a partir de las cuales podemos ver más detalles de la transferencia mitocondrial a través de TNT. El video 1 muestra la dinámica del transporte mitocondrial a través de TNT.
Para demostrar aún más que el requisito previo para la transferencia mitocondrial es el contacto físico, como el TNT, en lugar de la secreción y absorción mitocondrial, utilizamos un método de cocultivo previamente reportado10. Como se muestra en la Figura 5A, las células MSC y ARPE19 se sembraron en las cámaras superior e inferior de una placa transpocillo, respectivamente. Estaban separadas por un filtro con poros de 0,4 μm, que bloqueaba el contacto directo entre las MSCs y las células ARPE19, pero permitía el paso de las mitocondrias. Después de 24 h de cocultivo, se analizaron las células ARPE19 en la cámara inferior y se observó poca mito-GFP en las MSC en la cámara superior (Figura 5B). Estos resultados sugieren que la transferencia mitocondrial requiere un contacto directo entre las MSC y las células ARPE19.
Finalmente, se llevó a cabo la cuantificación de la formación de TNT y la transferencia mitocondrial, con los resultados correspondientes que se muestran en la Figura 6. Las MSC fueron significativamente más capaces de donar mitocondrias que las células ARPE19 (p = 0,0286). Estos hallazgos indican que las MSC poseen la capacidad de transferir mitocondrias a las células epiteliales pigmentarias de la retina.
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66917/66917fig01.jpg"> Figura 1: Vista esquemática del cocultivo de MSCs y células ARPE19. Las MSC que expresan células mito-GFP y ARPE19-mito-RFP marcadas con CellTrace Violet se cocultivan durante 24 h en una proporción de 1:1. Mito-GFP en células violeta+ marca la transferencia de mitocondrias de MSCs a células ARPE19, mientras que Mito-RFP en células violeta-marca la transferencia de mitocondrias de células ARPE19 a MSCs. Abreviaturas: GFP = proteína verde fluorescente; RFP = proteína fluorescente roja; MSCs = células madre mesenquimales. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66917/66917fig01large.jpg" target="_blank">Haga clic aquí para ver una versión más grande de esta figura.</a>
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66917/66917fig02.jpg"> Figura 2: Formación de TNT entre las MSCs y las células ARPE19. Las puntas de flecha blancas indican formación de TNT, las puntas de flecha verdes indican mitocondrias con mito-GFP y las puntas de flecha rojas indican mitocondrias con mito-RFP. (A,B) Formación de TNT entre células ARPE19. (C) Formación de TNT entre MSCs. (D) Formación de TNT entre MSCs y células ARPE19. Imágenes del eje Z que muestran TNTs suspendidos en medio de cultivo. Barras de escala = 25 μm. Abreviaturas: MSCs = células madre mesenquimales; TNTs = nanotubos de tunelización. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66917/66917fig02large.jpg" target="_blank">Haga clic aquí para ver una versión más grande de esta figura.</a>
<img alt="Figure 3" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66917/66917fig03.jpg"> Figura 3: Transferencia mitocondrial de MSCs a células ARPE19. (A) El círculo punteado blanco indica la transferencia mitocondrial (mito-GFP) de las MSCs a las células ARPE19, y (B) el círculo discontinuo amarillo indica la transferencia mitocondrial (mito-RFP) de las células ARPE19 a las MSCs. Barras de escala = 20 μm. Abreviatura: GFP = proteína verde fluorescente; RFP = proteína fluorescente roja; MSCs = células madre mesenquimales. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66917/66917fig03large.jpg" target="_blank">Haga clic aquí para ver una versión más grande de esta figura.</a>
<img alt="Figure 4" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66917/66917fig04.jpg"> Figura 4: Formación de TNT y transferencia mitocondrial entre MSCs y células ARPE19 mediante microscopía de superresolución. (A y B) Transporte mitocondrial de MSCs a células ARPE19. (C) Detalle de los TNT bajo imágenes de superresolución. (D) Mitocondrias verdes de MSCs presentes en células ARPE19 bajo imágenes de superresolución. Barra de escala = 5 μm. Abreviaturas: MSCs = células madre mesenquimales; TNTs = nanotubos de tunelización. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66917/66917fig04large.jpg" target="_blank">Haga clic aquí para ver una versión más grande de esta figura.</a>
<img alt="Figure 5" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66917/66917fig05.jpg"> Figura 5: Transferencia mitocondrial casi indetectable en cocultivo indirecto en el sistema transwell de MSCs y células ARPE19. (A) Vista esquemática del cocultivo de MSCs y células ARPE19 en el sistema transwell. (B) Imágenes representativas de las células ARPE19 en el fondo de la placa transpocillo después del cocultivo indirecto con MSCs durante 24 h. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66917/66917fig05large.jpg" target="_blank">Haga clic aquí para ver una versión más grande de esta figura.</a>
<img alt="Figure 6" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66917/66917fig06.jpg"> Figura 6: Cuantificación de la formación de TNT y transferencia mitocondrial. (A) formación de TNT, (B) transferencia mitocondrial. Abreviaturas: M = MSCs = células madre mesenquimales; A = células ARPE19; TNTs = nanotubos de efecto túnel; M-A = Formación de TNT entre las MSCs y las células ARPE19; M-M = Formación de TNT entre MSCs; A-A = Formación de TNT entre células ARPE19. n = 4, media ± DE, prueba U de Mann-Whitney, *p &lt; 0,05. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66917/66917fig06large.jpg" target="_blank">Haga clic aquí para ver una versión más grande de esta figura.</a>
Figura suplementaria S1: Mapeo del plásmido pCT-Mito-copGFP. Se compró Mito-GFP (CYTO102-PA-1). El citotrazador mitocondrial, pCT-Mito-GFP (CMV), se fusiona con copGFP a través de una etiqueta Cox8, lo que resulta en el marcaje de las mitocondrias con copGFP. Esta fusión de copGFP es impulsada por el promotor de CMV, lo que permite una expresión robusta en líneas celulares como HeLa, HEK293 y HT1080. Mito-RFP se modificó a partir de mito-GFP reemplazando GFP por RFP; es portador de un gen de resistencia a la puromicina. El empaquetamiento lentiviral de este plásmido es realizado por empresas especializadas. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66917/66917_Supplementary%20figure.zip" target="_blank">Haga clic aquí para descargar este archivo.</a>
Vídeo 1: Transporte mitocondrial mediado por TNT entre MSCs y células ARPE19. El TNT se genera a través del movimiento bidireccional de las células MSC y ARPE19, lo que facilita la transferencia de mitocondrias de las células MSC a las células ARPE19. Abreviaturas: MSCs = células madre mesenquimales; TNTs = nanotubos de tunelización. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66917/66917_TNT_Video.zip" target="_blank">Haga clic aquí para descargar este video.</a>

Transferencia mitocondrial a través de nanotubos de tunelización entre células madre mesenquimales y epitelio pigmentario de la retina in vitro

Mitochondrial transfer is a normal physiological phenomenon that occurs widely among various types of cells. In the study to date, the most important ...

mitochondrial-transfer-via-tunneling-nanotubes-between-mesenchymal

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Investigación

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Biología

En este video, se demuestra un método que permite la transferencia de mitocondrias marcadas con fluorescencia a células madre de glioblastoma (GSC) a través de la centrifugación. El éxito de la captación y la integración funcional de las mitocondrias del donante se confirman mediante la detección de la fluorescencia mediante microscopía confocal.

Transferencia mitocondrial asistida por centrifugación a células madre de glioblastoma

Aquí presentamos un protocolo aceptado por la comunidad en formato multimedia para inyectar subretinialmente un bolo de células EPR en ratas y ratones. Este enfoque se puede utilizar para determinar los potenciales de rescate, los perfiles de seguridad y las capacidades de supervivencia de las células EPR injertadas tras la implantación en modelos animales de degeneración de la retina.

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MitoCeption: Transferencia hermoso humano MSC mitocondrias de las células madre de glioblastoma

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Describimos un protocolo detallado para la preparación de células progenitoras fotorreceptoras derivadas de hESC post-criopreservadas y la administración sub-retiniana de estas células en ratones rd10 .

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Implantación de Ferumoxides Etiquetada células madre mesenquimales humanas en los defectos del cartílago

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Aprende la transferencia bidireccional de mitocondrias entre células madre mesenquimales y epitelio pigmentario de la retina mediante nanotubos de tunelización. Este método permite estudiar la comunicación celular y los mecanismos de rescate tisular.

Transferencia mitocondrial a través de nanotubos de tunelización entre células madre mesenquimales y epitelio pigmentario de la retina in vitro (Video) | JoVE Journal

Transferencia mitocondrial a través de nanotubos de tunelización entre células madre mesenquimales y epitelio pigmentario de la retina in vitro

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