Aislamiento de capilares retinianos y matriz subendotelial de ratón para la medición de la rigidez mediante microscopía de fuerza atómica

Se sabe que la inflamación vascular causa la degeneración de los capilares de la retina en la retinopatía diabética temprana, que es una complicación microvascular importante de la diabetes que amenaza la visión. Nuestro laboratorio está investigando si las señales mecánicas en forma de rigidez vascular pueden contribuir a estos cambios vasculares anormales de la retina en la diabetes temprana, y cómo lo hacen. Existe un creciente interés en desarrollar formas de prevenir la retinopatía diabética en la etapa temprana, con un enfoque particular en la inhibición de la inflamación de la retina que ocurre temprano en la diabetes y contribuye a la disfunción neurovascular de la retina.

Nuestro trabajo reciente indica que, además de los factores genéticos y bioquímicos, las señales mecánicas, como la rigidez vascular, pueden promover la inflamación de la retina en la diabetes temprana. Nuestro protocolo permitirá a los investigadores aislar los vasos retinianos intactos y la matriz subendotelial para posteriores mediciones de rigidez utilizando un microscopio de fuerza atómica. Estas mediciones ayudarán a determinar el papel de la rigidez vascular y la mecanobiología endotelial en el desarrollo de defectos vasculares asociados con la retinopatía diabética y la degeneración macular.

Mediante la aplicación de diminutas fuerzas de interación de nivel nano dos de Picton, la microscopía de fuerza atómica ofrece una técnica sensible, precisa y fiable para medir directamente la rigidez de muestras biológicas blandas, como vasos sanguíneos, células y métricas accesibles. Hasta donde sabemos, estas mediciones suaves son únicamente posibles utilizando un microscopio de fuerza atómica. Nuestro trabajo reciente ha demostrado que los capilares de la retina se vuelven más rígidos en la diabetes, lo que conduce a la inflamación y degeneración vascular de la retina.

Una comprensión más profunda de la regulación mecánica de la retinopatía diabética como el potencial para identificar dianas antiinflamatorias basadas en la microbiología para terapias más eficaces en el futuro.