Mediciones de microscopía de fuerza atómica de cartílago en extremidades de ajolote intactas y en regeneración

En este protocolo, mostramos cómo preparar tejido de ajolote para microscopía de fuerza atómica (AFM) y realizar mediciones de indentación en cartílago de extremidades intacto y en regeneración.

Nos interesa comprender el papel de las señales mecánicas en el proceso de regeneración. Para ello, es clave contar con herramientas fiables que permitan la medición de propiedades mecánicas como el AFM. Existen múltiples técnicas para sondear las propiedades mecánicas de los tejidos.

Por ejemplo, compartir geometría o elastografía. Sin embargo, el estándar de oro para pequeñas muestras de tejido o para sondear las propiedades mecánicas de los tejidos a escala celular sigue siendo el AFM. Uno de los pasos más desafiantes es la preparación de la muestra, ya que necesitamos garantizar la máxima integridad estructural para poder medir de manera confiable las propiedades mecánicas de las muestras con el AFM.

Creemos que nuestros hallazgos motivarán más estudios mecanicistas sobre cómo las señales mecánicas afectan a la regeneración de tejidos. Además, los resultados obtenidos pueden instruir a modelos de ingeniería de tejidos más realistas para realizar dichos experimentos.