Name: Un modelo de pancreatitis crónica obstructiva establecido mediante electrocoagulación (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-10-31T13:50:00.000+00:00
Duration: 6 min 28 s
Description: Aprende a establecer un modelo de pancreatitis crónica obstructiva mediante electrocoagulación del conducto pancreático en ratones. Este método simplificado permite evaluar cambios histológicos y marcadores bioquímicos como amilasa, bilirrubina y ácido hialurónico.

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<ol><li>Ding, W. -X., Ma, X., Kim, S., Wang, S., Ni, H. -M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Recent+insights+about+autophagy+in+pancreatitis%5BTitle%5D)+AND+%22eGastroenterology%22%5BJournal%5D)">Recent insights about autophagy in pancreatitis.</a> eGastroenterology. 2 (2), e100057(2024).</li>
<li>Van Laethem, J. L., Robberecht, P., Resibois, A., Deviere, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Transforming+growth+factor+beta+promotes+development+of+fibrosis+after+repeated+courses+of+acute+pancreatitis+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Gastroenterology%22%5BJournal%5D)">Transforming growth factor beta promotes development of fibrosis after repeated courses of acute pancreatitis in mice.</a> Gastroenterology. 110 (2), 576-582 (1996).</li>
<li>Watanabe, S., Abe, K., Anbo, Y., Katoh, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Changes+in+the+mouse+exocrine+pancreas+after+pancreatic+duct+ligation%3A+a+qualitative+and+quantitative+histological+study%5BTitle%5D)+AND+%22Arch+Histol+Cytol%22%5BJournal%5D)">Changes in the mouse exocrine pancreas after pancreatic duct ligation: a qualitative and quantitative histological study.</a> Arch Histol Cytol. 58 (3), 365-374 (1995).</li>
<li>Cáceres, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pancreatic+duct+ligation+reduces+premalignant+pancreatic+lesions+in+a+Kras+model+of+pancreatic+adenocarcinoma+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Sci.+Rep%22%5BJournal%5D)">Pancreatic duct ligation reduces premalignant pancreatic lesions in a Kras model of pancreatic adenocarcinoma in mice.</a> Sci. Rep. 10 (1), 18344(2020).</li>
<li>Andaluz, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Endoluminal+radiofrequency+ablation+of+the+main+pancreatic+duct+is+a+secure+and+effective+method+to+produce+pancreatic+atrophy+and+to+achieve+stump+closure%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+Rep%22%5BJournal%5D)">Endoluminal radiofrequency ablation of the main pancreatic duct is a secure and effective method to produce pancreatic atrophy and to achieve stump closure.</a> Sci Rep. 9 (1), 5928(2019).</li>
<li>Lerch, M. M., Gorelick, F. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Models+of+Acute+and+Chronic+Pancreatitis%5BTitle%5D)+AND+%22Gastroenterology%22%5BJournal%5D)">Models of Acute and Chronic Pancreatitis.</a> Gastroenterology. 144 (6), 1180-1193 (2013).</li>
<li>Zhang, D. Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Methods+of+a+new+chronic+pancreatitis+and+spontaneous+pancreatic+cancer+mouse+model+using+retrograde+pancreatic+duct+injection+of+dibutyltin+dichloride%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Oncol%22%5BJournal%5D)">Methods of a new chronic pancreatitis and spontaneous pancreatic cancer mouse model using retrograde pancreatic duct injection of dibutyltin dichloride.</a> Front Oncol. 12, 947133(2022).</li>
<li>Tian, C. Y., Zhao, J., Xiong, Q. Q., Yu, H., Du, H. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Secondary+iron+overload+induces+chronic+pancreatitis+and+ferroptosis+of+acinar+cells+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Mol+Med%22%5BJournal%5D)">Secondary iron overload induces chronic pancreatitis and ferroptosis of acinar cells in mice.</a> Int J Mol Med. 51 (1), 9(2023).</li>
<li>Samuel, I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+novel+model+of+severe+gallstone+pancreatitis%3A+Murine+pancreatic+duct+ligation+results+in+systemic+inflammation+and+substantial+mortality%5BTitle%5D)+AND+%22Pancreatology%22%5BJournal%5D)">A novel model of severe gallstone pancreatitis: Murine pancreatic duct ligation results in systemic inflammation and substantial mortality.</a> Pancreatology. 10 (5), 536-544 (2010).</li>
<li>Peng, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Murine+chronic+pancreatitis+model+induced+by+partial+ligation+of+the+pancreatic+duct+encapsulates+the+profile+of+macrophage+in+human+chronic+pancreatitis%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Immunol%22%5BJournal%5D)">Murine chronic pancreatitis model induced by partial ligation of the pancreatic duct encapsulates the profile of macrophage in human chronic pancreatitis.</a> Front Immunol. 13, 840887(2022).</li>
<li>Chetty, U., Gilmour, H. M., Taylor, T. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Experimental+acute+pancreatitis+in+the+rat--a+new+model%5BTitle%5D)+AND+%22Gut%22%5BJournal%5D)">Experimental acute pancreatitis in the rat--a new model.</a> Gut. 21 (2), 115-117 (1980).</li>
<li>Ielpo, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Clinical+case+report%3A+endoluminal+thermal+ablation+of+main+pancreatic+duct+for+patients+at+high+risk+of+postoperative+pancreatic+fistula+after+pancreaticoduodenectomy%5BTitle%5D)+AND+%22International+Journal+of+Hyperthermia%22%5BJournal%5D)">Clinical case report: endoluminal thermal ablation of main pancreatic duct for patients at high risk of postoperative pancreatic fistula after pancreaticoduodenectomy.</a> International Journal of Hyperthermia. 38 (1), 755-759 (2021).</li>
<li>Gorelick, F. S., Lerch, M. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Do+animal+models+of+acute+pancreatitis+reproduce+human+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Mol+Gastroenterol+Hepatol%22%5BJournal%5D)">Do animal models of acute pancreatitis reproduce human disease.</a> Cell Mol Gastroenterol Hepatol. 4 (2), 251-262 (2017).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>Clip microvascular de 16 mm</td><td>Stronger, Ningbo, China</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Sutura absorbible</td><td>Fábrica de Dispositivos Médicos Jinhuan de Yangzhou</td><td>4-0</td><td>-</td></tr><tr><td>Carprofeno</td><td>Shanghai Macklin Biochemical Co., Ltd.</td><td>C830557-5g</td><td>-</td></tr><tr><td>Tubo capilar</td><td>Tygon, EE. UU.</td><td>&nbsp; AAQ(AAD)04091</td><td>0,25 x 0,3 mm</td></tr><tr><td>Cuchillo de electrocoagulación</td><td>Shun Ye MEDICAL Equipment Co., LTD, Ningbo, China</td><td>Shun Ye BDD-YE-DF-1</td><td></td></tr><tr><td>Tijeras para ojos</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Inyección de Clorhidrato de Ketamina (Ketaset CIII)</td><td>Zoetis Inc.</td><td>S5564</td><td>-</td></tr><tr><td>Solución de tinción con azul de metileno</td><td>Solarbio, Shanghái, China</td><td>&nbsp; G1303</td><td></td></tr><tr><td>Sutura monofilament de polipropileno 4-0 no absorbente</td><td>Jinhuan, Shanghái, China</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Microscopio operador</td><td>Murzider, Guangdong, China</td><td>MSD203</td><td></td></tr><tr><td>Fórceps oftalmológicos</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Hisopo de cabeza redonda</td><td>Olga Sherer, Huaximedical, China</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Aguja de jeringuilla</td><td>Minank, Zhejiang, China</td><td></td><td>0,25 mm</td></tr><tr><td>Pinzas tisulares</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Tijeras de tejido</td><td>Corporación de Tecnología de Instrumentos Puxin de Shanghái</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Inyección de clorhidrato de xilazina</td><td>Salud Animal de Bayer</td><td>XYL-50-20</td><td>-</td></tr></tbody></table>

un modelo de pancreatitis crónica obstructiva establecido mediante electrocoagulación

An Obstructive Chronic Pancreatitis Model Established Through Electrocoagulation

Los animales se dividieron en un grupo de control (solo inyección de azul de metileno para la coagulación eléctrica) y un grupo de coagulación eléctrica, un total de 20 ratones en cada grupo. La tasa de mortalidad fue del 0% en el grupo control y del 15% en el grupo de coagulación eléctrica; La tasa de éxito de la construcción del modelo (número de ratones modelo vivos) fue del 71%. En cada grupo, se eligieron una docena de animales para la evaluación patológica. Se seleccionaron aleatoriamente tres ratones de cada grupo los días 7, 14, 21y 28 para HE, Masson y tinción inmunohistoquímica. El proceso de modelado se muestra en la Figura 1. Después de trazar con azul de metileno, electrocoagulamos la ubicación entre el conducto biliar común y la arteria pancreaticoduodenal anterosuperior en el páncreas de ratones. Si el área de electrocoagulación se selecciona en la parte media e inferior de la posición con un área inferior a un tercio, es probable que el efecto no cumpla con las expectativas. Sin embargo, si supera los 2/3, es probable que los ratones mueran dentro de las 72 h posteriores a la electrocoagulación, lo que probablemente se deba a una pancreatitis aguda grave que ocurre después de que el conducto pancreático está completamente bloqueado.
A partir de esto, concluimos que en el día 14 después de la electrocoagulación, se puede observar una imagen histológica de pancreatitis crónica en el páncreas de ratones (como se muestra en la Figura 1), que no está completamente bloqueada sino que se forma después de un bloqueo parcial del conducto pancreático. El tejido en el día 7 mostró un ligero edema tisular y el tejido no mostró evidencia de pancreatitis crónica. El día 14, la tinción de HE del tejido pancreático mostró que las células acinares pancreáticas estaban dispersas. El día 21, el grado de inflamación de las células acinares en el tejido pancreático se recuperó gradualmente. Hubo signos de reversión de los cambios patológicos en el tejido el día 28 (Figura 2). Esto podría deberse a una electrocoagulación insuficiente del conducto pancreático durante el proceso de electrocoagulación, así como al efecto compensatorio del conducto pancreático restante después de la obstrucción parcial del conducto pancreático.
La tinción de Masson mostró que el grado de fibrosis en el grupo de operación fue significativamente más grave que en el grupo de operación simulada. Las puntuaciones inmunohistoquímicas para la tinción de col-1 y AME (actina de músculo liso alfa) fueron más altas (Figura 3). La presencia de pancreatitis crónica en el tejido pancreático se observó mediante análisis patológico el día 14, y los cambios antes y después se compararon mediante tinción de HE solo en el análisis patológico posterior. A través del análisis de los indicadores bioquímicos séricos, se encontró que las concentraciones séricas de amilasa, bilirrubina y ácido hialurónico eran más altas en el grupo de coagulación eléctrica que en el grupo control, lo que indica el inicio de pancreatitis crónica (Figura 4).
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/67061/67061fig01v2.jpg"> 
Figura 1: Ilustración esquemática de pancreatitis crónica obstructiva inducida por electrocoagulación en ratones. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67061/67061fig01largev2.jpg" target="_blank">Haga clic aquí para ver una versión más grande de esta figura.</a>
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/67061/67061fig02.jpg"> 
Figura 2: Tinción de hematoxilina-eosina de los tejidos pancreáticos a lo largo del tiempo. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67061/67061fig02large.jpg" target="_blank">Haga clic aquí para ver una versión más grande de esta figura.</a>
<img alt="Figure 3" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/67061/67061fig03.jpg"> 
Figura 3: Tinción de hematoxilina-eosina y Masson e inmunohistoquímica del páncreas. Abreviaturas: Col-1 = colágeno alfa-1 tipo 1; AME = actina alfa-músculo liso. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67061/67061fig03large.jpg" target="_blank">Haga clic aquí para ver una versión más grande de esta figura.</a>
<img alt="Figure 4" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/67061/67061fig04.jpg"> 
Figura 4: Resultados representativos de los índices bioquímicos séricos de ratones en diferentes períodos. (A) Concentración sérica de ácido hialurónico (μg/L). (B) Concentración sérica de bilirrubina (mmol/L). (C) Concentración sérica de amilasa (U/dL). <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67061/67061fig04large.jpg" target="_blank">Haga clic aquí para ver una versión más grande de esta figura.</a>

Un modelo de pancreatitis crónica obstructiva establecido mediante electrocoagulación

Chronic pancreatitis (CP) is a severe inflammatory condition that can destroy the pancreas, lead to diabetes, and increase pancreatic cancer risk, ...

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Research

Investigación

JoVE Journal

Immunology and Infection

Inmunología e Infección

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Entre trasplante de órganos sólidos abdominales, injertos pancreáticos son propensos a desarrollar daño de injerto asociada a lesiones reperfusión isquemia severa, llevando eventualmente a la pérdida temprana del injerto. Este protocolo describe un modelo de trasplante de páncreas murino utilizando una técnica sin sutura del manguito, ideal para el análisis de estos principios, deletéreos daños.

Modelo murino de trasplante de páncreas mediante una técnica modificada del pun ¢ o

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La pancreatitis crónica (PC) es una enfermedad caracterizada por inflamación y fibrosis del páncreas, a menudo asociada con dolor abdominal intratable. Este artículo se centra en refinar la técnica para generar un modelo de ratón de CP mediante infusión de conductos biliares con ácido sulfónico trinitrobenceno 2,4,6 (TNBS).

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Aquí se describe un modelo de ratón de pancreatitis aguda grave. El procedimiento presentado aquí es muy rápido, simple y accesible, lo que potencialmente permite el estudio de los mecanismos moleculares y las diferentes intervenciones terapéuticas en la pancreatitis aguda de una manera conveniente.

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