Un modelo murino para el deterioro cognitivo vascular y la demencia basado en la estenosis bilateral asimétrica de la arteria carótida común guiada por aguja

Nuestro laboratorio solía identificar los nuevos tratamientos para el accidente cerebrovascular isquémico y el deterioro cognitivo vascular y la demencia. En este estudio, hemos creado un nuevo modelo de ratones para estudiar el deterioro cognitivo vascular y la demencia.

El principal desafío es que el deterioro cognitivo vascular y la demencia es un término complejo que une muchas representaciones clínicas y causas. Por lo tanto, los investigadores siempre deben tener eso en cuenta al seleccionar un modelo animal para sus experimentos.

Establecimos un nuevo modelo VCID que permite el monitoreo dinámico de las ondas cerebrales con resonancia magnética en la inflamación más lejana y el mecanismo juega un papel crítico en VCID.

Nuestro modelo es altamente confiable, permite ajustar sus parámetros según las necesidades del investigador, tiene un costo ultra bajo y también permite la resonancia magnética en animales vivos. La inflamación juega un papel fundamental en VCID, y analizaremos más a fondo el mecanismo de cómo la inflamación conduce a la demencia y cómo mejorar la enfermedad mediante la modulación de la inflamación.

[Narrador] Para comenzar, coloque los fragmentos de aguja de cuatro milímetros de largo en una placa de Petri estéril. Golpee suavemente el extremo afilado de las agujas contra una superficie dura para desafilarlas. Con un portaagujas, separe con cuidado las agujas de sus piezas de plástico y corte previamente las suturas de seda 7-0 en piezas de uno a dos centímetros de largo. Después de anestesiar al ratón, colóquelo sobre una almohadilla térmica con el lado ventral hacia arriba. Esterilice el sitio quirúrgico con una solución de Betadine que contenga un 10% de yodo y desyodé la piel con etanol al 70%. Asegúrese de que el nivel de anestesia sea adecuado con una prueba de pellizco en el dedo del pie. Ahora, haga una incisión vertical en la línea media a lo largo de la tráquea. Con microfórceps, separe suavemente las glándulas tiroides bilaterales, luego tire hacia atrás de la piel y el tejido subyacente con pequeños retractores cutáneos estériles. Bajo el microscopio, use pinzas en ángulo para exponer cuidadosamente y diseccionar sin rodeos uno de los CCA del nervio vago y la vaina circundante. Si el CCA tiende a adherirse a las pinzas, humedezca el sitio de la incisión con agua estéril o PBS. Si es necesario, coloque una pequeña jeringa de plástico debajo del cuello para apoyar la postura. Luego, con unas pinzas en ángulo, enhebre tres fragmentos de sutura de seda 7-0 precortados debajo del CCA, espaciándolos aproximadamente un milímetro de distancia. Cree un nudo doble muy suelto alrededor del CCA en uno de los fragmentos de sutura. Coloque el fragmento de aguja preparado paralelo al CCA, colocándolo dentro del nudo suelto. Apriete con cuidado el nudo primario alrededor de la aguja y el CCA hasta que se detenga el flujo sanguíneo. Luego asegúrelo con un nudo secundario. Saque suavemente la aguja para permitir que se reanude el flujo sanguíneo parcial y recorte los extremos de la sutura. Confirme que las tres bandas de sutura en el CCA estén bien atadas sin estar tan apretadas como para obstruir completamente el flujo sanguíneo. Asegúrese de que el CCA no esté pálido aguas abajo de los nudos y que las suturas estén espaciadas uniformemente. Repita el aislamiento y la ligadura del CCA en el otro lado, y confirme la distancia correcta y la restauración del flujo sanguíneo. Las imágenes bidimensionales con láser revelaron que la hipoperfusión cerebral era más pronunciada en el hemisferio izquierdo y persistió durante al menos 24 semanas después de la cirugía. La tasa de supervivencia de los ratones machos después de la cirugía durante seis semanas se registró en 81,6% con una mayor mortalidad durante la primera semana. Las imágenes de resonancia magnética ponderadas en T2 detectaron regiones hipo o hiperintensas en múltiples regiones del cerebro en ratones operados por ABCS, lo que indica una lesión cerebral. Los mapas de colores codificados direccionalmente a partir de imágenes de tensor de difusión mostraron daño estructural en ratones ABCS, en comparación con el grupo Sham. Las pruebas de laberinto de agua de Morris mostraron una latencia prolongada para escapar en ratones operados por ABCS, lo que indica discapacidades de aprendizaje significativas. La reducción del tiempo pasado en el cuadrante objetivo durante la prueba de la sonda confirmó aún más el deterioro de la memoria. Estos déficits persistieron durante al menos 24 semanas después de la cirugía.