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DOI: 10.3791/67094-v
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This study focuses on the development of a pseudostratified airway epithelium using normal human bronchial epithelial cells differentiated in an air-liquid interface (ALI). The research highlights a method for assessing the quality of this epithelial model by monitoring its biophysical properties, particularly ciliary function and membrane integrity, which are critical for understanding respiratory viral infections.
El cultivo de la interfaz aire-líquido se usa comúnmente para desarrollar epitelio pseudoestratificado de las vías respiratorias mediante la diferenciación de células epiteliales bronquiales humanas normales primarias que imitan el lado apical de las vías respiratorias pulmonares. Aquí, describimos un protocolo sencillo para determinar su calidad mediante el monitoreo de sus propiedades biofísicas, como la función ciliar y la integridad de la membrana.
Nuestra investigación tiene como objetivo medir dos propiedades biofísicas críticas del epitelio pseudoestratificado de las vías respiratorias, que se pueden obtener diferenciando células epiteliales bronquiales humanas normales en una interfaz aire-líquido. Identificamos diferentes características de diferentes virus respiratorios mediante el uso de epitelio pseudoestratificado de la vía aérea. Por ejemplo, la inflamación del citoesqueleto provocada por el virus respiratorio sincitial, que es un mecanismo no canónico de la bronquiolitis.
También identificamos que la hiperplasia de células caliciformes aumenta la replicación del SARS-CoV-2 en el epitelio de las vías respiratorias por enfermedad pulmonar obstructiva crónica. Nos centramos en dilucidar el mecanismo de modulación de la señalización del citoesqueleto impulsada por el virus respiratorio sincitial para identificar nuevas dianas terapéuticas para combatir la infección por VRS y la bronquiolitis inducida por virus. Para comenzar, tome una suspensión de células epiteliales bronquiales humanas normales, o NHBE.
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