Desarrollo y aplicación de tirosina fosfatasas reguladas por rapamicina

Nuestro trabajo se centra en el desarrollo de herramientas que regulen la actividad de las tirosina fosfatasas. Hemos aplicado el sistema regulado por rapamicina a varias fosfatasas y hemos demostrado que imparte una regulación específica y temporal de nuestra proteína de interés. Nuestro objetivo ha sido determinar los cambios morfológicos inducidos por la activación de la fosfatasa SHIP-2.

La herramienta RapR nos ha permitido determinar los efectos transitorios de la activación de la fosfatasa en las células, y hemos determinado los efectos complejos específicos posteriores de una fosfatasa involucrada en la propagación y migración celular. Además, hemos determinado comportamientos impulsados por dominios de la misma fosfatasa. Esto ha contribuido a nuestra comprensión de los mecanismos de la fosfatasa en la regulación de la morfodinámica celular y la señalización posterior.

Nuestra herramienta RapR ofrece la capacidad de regular específica y temporalmente una fosfatasa de interés. Una vez insertado en la fosfatasa, el dominio iFKBP actúa como un interruptor alostérico que, una vez unido a la rapamicina, restaura la actividad de la fosfatasa, actuando como un interruptor de encendido. También podemos utilizar el sistema regulado por rapamicina para reconstruir complejos de señalización.

Nuestros hallazgos utilizando la herramienta RapR han abierto la puerta para determinar los efectos del interactoma de SHIP-2 en su capacidad para regular la actividad celular. Descubrimos que los SHIP-2 en la unión del dominio SH2 son cruciales en la retracción celular. Con la herramienta RapR, podemos investigar más a fondo qué socios vinculantes pueden ser responsables de esta regulación.