Name: Un modelo de ratón de cicatrices hipertróficas similares a las humanas impulsadas por mecanotransducción (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2024-11-29T14:00:00.000+00:00
Duration: 5 min 54 s
Description: Descubre cómo crear un modelo murino de cicatrización hipertrófica similar a la humana mediante tensión mecánica controlada. Este método permite estudiar la mecanotransducción en la formación de tejido cicatricial excesivo.

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<ol><li>Mony, M. P., Harmon, K. A., Hess, R., Dorafshar, A. H., Shafikhani, S. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+updated+review+of+hypertrophic+scarring%5BTitle%5D)+AND+%22Cells%22%5BJournal%5D)">An updated review of hypertrophic scarring.</a> Cells. 12 (5), 678(2023).</li>
<li>Limandjaja, G. C., Niessen, F. B., Scheper, R. J., Gibbs, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hypertrophic+scars+and+keloids%3A+Overview+of+the+evidence+and+practical+guide+for+differentiating+between+these+abnormal+scars%5BTitle%5D)+AND+%22Exp+Dermatol%22%5BJournal%5D)">Hypertrophic scars and keloids: Overview of the evidence and practical guide for differentiating between these abnormal scars.</a> Exp Dermatol. 30 (1), 146-161 (2021).</li>
<li>Cao, X., Sun, L., Luo, Z., Lin, X., Zhao, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Aquaculture+derived+hybrid+skin+patches+for+wound+healing%5BTitle%5D)+AND+%22Engineered+Regeneration%22%5BJournal%5D)">Aquaculture derived hybrid skin patches for wound healing.</a> Engineered Regeneration. 4 (1), 28-35 (2023).</li>
<li>Ishise, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hypertrophic+scar+contracture+is+mediated+by+the+trpc3+mechanical+force+transducer+via+nfkb+activation%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+Rep%22%5BJournal%5D)">Hypertrophic scar contracture is mediated by the trpc3 mechanical force transducer via nfkb activation.</a> Sci Rep. 5 (1), 11620(2015).</li>
<li>Padmanabhan, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Allometrically+scaling+tissue+forces+drive+pathological+foreign-body+responses+to+implants+via+rac2-activated+myeloid+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Biomed+Eng%22%5BJournal%5D)">Allometrically scaling tissue forces drive pathological foreign-body responses to implants via rac2-activated myeloid cells.</a> Nat Biomed Eng. 7 (11), 1419-1436 (2023).</li>
<li>Kussie, H. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Avenanthramide+and+%CE%B2-glucan+therapeutics+accelerate+wound+healing+via+distinct+and+nonoverlapping+mechanisms%5BTitle%5D)+AND+%22Adv+Wound+Care+%28New+Rochelle%29%22%5BJournal%5D)">Avenanthramide and β-glucan therapeutics accelerate wound healing via distinct and nonoverlapping mechanisms.</a> Adv Wound Care (New Rochelle). 13 (4), 155-166 (2024).</li>
<li>Chen, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Disrupting+biological+sensors+of+force+promotes+tissue+regeneration+in+large+organisms%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Commun%22%5BJournal%5D)">Disrupting biological sensors of force promotes tissue regeneration in large organisms.</a> Nat Commun. 12 (1), 5256(2021).</li>
<li>Chen, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Role+of+boundary+conditions+in+determining+cell+alignment+in+response+to+stretch%5BTitle%5D)+AND+%22Proc+Natl+Acad+Sci+USA%22%5BJournal%5D)">Role of boundary conditions in determining cell alignment in response to stretch.</a> Proc Natl Acad Sci USA. 115 (5), 986-991 (2018).</li>
<li>Aarabi, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mechanical+load+initiates+hypertrophic+scar+formation+through+decreased+cellular+apoptosis%5BTitle%5D)+AND+%22FASEB+J%22%5BJournal%5D)">Mechanical load initiates hypertrophic scar formation through decreased cellular apoptosis.</a> FASEB J. 21 (12), 3250-3261 (2007).</li>
<li>Aarabi, S., Longaker, M. T., Gurtner, G. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hypertrophic+scar+formation+following+burns+and+trauma%3A+New+approaches+to+treatment%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+Med%22%5BJournal%5D)">Hypertrophic scar formation following burns and trauma: New approaches to treatment.</a> PLoS Med. 4 (9), e234(2007).</li>
<li>He, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mechanical+stretch+promotes+hypertrophic+scar+formation+through+mechanically+activated+cation+channel+piezo1%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Death+Dis%22%5BJournal%5D)">Mechanical stretch promotes hypertrophic scar formation through mechanically activated cation channel piezo1.</a> Cell Death Dis. 12 (3), 226(2021).</li>
<li>Weng, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ellipsoidal+porous+patch+with+anisotropic+cell+inducing+ability+for+inhibiting+skin+scar+formation%5BTitle%5D)+AND+%22Engineered+Regeneration%22%5BJournal%5D)">Ellipsoidal porous patch with anisotropic cell inducing ability for inhibiting skin scar formation.</a> Engineered Regeneration. 3 (3), 262-269 (2022).</li>
<li>Lawrence, J. W., Mason, S. T., Schomer, K., Klein, M. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Epidemiology+and+impact+of+scarring+after+burn+injury%3A+A+systematic+review+of+the+literature%5BTitle%5D)+AND+%22J+Burn+Care+Res%22%5BJournal%5D)">Epidemiology and impact of scarring after burn injury: A systematic review of the literature.</a> J Burn Care Res. 33 (1), 136-146 (2012).</li>
<li>Ziolkowski, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Psychosocial+and+quality+of+life+impact+of+scars+in+the+surgical%2C+traumatic+and+burn+populations%3A+A+scoping+review+protocol%5BTitle%5D)+AND+%22BMJ+Open%22%5BJournal%5D)">Psychosocial and quality of life impact of scars in the surgical, traumatic and burn populations: A scoping review protocol.</a> BMJ Open. 9 (6), e021289(2019).</li>
<li>Gauglitz, G. G., Korting, H. C., Pavicic, T., Ruzicka, T., Jeschke, M. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hypertrophic+scarring+and+keloids%3A+Pathomechanisms+and+current+and+emerging+treatment+strategies%5BTitle%5D)+AND+%22Mol+Med%22%5BJournal%5D)">Hypertrophic scarring and keloids: Pathomechanisms and current and emerging treatment strategies.</a> Mol Med. 17 (1-2), 113-125 (2011).</li>
<li>Fu, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Oxygen+atom-concentrating+short+fibrous+sponge+regulates+cellular+respiration+for+wound+healing%5BTitle%5D)+AND+%22Advanced+Fiber+Materials%22%5BJournal%5D)">Oxygen atom-concentrating short fibrous sponge regulates cellular respiration for wound healing.</a> Advanced Fiber Materials. 5 (5), (2023).</li>
<li>Fu, X., et al. Living electrospun short fibrous sponge via engineered nanofat for wound healing. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aFu%2C+X+%22Advanced+Fiber+Materials%22">Advanced Fiber Materials</a>. , (2022).</li>
<li>Fomovsky, G. M., Holmes, J. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Evolution+of+scar+structure%2C+mechanics%2C+and+ventricular+function+after+myocardial+infarction+in+the+rat%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Physiol+Heart+Circ+Physiol%22%5BJournal%5D)">Evolution of scar structure, mechanics, and ventricular function after myocardial infarction in the rat.</a> Am J Physiol Heart Circ Physiol. 298 (1), H221-H228 (2010).</li>
<li>Macintyre, L., Baird, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pressure+garments+for+use+in+the+treatment+of+hypertrophic+scars--a+review+of+the+problems+associated+with+their+use%5BTitle%5D)+AND+%22Burns%22%5BJournal%5D)">Pressure garments for use in the treatment of hypertrophic scars--a review of the problems associated with their use.</a> Burns. 32 (1), 10-15 (2006).</li>
<li>Brissett, A. E., Sherris, D. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Scar+contractures%2C+hypertrophic+scars%2C+and+keloids%5BTitle%5D)+AND+%22Facial+Plast+Surg%22%5BJournal%5D)">Scar contractures, hypertrophic scars, and keloids.</a> Facial Plast Surg. 17 (4), 263-272 (2001).</li>
<li>Chen, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Disrupting+mechanotransduction+decreases+fibrosis+and+contracture+in+split-thickness+skin+grafting%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+Transl+Med%22%5BJournal%5D)">Disrupting mechanotransduction decreases fibrosis and contracture in split-thickness skin grafting.</a> Sci Transl Med. 14 (645), eabj9152(2022).</li>
<li>Ogawa, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Clinical+applications+of+basic+research+that+shows+reducing+skin+tension+could+prevent+and+treat+abnormal+scarring%3A+The+importance+of+fascial%2Fsubcutaneous+tensile+reduction+sutures+and+flap+surgery+for+keloid+and+hypertrophic+scar+reconstruction%5BTitle%5D)+AND+%22J+Nippon+Med+Sch%22%5BJournal%5D)">Clinical applications of basic research that shows reducing skin tension could prevent and treat abnormal scarring: The importance of fascial/subcutaneous tensile reduction sutures and flap surgery for keloid and hypertrophic scar reconstruction.</a> J Nippon Med Sch. 78 (2), 68-76 (2011).</li>
<li>Chen, K., Henn, D., Gurtner, G. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Holy+grail+of+tissue+regeneration%3A+Size%5BTitle%5D)+AND+%22Bioessays%22%5BJournal%5D)">Holy grail of tissue regeneration: Size.</a> Bioessays. 44 (9), e2200047(2022).</li>
<li>Sivaraj, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Nitric+oxide-releasing+gel+accelerates+healing+in+a+diabetic+murine+splinted+excisional+wound+model%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Med+%28Lausanne%29%22%5BJournal%5D)">Nitric oxide-releasing gel accelerates healing in a diabetic murine splinted excisional wound model.</a> Front Med (Lausanne). 10, 1060758(2023).</li>
<li>Chen, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pullulan-collagen+hydrogel+wound+dressing+promotes+dermal+remodelling+and+wound+healing+compared+to+commercially+available+collagen+dressings%5BTitle%5D)+AND+%22Wound+Repair+Regen%22%5BJournal%5D)">Pullulan-collagen hydrogel wound dressing promotes dermal remodelling and wound healing compared to commercially available collagen dressings.</a> Wound Repair Regen. 30 (3), 397-408 (2022).</li>
<li>Mascharak, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Preventing+engrailed-1+activation+in+fibroblasts+yields+wound+regeneration+without+scarring%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Preventing engrailed-1 activation in fibroblasts yields wound regeneration without scarring.</a> Science. 372 (6540), eaba2374(2021).</li>
<li>Fischer, K. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Protocol+for+the+splinted%2C+human-like+excisional+wound+model+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Bio+Protoc%22%5BJournal%5D)">Protocol for the splinted, human-like excisional wound model in mice.</a> Bio Protoc. 13 (3), e4606(2023).</li>
<li>Wang, P. H., Huang, B. S., Horng, H. C., Yeh, C. C., Chen, Y. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Wound+healing%5BTitle%5D)+AND+%22J+Chin+Med+Assoc%22%5BJournal%5D)">Wound healing.</a> J Chin Med Assoc. 81 (2), 94-101 (2018).</li>
<li>Azmat, C. E. Martha Council. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Wound+closure+techniques%5BTitle%5D)+AND+%22Statpearls%22%5BJournal%5D)">Wound closure techniques.</a> Statpearls. , StatPearls Publishing LLC. Treasure Island (FL). (2024).</li>
<li>Tunca, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cryosurgery+to+remove+perichondrium+for+the+rabbit+ear+hypertrophic+scar+model%3A+A+simplified+method%5BTitle%5D)+AND+%22Acta+Dermatovenerol+Alp+Pannonica+Adriat%22%5BJournal%5D)">Cryosurgery to remove perichondrium for the rabbit ear hypertrophic scar model: A simplified method.</a> Acta Dermatovenerol Alp Pannonica Adriat. 28 (2), 57-59 (2019).</li>
<li>Sun, Q., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+effects+of+timing+of+postoperative+radiotherapy+on+hypertrophic+scar+in+a+rabbit+model%5BTitle%5D)+AND+%22Med+Sci+Monit%22%5BJournal%5D)">The effects of timing of postoperative radiotherapy on hypertrophic scar in a rabbit model.</a> Med Sci Monit. 26, e921263(2020).</li>
<li>Zu, W., Jiang, B., Liu, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Establishment+of+a+long-term+hypertrophic+scar+model+by+injection+of+anhydrous+alcohol%3A+A+rabbit+model%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Exp+Pathol%22%5BJournal%5D)">Establishment of a long-term hypertrophic scar model by injection of anhydrous alcohol: A rabbit model.</a> Int J Exp Pathol. 102 (2), 105-112 (2021).</li>
<li>Molina, E. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Angiogenic+gene+characterization+and+vessel+permeability+of+dermal+microvascular+endothelial+cells+isolated+from+burn+hypertrophic+scar%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+Rep%22%5BJournal%5D)">Angiogenic gene characterization and vessel permeability of dermal microvascular endothelial cells isolated from burn hypertrophic scar.</a> Sci Rep. 12 (1), 12222(2022).</li>
<li>Li, Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+highly+simulated+scar+model+developed+by+grafting+human+thin+split-thickness+skin+on+back+of+nude+mouse%3A+The+remodeling+process%2C+histological+characteristics+of+scars%5BTitle%5D)+AND+%22Biochem+Biophys+Res+Commun%22%5BJournal%5D)">A highly simulated scar model developed by grafting human thin split-thickness skin on back of nude mouse: The remodeling process, histological characteristics of scars.</a> Biochem Biophys Res Commun. 526 (3), 744-750 (2020).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>Vaso de precipitados PYREX Griffin de 100 mL</td><td>Milipore Signma</td><td>CLS1000100</td><td></td></tr><tr><td>Aesculap Exacta mini recortadora Aesculap</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>AutoClip System</td><td>Fine Surgical Instruments</td><td>12020-00</td><td></td></tr><tr><td>BD marca BD hisopos con alcohol isopropílico</td><td>Fisher Scientific</td><td>13-680-63</td><td></td></tr><tr><td>Buprenorfina SR (0,5 mg/mL)</td><td>Buprenex, Indivior Inc.</td><td>12496-0757-1</td><td></td></tr><tr><td>C57/BL6 hembras (6&ndash; 8 semanas de edad)</td><td>The Jackson Laboratory</td><td>000664</td><td></td></tr><tr><td>Gasa estéril Covidien</td><td>Fisher Scientific</td><td>2187</td><td></td></tr><tr><td>Covidien TelfaTM almohadillas no adherentes</td><td>Fisher Scientific, Covidien</td><td>1961</td><td></td></tr><tr><td>Regla quirúrgica dental</td><td>DoWell Dental Products</td><td>S1070</td><td></td></tr><tr><td>Crema depilatoria (Nair Hair Remover Lotion)</td><td>Church& Dwight, CVS</td><td>339823</td><td></td></tr><tr><td>Etanol 70% solución</td><td>Fisher Scientific</td><td>64-17-5</td><td></td></tr><tr><td>Excel</td><td>Microsoft Cooperation</td><td>Microsoft.com</td><td>programa de software&nbsp;</td></tr><tr><td>ImageJ</td><td>ImageJ, Wayne Rasband</td><td>imagej.net</td><td>programa de software&nbsp;</td></tr><tr><td>Sistema de anestesia inhalatoria</td><td>VetEquip</td><td>922130</td><td></td></tr><tr><td>Tijeras de iris 4&frac12; pulg. inoxidable</td><td>McKesson</td><td>43-2-104</td><td></td></tr><tr><td>Isoflurano, USP</td><td>Dechra Productos Veterinarios</td><td>17033-094-25</td><td></td></tr><tr><td>Kaka industrial MUB-1</td><td>Kaka Industrial&nbsp;</td><td>173207</td><td>Solo es necesario si no hay un espacio de fabricación o un taller de fabricación disponible&nbsp;</td></tr><tr><td>Expansor Palatino Rápido Leone - 13 mm</td><td>Great Lakes Dental Technologies</td><td>125-004</td><td>La llave necesaria para expandir y ajustar el dispositivo vendrá con este producto en la caja</td></tr><tr><td>Paño repelente a líquidos 75 x 90 cm con orificio adhesivo 6 x 9 cm</td><td>Omnia S.p.A.</td><td>12.T4362</td><td></td></tr><tr><td>Medequip Depot Seda Negra Trenzada Sutr 6-0 Rx</td><td>Medequip Depot D707N, Fisher Scientific</td><td>NCO835822</td><td></td></tr><tr><td>Portaagujas de 5 pulgadas con mordazas dentadas</td><td>McKesson</td><td>43-2-842</td><td></td></tr><tr><td>Prisma 9</td><td>GraphPad Holdings, LLC</td><td>graphpad.com</td><td>programa de software&nbsp;</td></tr><tr><td>Pomada oftálmica Puralube</td><td>Dechra, NDC</td><td>17033-211-38</td><td></td></tr><tr><td>R studio Desktop</td><td>RStudio PBC</td><td>rstudio.com</td><td>programa de software&nbsp;</td></tr><tr><td>Rotulador cutáneo quirúrgico</td><td>McKesson</td><td>19-1451_BX</td><td></td></tr><tr><td>Tegaderm, 3 M</td><td>VWR</td><td>56222-191</td><td>apósito adhesivo de espuma&nbsp;</td></tr><tr><td>Almohadilla térmica Thermo-peep</td><td>K& H, pinza de tejido amazónico</td><td></td><td></td></tr><tr><td>4&frac34; pulg. inoxidable 1 x 2 dientes</td><td>Mckesson</td><td>43-2-775</td><td></td></tr><tr><td>Vetbond (3 M)</td><td>Saint Paul, MN</td><td>1469SB</td><td></td></tr></tbody></table>

un modelo de ratón de cicatrices hipertróficas similares a las humanas impulsadas por mecanotransducción

A Mouse Model of Mechanotransduction-driven, Human-like Hypertrophic Scarring

Para demostrar claramente el uso efectivo del protocolo HTS e identificar resultados "positivos" exitosos, se estableció el modelo como se muestra en la Figura 3A. En el estudio representativo, hubo dos grupos: No Stretch Control (n = 6) y el grupo Mechanical Stretch HTS (n = 6) donde se indujeron niveles de tensión mecánica similares a los humanos a través de la incisión para generar un HTS, como se ve en la Figura 3B, C. Dentro del plan experimental dado en la Figura 3A-C, se tomó una fotografía macroscópica de la cicatriz en las vainas 5, 9, 15 y 19. Las cicatrices se trazaron con ImageJ y se analizó para determinar el ancho promedio de las cicatrices en los diferentes puntos de tiempo (Figura 3D). Los anchos promedio de las cicatrices se graficaron en función del tiempo y entre los grupos de la Figura 3E. Después de la aplicación de tensión mecánica en el POD 5, donde las cicatrices no fueron significativamente diferentes entre el Estiramiento y el Control, el Grupo de Estiramiento exhibió cicatrices significativamente más anchas que el Control, alcanzando un ancho de pico de 0,99 mm en el POD 9 (p = 0,045). Este ancho de cicatriz significativamente mayor en comparación con el control continuó en POD 15 (p = 0,043) y 19 (p = 0,045). Se recomienda que la fotografía macroscópica solo se tome en los días en que se debe quitar el dispositivo HTS (es decir, el dispositivo HTS ha alcanzado la expansión máxima y debe volver a colocarse o durante la explantación) ya que el dispositivo bloquea la fotografía adecuada de la cicatriz. En este protocolo, las imágenes y los análisis de la anchura de la cicatriz en múltiples puntos de tiempo ofrecen al lector una visión más clara de la progresión de la herida del modelo.
El análisis del tejido HTS se puede realizar de varias maneras, como la tinción de IHC para marcadores fibróticos, la tinción de H&amp;E y tricrómico para examinar las áreas histológicas de la cicatriz, la tinción de rojo picrosirius para evaluar la arquitectura de colágeno de las cicatrices y otros métodos para el análisis de heridas, todos los cuales han sido utilizados por el laboratorio históricamente6, 8,21,24,25,27,28 (Figura 4). La Figura 4 muestra las características histológicas del tejido HTS, como tejido cicatricial elevado (Figura 4A), pérdida de estructuras anexiales y folículos pilosos (Figura 4B), alineación de las fibras de colágeno en la dirección de la carga mecánica (Figura 4C) y verticilos de colágeno (Figura 4F). La Figura 4 también muestra la tinción inmunohistoquímica de la densidad y la vasculatura de mastocitos del HTS murino y lo compara con el tejido humano de HTS (Figura 4D, E, G, H). Además, el análisis de la cicatriz HTS se puede realizar con análisis de una sola célula si el tejido se recolecta, se prepara y se lleva a un núcleo bioinformático inmediatamente después de la escisión.
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/67156/67156fig01.jpg"> 
Figura 1: Preparación del dispositivo HTS y del dorso del ratón. (A) Proceso de modificación de un expansor palatino de 13 mm para crear el dispositivo HTS, (1) mostrando la estructura inicial del expansor, (2) flexión de los brazos 90° hacia arriba para los brazos superiores y hacia abajo para los brazos inferiores cuando el dispositivo está plano, (3) resultado de la flexión inicial, donde los brazos ahora están perfectamente paralelos con el cuerpo del dispositivo, (4) flexión de los brazos para formar el dispositivo final con mediciones; Cada uno de los brazos debe doblarse 90° en la página como se ve en el (5) dispositivo final. (B) El dispositivo HTS completamente ensamblado desde varios ángulos, tanto no extendido como extendido. (C) Pasos secuenciales para preparar el dorso del ratón: (1) estado inicial con pelaje, (2) después del afeitado y (3) después de la aplicación de pasta depilatoria. (D) Procedimiento para crear la incisión dorsal: (1) marcar el sitio de la incisión con una guía de 2 cm, (2) hacer la incisión, (3) suturar la herida, (4) aplicar la gasa Telfa y (5) asegurar con apósito adhesivo. (E) Fotografía macroscópica de (1) incisión, y (2) después de suturar la incisión cerrada. Abreviatura: HTS = cicatrización hipertrófica. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67156/67156fig01large.jpg" target="_blank">Haga clic aquí para ver una versión más grande de esta figura.</a>
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/67156/67156fig02.jpg"> 
Figura 2: Posicionamiento y estiramiento del dispositivo HTS. (A) Ilustración de la posición correcta del dispositivo HTS en el dorso del ratón, asegurando una alineación adecuada con el sitio de la incisión. La imagen de la izquierda muestra la ubicación del dispositivo vista desde una posición posterior. La imagen de la derecha muestra la ubicación del dispositivo vista lateralmente. (B) Ilustración de la fijación del dispositivo HTS: (1) colocación inicial, (2) ubicación de las suturas, (3) ubicación de las grapas cutáneas. (C) Demostración de estiramiento del dispositivo HTS con la clave de dispositivo HTS etiquetada: (1) configuración inicial, (2) aplicación de tensión, (3) el estado expandido final diseñado para aplicar una tensión mecánica constante a través de la incisión en curación para promover la formación de cicatrices hipertróficas, 2 mm de expansión aplicada. (D) Fotografía macroscópica de la aplicación de tensión al dispositivo HTS, con la llave del dispositivo HTS etiquetada. (E) Fotografía macroscópica del ratón completamente vendado. Abreviatura: HTS = cicatrización hipertrófica. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67156/67156fig02large.jpg" target="_blank">Haga clic aquí para ver una versión más grande de esta figura.</a>
<img alt="Figure 3" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/67156/67156fig03.jpg"> 
Figura 3: Aplicación de tensión mecánica para desarrollar cicatrices. (A) Cronología del procedimiento experimental desde la creación de la incisión (POD 0) hasta la aplicación de tensión mecánica (POD 4) y a través del período de estiramiento (POD 5 a POD 19), culminando con la explantación de tejido (POD 19). (B) Ilustración de los dos grupos: grupos No Stretch Control y Mechanical Stretch HTS. (C) Esquema transversal que representa la diferencia en la respuesta del tejido entre los grupos No Stretch Control y Stretch HTS. (D) Imágenes macroscópicas representativas de las cicatrices de los grupos No Stretch Control y Stretch HTS en los días postoperatorios (POD 5, 9, 15 y 19), con las cicatrices hipertróficas trazadas en una línea punteada amarilla. (E) Análisis cuantitativo del ancho promedio de la cicatriz a lo largo del tiempo, demostrando diferencias significativas en el desarrollo de la cicatriz entre los grupos Sin estiramiento y Estiramiento, con barras de error que representan la desviación estándar. Las diferencias significativas están marcadas con asteriscos (*). El análisis estadístico se realizó mediante análisis de varianza de dos vías (ANOVA). Los valores de *p &lt; 0,05 se consideraron estadísticamente significativos. Abreviaturas: HTS = cicatrización hipertrófica; POD = día postoperatorio. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67156/67156fig03large.jpg" target="_blank">Haga clic aquí para ver una versión más grande de esta figura.</a>
<img alt="Figure 4" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/67156/67156fig04.jpg"> 
Figura 4: Histología de la cicatriz. Esta histología de cicatriz murina ha sido recolectada después de 2 semanas de estrés mecánico en nuestro trabajo previamente publicado9,26. (A) La imagen más grande muestra la imagen histológica de H&amp;E de la sección transversal de la cicatriz, mientras que la parte inferior derecha es una imagen histológica tricrómica de la sección transversal de la cicatriz, que muestra cómo se eleva la región de la cicatriz. (B) La imagen más grande muestra imágenes histológicas de H&amp;E de la sección transversal de la cicatriz, mientras que la parte inferior derecha es una imagen histológica tricrómica de la sección transversal de la cicatriz, que muestra cómo la región de la cicatriz demuestra una pérdida de estructuras anexiales y folículos pilosos. (C) La imagen más grande muestra una imagen roja picrosirius de la sección transversal de la cicatriz, mientras que la parte inferior derecha es una imagen histológica tricrómica de la sección transversal de la cicatriz, que muestra fibras de colágeno alineadas en la dirección de la carga mecánica. (D) La imagen más grande muestra imágenes de la inmunohistoquímica de CD117 en tejido murino de HTS, mientras que la parte inferior derecha es imágenes de la inmunohistoquímica de CD117 en tejido humano, lo que demuestra una densidad de mastocitos comparable a la del tejido humano de HTS. (E) La imagen más grande muestra imágenes de la inmunohistoquímica CD31 de la vasculatura en tejido murino de HTS, mientras que la parte inferior derecha es imágenes de la inmunohistoquímica de CD117 en tejido humano, lo que demuestra una densidad de mastocitos comparable a la del tejido HTS humano. (F) Los verticilos de colágeno, que se ven en cicatrices hipertróficas humanas maduras en la imagen de la parte inferior derecha, también se ven en cicatrices murinas cargadas después de 24 semanas en la región encerrada en círculos en las imágenes murinas de H&amp;E. (G) Imágenes macroscópicas representativas de las cicatrices de un grupo de control (Incisión + Sin estiramiento), un grupo de control de estiramiento (Sin incisión + Estiramiento) y un grupo de estiramiento HTS. (H) Muestra inmunohistoquímica comparando el grupo de control (incisión + sin estiramiento) y el grupo de estiramiento HTS. Utilizando una tinción conjunta para los marcadores fibróticos pEPF, aSMA y YAP con DAPI, se produce un aumento de los marcadores fibróticos en el grupo HTS. A-F han sido adaptados de Aarabi, S. et al.9. G,H han sido adaptados de Mascharak, S. et al. Reimpreso con permiso de FASEB26. Abreviaturas: HTS = cicatrización hipertrófica; H&amp;E = hematoxilina y eosina; pEPF = Fibroblasto engrailed-positivo; aSMA = actina del músculo liso alfa; YAP = Proteína asociada a Yes; DAPI = 4',6-diamidino-2-fenilindol. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67156/67156fig04large.jpg" target="_blank">Haga clic aquí para ver una versión más grande de esta figura.</a>

Un modelo de ratón de cicatrices hipertróficas similares a las humanas impulsadas por mecanotransducción

Hypertrophic scarring (HTS) is an abnormal process of wound healing that results in excessive scar tissue formation. Over the past decade, we have ...

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Bioingeniería

Constricción de la aorta transversal (TAC) en el ratón es un modelo de uso experimental para estudiar mecanismos que subyacen a la hipertrofia cardíaca y el desarrollo de insuficiencia cardíaca. Aquí se describen los procedimientos para contraer la aorta para crear un grado de reproducibilidad de la hipertrofia cardiaca en ratones.

Constricción de la aorta transversa en ratones

Un modelo murino de cicatrización de heridas cutáneas que se puede utilizar para evaluar los compuestos terapéuticos en los entornos fisiológicos y fisiopatológicos.

Modelo murino de Curación de Heridas

Durante el desarrollo de los mamíferos, las heridas tempranas de la piel durante la gestación se curan sin cicatriz. Aquí detallamos un modelo fiable y reproducible de cicatrización de heridas fetales sin cicatrices en el dorso cutáneo de embriones de ratón E16.5 (sin cicatrices) y E18.5 (cicatrizantes).

Un ratón fetal Modelo de la piel de la reparación de heridas sin cicatrices

El objetivo de este protocolo es describir paso a paso la técnica de invasión mínima constricción aórtica transversal (TAC) en ratones. Por la eliminación de la intubación y la ventilación que son obligatorios para el procedimiento estándar utilizado, mínimamente invasiva TAC simplifica el procedimiento operativo y reduce el esfuerzo puesto en el animal.

Técnica mínimamente invasiva constricción aórtica transversal en ratones para la inducción de la hipertrofia Ventricular izquierda

Aquí presentamos un protocolo para la inducción de la criocauterización ventricular izquierdo seguido de la implantación de un parche de músculo cardiaco, derivado de los cardiomiocitos células iPS humanas en un modelo del conejillo de Indias.

Implantación de parches hiPSC derivado de músculo cardiaco después de lesión del miocardio en un modelo del conejillo de Indias

Aquí se describe un protocolo paso a paso de la desbanding aorta quirúrgica en el modelo bien establecido de ratones de constricción aórtica. Este procedimiento no sólo permite estudiar los mecanismos que son la base del remodelado inverso del ventrículo izquierdo y la regresión de la hipertrofia, sino también probar nuevas opciones terapéuticas que podrían acelerar la recuperación miocárdica.

Estudio de la remodelación inversa del ventrículo izquierdo por desbanding aórtico en roedores

Este protocolo describe el uso de aglomeración macromolecular para crear un modelo de tejido cicatricial humano in vitro que se asemeja a condiciones in vivo. Cuando se cultivan en un ambiente macromolecular lleno de gente, los fibroblastos de la piel humana exhiben fenotipos, bioquímica, fisiología y características funcionales que se asemejan al tejido cicatricial.

Modelo In Vitro de Cicatrices Hipertróficas Cutáneas Humanas usando Crowding Macromolecular

El objetivo de este estudio fue desarrollar un modelo murino de cicatrización de la quemadura. Se indujo una quemadura térmica en la piel dorsal de los ratones utilizando una plantilla de latón precalentada. El tejido quemado fue desbridado y superpuesto con un injerto de piel cosechado de la cola de un ratón donante genéticamente similar.

Un modelo murino de una herida de quemadura reconstruida con un injerto de piel alogénico

En este trabajo se presenta un modelo animal de fibrosis inducida por transición endotelial-mesenquimatosa, como se observa en defectos cardíacos congénitos como la estenosis aórtica crítica o el síndrome del corazón izquierdo hipoplásico, que permite la evaluación histológica detallada del tejido, la identificación de vías de señalización reguladoras y la prueba de opciones de tratamiento.

Un modelo de trasplante de corazón de rata heterotópico neonatal para el estudio de la transición endotelial a mesenquimal

Este artículo describe un protocolo detallado para producir un endometrio delgado fiable y reproducible con una tasa de mortalidad muy baja y adherencias intrauterinas mínimas mediante la inyección de etanol al 95% en el útero de ratón en 1-3 minutos.

Establecimiento de un modelo de ratón de endometrio delgado

Descubre cómo crear un modelo murino de cicatrización hipertrófica similar a la humana mediante tensión mecánica controlada. Este método permite estudiar la mecanotransducción en la formación de tejido cicatricial excesivo.

Un modelo de ratón de cicatrices hipertróficas similares a las humanas impulsadas por mecanotransducción

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