Name: Medición del dolor en la articulación temporomandibular mediante ensayos de fuerza de mordida y filamentos de von Frey en ratones (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2024-09-13T14:50:00.000+00:00
Duration: 6 min 37 s
Description: Aprende a medir el dolor en la articulación temporomandibular mediante ensayos de fuerza de mordida y filamentos de von Frey en ratones. Este protocolo estandarizado evalúa comportamientos dolorosos inducidos por CFA.

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Agradecemos a los colegas del laboratorio Chen por estimular las discusiones. Agradecemos el apoyo de Thach-Vu Ho por ayudar con las imágenes del ratón. Este estudio fue financiado por la subvención R01DE033511 (J.C.) del Instituto Nacional de Investigación Dental y Craneofacial (NIDCR).

Todos los procedimientos con animales fueron aprobados por el Comité Institucional de Cuidado y Uso de Animales de la Universidad del Sur de California (IACUC). En este estudio se utilizaron ratones hembra C57BL/6 de ocho semanas de edad con un peso corporal de entre 19 y 20 g. Los ratones se alojaron en jaulas estándar en condiciones ambientales con humedad regulada y ciclos de luz/oscuridad de 12 horas. Los reactivos y equipos utilizados se enumeran en la Tabla de Materiales.
1. Inyección intraarticular de CFA para inducir TMJOA
<ol>
	<li>Anestesiar a los ratones con isoflurano utilizando isoflurano al 3% para la inducción y al 1%-2% para el mantenimiento (siguiendo los protocolos aprobados institucionalmente). Use una nariz durante todo el procedimiento para mantener la anestesia. Realice un pellizco en el dedo del pie para verificar que haya suficiente profundidad anestésica.</li>
	<li>Vigile de cerca la respiración de los ratones para garantizar un estado respiratorio adecuado y minimizar su exposición a la anestesia. Aplique gel para los ojos para proteger los ojos durante el procedimiento. 
	NOTA: Los ratones no pudieron recibir analgesia para el dolor postquirúrgico con el fin de evitar efectos analgésicos preventivos sobre el desarrollo del dolor orofacial y la medición del comportamiento del dolor.</li>
	<li>Prepare una jeringa de insulina estéril o una aguja de 31 G para inyectar el adyuvante completo de Freund (CFA) 5 mg/ml en la ATM cubriendo la aguja con una funda hecha de tubo de polietileno estéril, dejando solo 2 mm de la punta de la aguja sobresaliendo, para evitar que se inserte demasiado profundamente.</li>
	<li>Retirar el vello y desinfectar la zona preauricular con povidona yodada y alcohol al 70% después de la anestesia.</li>
	<li>Identifique el arco cigomático palpándolo para localizar el sitio de inyección de la ATM. 
	NOTA: En el extremo posterior del arco cigomático, hay un área deprimida de aproximadamente 2 mm por delante del canal auditivo. El sitio de inyección de la ATM se encuentra alrededor de esta área y no debe extenderse más allá de la línea imaginaria trazada desde el nivel del ojo hasta el canal auditivo (Figura 1A,B).</li>
	<li>Inserte la aguja en el sitio de la inyección, que se encuentra debajo del extremo posterior del arco cigomático. La punta de la aguja debe entrar en contacto con el hueso a una profundidad de 2 mm (Figura 1A,E).</li>
	<li>Inyecte lentamente 10 μL de CFA en la cápsula de ATM y espere al menos 5 segundos antes de retirar gradualmente la aguja. Inyecte la misma cantidad de PBS en la ATM en los ratones de control siguiendo el mismo procedimiento.</li>
	<li>Repita los pasos 1.4-1.8 e inyecte CFA en la ATM opuesta. Observe a los ratones en la almohadilla térmica hasta que estén completamente recuperados. 
	NOTA: CFA es una emulsión de agua en aceite que es relativamente viscosa, por lo tanto, la inyección de CFA y la extracción de la aguja deben ser lentas para evitar fugas de CFA durante la inyección. Para garantizar la precisión de la inyección, practique la inyección administrando 5 μL de tinte verde rápido seguido de la disección del músculo masetero para examinar la precisión de la inyección (Figura 1D, E). Después de la inyección, el tinte verde rápido se difunde rápidamente, por lo que es necesario reducir la cantidad utilizada. Esta reducción no solo mejora la precisión de la inyección, sino que también evita la difusión no deseada en las áreas vecinas. La cantidad y concentración de CFA administrada para inducir TMJOA en ratones se determinaron con base en el protocolo establecido en estudios previos16,17.</li>
</ol>
2. Medición de la fuerza de mordida
<ol>
	<li>Aclimate a los ratones al entorno de prueba colocando el tubo diseñado para sujetarlos en la jaula del ratón durante al menos 1 hora en la sala de comportamiento antes de la prueba.</li>
	<li>Registre la medición inicial de la fuerza de mordida antes de comenzar a inducir inflamación. Entrene a los ratones para que muerdan dentro del entorno de prueba durante 3 días antes de la inyección de CFA o PBS. Registre los valores promedio como valores de entrenamiento de línea base.</li>
	<li>Encienda el software compatible para medir la fuerza de mordida utilizando un transductor de fuerza de mordida que está conectado al programa en la computadora (Figura 2A,B).
	<ol>
		<li>Abra el programa NBIT RSD-V2.6.3 para mostrar el oscilógrafo (Figura 2C).</li>
		<li>Seleccione las opciones de comunicación adecuadas de la siguiente manera: Modo atendido: UDP (Figura 2E). Seleccione la IP local adecuada y busque la IP del dispositivo y el puerto haciendo clic en Buscar. Aparecerán la IP de destino y el puerto de destino, luego haga clic en Abrir.</li>
		<li>Establezca el eje Y haciendo clic en 10 en el rango Y. A continuación, haga clic en Establecer (Figura 2F) . Haga clic en Adquisición.</li>
		<li>Seleccione solo el canal 1 (Ch1) para el gráfico azul y apague otros canales que no estén conectados al dispositivo (Figura 2D).</li>
		<li>Haga clic en Reproducir para comenzar a registrar la fuerza de mordida (Figura 2F). 
		NOTA: Antes de hacer clic en "Reproducir" para comenzar a grabar, el mouse ya debe estar dentro de la jeringa y listo para registrar la fuerza de mordida para obtener un tiempo de grabación preciso.</li>
	</ol>
	</li>
	<li>Coloque el mouse en un tubo de plástico de 50 ml, que ha sido modificado para sujetar el mouse sin apretar. Una amplia abertura en un lado está diseñada específicamente para que la cabeza del ratón se mueva cómodamente.</li>
	<li>Mueva la placa de mordida hacia la boca. 
	NOTA: Los ratones comenzarán a morder automáticamente una vez que la placa de mordida toque su boca. Sin embargo, los ratones podrían tardar unos 30 segundos en empezar a morder en el primer entrenamiento. Después del entrenamiento, los ratones deben comenzar a morder dentro de los 10 segundos. Si los ratones no comienzan a morder dentro de los 10 segundos posteriores al tercer día de entrenamiento, serán excluidos del experimento. Por lo tanto, es importante entrenar a los ratones para que se familiaricen con el entorno de prueba.</li>
	<li>Registre la mordida voluntaria durante 2 min/sesión. A continuación, haga clic en Pausa para detener la grabación y haga clic en Guardar (Figura 2E). Los resultados del registro de la fuerza de mordida se exportarán automáticamente a un archivo de Excel (Archivo complementario 1). 
	NOTA: En el archivo de Excel (Archivo complementario 1), los datos de la columna de la izquierda representan el tiempo de registro. La segunda columna desde la izquierda es la amplitud de la fuerza de mordida en cada punto de tiempo.</li>
	<li>Clasifique los datos de la segunda columna del archivo de Excel de máximo a mínimo. Seleccione los cinco primeros de la amplitud de la fuerza de mordida para un análisis más detallado. 
	NOTA: Las cinco amplitudes superiores deben estar en diferentes puntos temporales, por ejemplo, cada 20 s o 1000 del tiempo de grabación, para evitar seleccionar los datos del mismo evento de mordida.</li>
	<li>Registre el valor de Ch1 (Figura 2D) del programa y reste o sume a los cinco valores superiores de la amplitud de la fuerza de mordida para obtener los valores relativos de la fuerza de mordida de este ensayo. Luego, tome un promedio de estos cinco valores para obtener la fuerza de mordida relativa promedio para un mouse.</li>
	<li>Repita los pasos 2.3.5-2.8 para registrar la fuerza de mordida de los siguientes ratones. 
	NOTA: Para evaluar la fuerza de mordida en la progresión del dolor de la ATM, los valores de la fuerza relativa de la mordida se registran durante el entrenamiento basal y se miden en diferentes puntos de tiempo (como el día 1, 3, 5, 7 y día 12) después de la inyección de CFA.</li>
</ol>
3. Medición del umbral de retirada de la carga
<ol>
	<li>Coloque una jaula de malla de alambre en la jaula de ratones y habitúe a los ratones en una sala de comportamiento durante al menos 1 hora antes de los procedimientos de prueba.</li>
	<li>Entrene a los ratones dentro del entorno de prueba y registre el umbral de extracción de cabeza de referencia durante 3 días antes de la inyección de CFA o PBS.</li>
	<li>Encienda la máquina de prueba electrónica von Frey para medir el umbral de extracción de carga (Figura 3A,B).
	<ol>
		<li>Presione MAX y luego configure la unidad en 500 g, que es una unidad arbitraria establecida por la máquina.</li>
		<li>Establezca cero para comenzar a grabar. El valor de la fuerza en la pantalla debe estar en cero (Figura 3C,D).</li>
	</ol>
	</li>
	<li>Coloque los ratones en la jaula de malla de alambre (Figura 3B). Aplique el filamento von Frey perpendicularmente a la zona de la ATM. 
	NOTA: El área de prueba está al nivel de la conexión entre los ojos y el canal auditivo, aproximadamente 2 mm por delante del canal auditivo. El umbral de retirada de la cabeza se define como la fuerza mínima del filamento de von Frey, que puede provocar un reflejo de retirada.</li>
	<li>Registre el valor de la fuerza aplicada desde el filamento o la intensidad del estímulo (g) que desencadena las reacciones como primera prueba (Figura 3E).</li>
	<li>Establezca el valor de la fuerza en la pantalla en cero y espere 10 segundos mientras el mouse aún está dentro de la jaula.</li>
	<li>Empieza a aplicar el filamento de nuevo y registra el valor.</li>
	<li>Repita la medición (pasos 3.5-3.7) y registre al menos cinco pruebas para cada ratón en un intervalo de 10 s.</li>
	<li>Tome un promedio de estos cinco valores. El valor promedio se considera como el umbral de retiro de cabeza de un mouse. 
	NOTA: La medición del filamento de Von Frey se realizará 5 veces para un ratón. Si hay una variación robusta, la medición se puede repetir hasta 8 veces sin lesiones notables. La fuerza de mordida o la prueba de von Frey pueden comenzar primero. Según nuestra experiencia, no hay una diferencia significativa en cuanto a qué prueba comienza primero. Sin embargo, debe ser constante durante todo el experimento. El tiempo de intervalo entre la fuerza de mordida y von Frey es de al menos 30 min. Después del primer ensayo, los ratones fueron colocados de nuevo en la jaula. Déjelos reposar durante 30 minutos y comience el segundo ensayo.</li>
</ol>

Inflammatory TMJ Pain Mouse Model: Bite Force and Von Frey Filament Assessments

<ol><li>Han, M. D., Lieblich, S. E. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aHan%2C+MD+%22Peterson%27s+principles+of+oral+and+maxillofacial+surgery%22">Peterson's principles of oral and maxillofacial surgery</a>. Miloro, M., Ghali, G. E., Larsen, P. E., Waite, P. , Springer International Publishing. Cham. 1535-1550 (2022).</li>
<li>Ferrillo, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pain+management+and+rehabilitation+for+central+sensitization+in+temporomandibular+disorders%3A+A+comprehensive+review%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Mol+Sci%22%5BJournal%5D)">Pain management and rehabilitation for central sensitization in temporomandibular disorders: A comprehensive review.</a> Int J Mol Sci. 23 (20), 12164(2022).</li>
<li>Schiffman, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Diagnostic+criteria+for+temporomandibular+disorders+%28DC%2FTMD%29+for+clinical+and+research+applications%3A+Recommendations+of+the+international+RDC%2FTMD+consortium+network+and+orofacial+pain+special+interest+group%5BTitle%5D)+AND+%22J+Oral+Facial+Pain+Headache%22%5BJournal%5D)">Diagnostic criteria for temporomandibular disorders (DC/TMD) for clinical and research applications: Recommendations of the international RDC/TMD consortium network and orofacial pain special interest group.</a> J Oral Facial Pain Headache. 28 (1), 6-27 (2014).</li>
<li>Kalladka, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Temporomandibular+joint+osteoarthritis%3A+Diagnosis+and+long-term+conservative+management%3A+A+topic+review%5BTitle%5D)+AND+%22J+Indian+Prosthodont+Soc%22%5BJournal%5D)">Temporomandibular joint osteoarthritis: Diagnosis and long-term conservative management: A topic review.</a> J Indian Prosthodont Soc. 14 (1), 6-15 (2014).</li>
<li>Yi, Y., Zhou, X., Xiong, X., Wang, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neuroimmune+interactions+in+painful+TMD%3A+Mechanisms+and+treatment+implications%5BTitle%5D)+AND+%22J+Leukoc+Biol%22%5BJournal%5D)">Neuroimmune interactions in painful TMD: Mechanisms and treatment implications.</a> J Leukoc Biol. 110 (3), 553-563 (2021).</li>
<li>Chung, M. K., Wang, S., Alshanqiti, I., Hu, J., Ro, J. Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+degeneration-pain+relationship+in+the+temporomandibular+joint%3A+Current+understandings+and+rodent+models%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Pain+Res+%28Lausanne%29%22%5BJournal%5D)">The degeneration-pain relationship in the temporomandibular joint: Current understandings and rodent models.</a> Front Pain Res (Lausanne). 4, 1038808(2023).</li>
<li>Zhao, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Animal+models+of+temporomandibular+joint+osteoarthritis%3A+Classification+and+selection%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Physiol%22%5BJournal%5D)">Animal models of temporomandibular joint osteoarthritis: Classification and selection.</a> Front Physiol. 13, 859517(2022).</li>
<li>Deuis, J. R., Dvorakova, L. S., Vetter, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Methods+used+to+evaluate+pain+behaviors+in+rodents%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Mol+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Methods used to evaluate pain behaviors in rodents.</a> Front Mol Neurosci. 10, 284(2017).</li>
<li>Kogawa, E. M., Calderon, P. S., Lauris, J. R., Araujo, C. R., Conti, P. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Evaluation+of+maximal+bite+force+in+temporomandibular+disorders+patients%5BTitle%5D)+AND+%22J+Oral+Rehabil%22%5BJournal%5D)">Evaluation of maximal bite force in temporomandibular disorders patients.</a> J Oral Rehabil. 33 (8), 559-565 (2006).</li>
<li>Ferrier, J., Marchand, F., Balayssac, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Assessment+of+mechanical+allodynia+in+rats+using+the+electronic+von+Frey+test%5BTitle%5D)+AND+%22Bio-protocol%22%5BJournal%5D)">Assessment of mechanical allodynia in rats using the electronic von Frey test.</a> Bio-protocol. 6 (18), e1933(2016).</li>
<li>Guo, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Voluntary+biting+behavior+as+a+functional+measure+of+orofacial+pain+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Physiol+Behav%22%5BJournal%5D)">Voluntary biting behavior as a functional measure of orofacial pain in mice.</a> Physiol Behav. 204, 129-139 (2019).</li>
<li>Cao, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Alleviation+of+temporomandibular+joint+osteoarthritis+by+targeting+RIPK1-mediated+inflammatory+signalling%5BTitle%5D)+AND+%22J+Cell+Mol+Med%22%5BJournal%5D)">Alleviation of temporomandibular joint osteoarthritis by targeting RIPK1-mediated inflammatory signalling.</a> J Cell Mol Med. 28 (5), e17929(2023).</li>
<li>Xu, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Peripheral+and+central+substance+p+expression+in+rat+cfa-induced+TMJ+synovitis+pain%5BTitle%5D)+AND+%22Mol+Pain%22%5BJournal%5D)">Peripheral and central substance p expression in rat cfa-induced TMJ synovitis pain.</a> Mol Pain. 15, 1744806919866340(2019).</li>
<li>Morel, M., Ruscitto, A., Pylawka, S., Reeve, G., Embree, M. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Extracellular+matrix+turnover+and+inflammation+in+chemically-induced+TMJ+arthritis+mouse+models%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Extracellular matrix turnover and inflammation in chemically-induced TMJ arthritis mouse models.</a> PLoS One. 14 (10), e0223244(2019).</li>
<li>Dias, F. C., Wang, Z., Scapellato, G., Chen, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Silencing+of+TRPV4-expressing+sensory+neurons+attenuates+temporomandibular+disorders+pain%5BTitle%5D)+AND+%22Molecular+Pain%22%5BJournal%5D)">Silencing of TRPV4-expressing sensory neurons attenuates temporomandibular disorders pain.</a> Molecular Pain. 19, 17448069231185696(2023).</li>
<li>Chen, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Temporomandibular+joint+pain%3A+A+critical+role+for+TRPV4+in+the+trigeminal+ganglion%5BTitle%5D)+AND+%22PAIN%22%5BJournal%5D)">Temporomandibular joint pain: A critical role for TRPV4 in the trigeminal ganglion.</a> PAIN. 154 (8), 1295-1304 (2013).</li>
<li>Bai, Q., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Tnf%CE%B1+in+the+trigeminal+nociceptive+system+is+critical+for+temporomandibular+joint+pain%5BTitle%5D)+AND+%22Mol+Neurobiol%22%5BJournal%5D)">Tnfα in the trigeminal nociceptive system is critical for temporomandibular joint pain.</a> Mol Neurobiol. 56 (1), 278-291 (2019).</li>
<li>Ohrbach, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Clinical+orofacial+characteristics+associated+with+risk+of+first-onset+TMD%3A+The+oppera+prospective+cohort+study%5BTitle%5D)+AND+%22J+Pain%22%5BJournal%5D)">Clinical orofacial characteristics associated with risk of first-onset TMD: The oppera prospective cohort study.</a> J Pain. 14 (12 Suppl), T33-T50 (2013).</li>
<li>Hansdottir, R., Bakke, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Joint+tenderness%2C+jaw+opening%2C+chewing+velocity%2C+and+bite+force+in+patients+with+temporomandibular+joint+pain+and+matched+healthy+control+subjects%5BTitle%5D)+AND+%22J+Orofac+Pain%22%5BJournal%5D)">Joint tenderness, jaw opening, chewing velocity, and bite force in patients with temporomandibular joint pain and matched healthy control subjects.</a> J Orofac Pain. 18 (2), 108-113 (2004).</li>
<li>O'neill, T. W., Felson, D. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mechanisms+of+osteoarthritis+%28OA%29+pain%5BTitle%5D)+AND+%22Curr+Osteoporos+Rep%22%5BJournal%5D)">Mechanisms of osteoarthritis (OA) pain.</a> Curr Osteoporos Rep. 16 (5), 611-616 (2018).</li>
<li>Knuutila, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Association+of+temporomandibular+disorders+with+pain+sensitivity%3A+A+cohort+study%5BTitle%5D)+AND+%22Eur+J+Pain%22%5BJournal%5D)">Association of temporomandibular disorders with pain sensitivity: A cohort study.</a> Eur J Pain. 26 (1), 143-153 (2022).</li>
<li>Sperry, M. M., Kartha, S., Winkelstein, B. A., Granquist, E. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Experimental+methods+to+inform+diagnostic+approaches+for+painful+TMJ+osteoarthritis%5BTitle%5D)+AND+%22J+Dent+Res%22%5BJournal%5D)">Experimental methods to inform diagnostic approaches for painful TMJ osteoarthritis.</a> J Dent Res. 98 (4), 388-397 (2019).</li>
<li>Xu, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Activation+of+voltage-gated+KCNQ%2FKV7+channels+by+anticonvulsant+retigabine+attenuates+mechanical+allodynia+of+inflammatory+temporomandibular+joint+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Mol+Pain%22%5BJournal%5D)">Activation of voltage-gated KCNQ/KV7 channels by anticonvulsant retigabine attenuates mechanical allodynia of inflammatory temporomandibular joint in rats.</a> Mol Pain. 6, 49(2010).</li>
<li>Schmid-Schwap, M., Bristela, M., Kundi, M., Piehslinger, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sex-specific+differences+in+patients+with+temporomandibular+disorders%5BTitle%5D)+AND+%22J+Orofac+Pain%22%5BJournal%5D)">Sex-specific differences in patients with temporomandibular disorders.</a> J Orofac Pain. 27 (1), 42-50 (2013).</li>
<li>Delay, L., Gonçalves Dos Santos, G., Dias, E. V., Yaksh, T. L., Corr, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sexual+dimorphism+in+the+expression+of+pain+phenotype+in+preclinical+models+of+rheumatoid+arthritis%5BTitle%5D)+AND+%22Rheum+Dis+Clin+North+Am%22%5BJournal%5D)">Sexual dimorphism in the expression of pain phenotype in preclinical models of rheumatoid arthritis.</a> Rheum Dis Clin North Am. 47 (2), 245-264 (2021).</li>
<li>Sannajust, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Females+have+greater+susceptibility+to+develop+ongoing+pain+and+central+sensitization+in+a+rat+model+of+temporomandibular+joint+pain%5BTitle%5D)+AND+%22Pain%22%5BJournal%5D)">Females have greater susceptibility to develop ongoing pain and central sensitization in a rat model of temporomandibular joint pain.</a> Pain. 160 (9), 2036-2049 (2019).</li>
<li>Wang, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Spontaneous+and+bite-evoked+muscle+pain+are+mediated+by+a+common+nociceptive+pathway+with+differential+contribution+by+trpv1%5BTitle%5D)+AND+%22J+Pain%22%5BJournal%5D)">Spontaneous and bite-evoked muscle pain are mediated by a common nociceptive pathway with differential contribution by trpv1.</a> J Pain. 18 (11), 1333-1345 (2017).</li>
<li>Suttle, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sensory+neuron-TRPV4+modulates+temporomandibular+disorder+pain+via+CGRP+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22J+Pain%22%5BJournal%5D)">Sensory neuron-TRPV4 modulates temporomandibular disorder pain via CGRP in mice.</a> J Pain. 24 (5), 782-795 (2023).</li>
</ol>

Los autores declaran que no hay intereses financieros en competencia que puedan percibirse como que afecten la objetividad de estos estudios.

Un TMJOA inducido por inflamación en ratones sirve como modelo animal para investigar los mecanismos de dolor en TMJOA, ya que la inyección intraarticular de CFA puede inducir dolor e inflamación, lo que resulta en sinovitis, pérdida ósea y remodelación del cartílago. Estas condiciones se asemejan en cierto grado a la patología observada en humanos y contribuyen a las principales características de la ATM, como el dolor articular y la inflamación en los pacientes13,18. Los síntomas dolorosos asociados con TMJOA son la razón principal por la que los pacientes buscan ayuda médica. Ser capaz de detectar la presencia y la gravedad del dolor en modelos animales brinda oportunidades para investigar la patogénesis del dolor y posibles nuevos tratamientos. Este informe describió el método para evaluar el comportamiento del dolor de la ATM a través de mediciones de la fuerza de mordida y el umbral de retirada de la cabeza. La ATM es una de las estructuras clave involucradas en todo el movimiento de la mandíbula, incluida la apertura y cierre de la boca, la mordida y la masticación. Además, la manifestación clínica dominante de TMD es el dolor asociado con la masticación o la masticación. Los pacientes con TMD con dolor de ATM generalmente tienen una fuerza de mordida reducida en comparación con las personas sanas 9,19. De acuerdo con los estudios clínicos, la inyección intraarticular de CFA en modelos de ratón puede conducir a una disminución significativa de la fuerza de mordida que podría considerarse equivalente a los síntomas relacionados con el dolor y la disfunción de la ATM en humanos11.
El diagnóstico clínico del dolor de la ATM implica palpar la ATM y registrar la gravedad del dolor según el informe del paciente. Este procedimiento es similar a la prueba de filamento de von Frey, que mide la fuerza umbral más baja que conduce al comportamiento de retirada de la cabeza. La retirada de la cabeza indica respuesta al dolor y estado de hiperalgesia de la región orofacial20. Un umbral de retirada de la cabeza reducido puede indicar sensibilidad articular y un umbral de dolor por presión más bajo en pacientes con dolor de ATM 18,19,21. En consecuencia, la prueba de filamento de von Frey es útil para evaluar el umbral de dolor por presión para TMD. En el modelo de ratón TMJOA inducido por CFA, la medición de la fuerza de mordida y el umbral de retirada de la cabeza se ha validado como un método confiable para evaluar el comportamiento del dolor22.
La mayoría de los resultados conductuales son algo subjetivos. Al igual que muchos otros ensayos conductuales, la variación siempre es una preocupación al medir el dolor orofacial. Para lograr el objetivo de mediciones confiables, reproducibles y sensibles del dolor de la ATM, es importante tener en cuenta las limitaciones y las posibles soluciones en nuestro diseño experimental, ejecución e interpretación de resultados. Una advertencia es que la reducción de la fuerza de mordida podría ser causada por una disfunción de la ATM que no es necesaria por el dolor articular. Por ejemplo, los músculos juegan un papel crucial en el movimiento de la ATM y la mordida. La reducción de la fuerza de mordida podría deberse a una disfunción muscular en lugar de dolor en las articulaciones. Sin embargo, los hallazgos radiográficos e histológicos se pueden utilizar para diferenciar el dolor de la ATM inducido por CFA del dolor muscular. El dolor de la ATM por la inyección de CFA conducirá posteriormente a la pérdida de cartílago y hueso, mientras que el dolor muscular inducido por CFA es menos probable que cause pérdida ósea16.
Cabe señalar que este estudio utilizó von Frey electrónico para medir el umbral de retirada de la cabeza en una escala continua, lo que puede minimizar el número de aplicaciones de fuerza y, por lo tanto, prevenir lesiones en la piel del rostro en el área de prueba23. Se ha informado que existen diferencias notables en los valores del umbral de retiro obtenidos de von Frey manual y electrónico. Por lo general, el umbral de retiro medido con von Frey electrónico tiende a ser más alto que el medido con von Frey manual 8,10. La punta de plástico de nuestro von Frey electrónico no está afilada para evitar lesiones en la piel del rostro, lo que podría dar lugar a valores diferentes a los de los filamentos manuales de von Frey. Además, la unidad "g" en la prueba electrónica de von Frey no es una fuerza real sino una unidad arbitraria establecida por la máquina. Además, para minimizar el dolor de la piel, se eliminó el vello del lugar de la inyección antes de comenzar el entrenamiento inicial. Este enfoque debería reducir los factores de confusión del dolor y la sensibilidad de la piel y prevenir la posible contaminación por infección. Mientras tanto, PBS también se inyectó en el grupo simulado bajo el mismo procedimiento para excluir al máximo los efectos de confusión del dolor de la piel y para garantizar que la medición sea del dolor articular. Aunque la inyección intraarticular de CFA es específica del área de la ATM, es probable que la inflamación tisular inducida por CFA no se limite a la articulación en sí, lo que potencialmente contribuye a cierta respuesta al dolor, incluida la reducción de la fuerza de mordida y la disminución del umbral de retirada de la cabeza. En general, reconocemos que no podemos excluir por completo el efecto secundario del dolor cutáneo o muscular derivado de la inflamación de la ATM, que podría contribuir al resultado general.
Los valores de fuerza de mordida y umbral de extracción de la cabeza obtenidos de cada instrumento pueden ser diferentes, ya que tienen diferentes unidades, parámetros y protocolos que se configuran específicamente para ensayos individuales. Aunque se utilizaron ratones hembra en este estudio, los machos también se pueden usar para estudiar la TMJOA dolorosa. Sin embargo, existe dimorfismo sexual en los umbrales nociceptivos basales de los roedores. Los hombres y las mujeres exhibieron diversas experiencias de dolor, que pueden caracterizarse por distintas respuestas fisiológicas y conductuales a estímulos dolorosos 24,25,26. Además, los ratones machos tienden a tener un umbral de retirada de la cabeza y una fuerza de mordida más altos que las hembras. La edad y el peso corporal también afectan los valores de fuerza de mordida 11,16,27. Un estudio anterior informó que hubo una correlación positiva entre la fuerza de mordida y el peso corporal durante las dos primeras semanas de observación11. Los valores de fuerza de mordida para ratones hembra C57BL / 6 a las 8 semanas de edad al inicio de este estudio oscilaron entre 4.5 y 5.5 N (Figura 4A). Después de la inyección de CFA, la reducción de la fuerza de mordida a 2-3 N en la fase temprana es consistente con los estudios previos que involucran la inducción de TMJOA utilizando la sustancia inflamatoria MIA6. Sin embargo, el uso del cambio porcentual en la fuerza de mordida puede servir como un medio para validar la consistencia de los hallazgos con otros estudios previos, ya que cada laboratorio puede tener diferentes instrumentos y protocolos, lo que resulta en valores diferentes27,28.
Para reducir la variación en la medición del comportamiento del dolor, el paso crítico es validar y garantizar la consistencia en el entrenamiento de los ratones al inicio del estudio. La variación puede surgir de las diferencias en el sexo, el peso corporal y la edad, todo lo cual puede afectar las mediciones de la fuerza de mordida y el umbral de retirada de la cabeza. Por ejemplo, las hembras de 8 semanas suelen pesar alrededor de 19-20 g; los valores relativos de fuerza de mordida generalmente se encuentran dentro del rango de 4.5-5.5 N según los datos del entrenamiento inicial. Por lo tanto, los ratones con valores promedio de fuerza de mordida fuera de los rangos de entrenamiento de referencia deben excluirse del experimento. Del mismo modo, el umbral de retirada de la cabeza durante el entrenamiento inicial oscila entre 22 y 35 g. Los ratones con un umbral de extracción de la cabeza fuera de este rango deben excluirse del experimento. En general, es importante establecer el punto de referencia de la fuerza de mordida y el umbral de retirada de la cabeza durante el entrenamiento de los animales antes de las pruebas formales de comportamiento.

Los trastornos temporomandibulares (TTM) se refieren al dolor y la disfunción de las estructuras musculoesqueléticas y neuromusculares que afectan a las articulaciones temporomandibulares (ATM), los músculos masticatorios y las estructuras asociadas. La ATM es la articulación sinovial más utilizada en la vida diaria. Alrededor del 80% de los pacientes con TTM muestran signos y síntomas de enfermedades de la ATM, lo que puede afectar significativamente su calidad de vida1,2,3. Además, la osteoartritis de la ATM (TMJOA) es un subtipo importante de TTM y se define como una enfermedad articular degenerativa progresiva. Los pacientes con TMJOA a menudo presentan dolor en las articulaciones. La ATM dolorosa es una de las principales razones por las que los pacientes buscan tratamiento4,5. Sin embargo, existe una necesidad médica insatisfecha de tratamientos más eficaces para aliviar la dolorosa TMJOA. La comprensión de la TMJOA dolorosa es crucial para el desarrollo de fármacos modificadores de la enfermedad (DMOAD).
Dado que obtener muestras clínicas de pacientes con dolor de TMJOA es difícil, los modelos animales se han convertido en herramientas esenciales para estudiar las patologías de TMJOA6,7. La integración de la evaluación del comportamiento del dolor puede proporcionar información valiosa sobre sus mecanismos subyacentes y posibles nuevas intervenciones terapéuticas. La medición del dolor en modelos animales es un desafío debido a la naturaleza subjetiva de la percepción y expresión del dolor en sujetos no humanos6,8. Relativamente pocos estudios han utilizado ensayos de comportamiento del dolor en la ATM en comparación con las articulaciones no craneofaciales. Por lo tanto, es importante definir métodos para evaluar el comportamiento del dolor para capturar de manera confiable la experiencia de dolor en modelos animales de TMJOA.
En este artículo, hemos ilustrado dos métodos distintos diseñados para evaluar el dolor en modelos de ratón de TMJOA: la medición de la fuerza de mordida y la prueba del filamento de von Frey. La coordinación de la mandíbula y los músculos es esencial para la función masticatoria, y el dolor asociado con la ATM y la función muscular puede reducir la fuerza de la mordida en pacientes con TMD3,9. Por lo tanto, el comportamiento relacionado con el dolor secundario a la función masticatoria se puede evaluar mediante la medición de la fuerza de mordida, que refleja eficazmente la función de la ATM relacionada con el dolor articular. Además, la prueba de filamentos de von Frey mide el umbral de retirada de la cabeza para evaluar la sensibilidad mecánica. En este método, los filamentos de von Frey se aplican con una fuerza creciente a la piel de los ratones hasta que se observa una respuesta de retirada. La fuerza que desencadena la respuesta de retirada de la cabeza se registra como el umbral de retirada de la cabeza. Esta técnica es ampliamente utilizada para evaluar la alodinia mecánica, indicando la sensibilización periférica de los nociceptores asociados con el dolor orofacial8,10,11.
Aunque estudios previos han utilizado estos métodos para medir el comportamiento del dolor, ninguno ha proporcionado protocolos detallados para la implementación directa o combinado estos métodos para evaluar el dolor de la ATM inducido por la inyección intraarticular de CFA12,13,14,15. Por lo tanto, estos métodos se desarrollan y validan para demostrar su sensibilidad y reproducibilidad en la medición de la gravedad y la progresión del dolor. Estos dos enfoques complementarios proporcionan validación cruzada para la evaluación de la conducta del dolor. Es importante destacar que los resultados conductuales del dolor de estas técnicas pueden correlacionarse con las características histológicas y patológicas en ratones TMJOA dolorosos14,16. Además, la medición de la fuerza de mordida proporciona datos valiosos para evaluar la función de la mandíbula, mientras que la prueba de von Frey mide la nocicepción mecánica8. Por lo tanto, estos protocolos se pueden aplicar para evaluar el comportamiento del dolor en diversas condiciones de dolor orofacial, incluido el dolor odontogénico, el dolor de la ATM, el dolor muscular y el dolor neuropático.

<table><tbody><tr><td>Transductor de fuerza de mordida&nbsp;</td><td>Nanjing Shen-yuan-sheng Tecnología inteligente Co</td><td>NBIT-YFM-1-100</td><td>0&ndash; 100 N, un transductor de fuerza de mordida conectado al programa NB IT RSD-V2.6.3 (colector de datos de NST2000) de Nanjing Shen-yuan-sheng Intelligent Technology Co., PR. China&nbsp;</td></tr><tr><td>Adyuvante completo de Freund (CFA)</td><td>Chondrex Inc</td><td>7023</td><td>CFA 5 mg/mL</td></tr><tr><td>Fluoriso</td> de<td>isofluorano</td><td>MWI501017</td><td></td></tr><tr><td>programa NBIT RSD-V2.6.3</td><td>Nanjing Shen-yuan-sheng Intelligent Technology Co</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Tubo de polietileno</td><td>Scientific Commodities Inc</td><td>NC0923369</td><td>Tubo de PE 0,38 x 1,09 mm</td></tr><tr><td>Analgesómetro Von Frey</td> de 100 pies <td>Bioseb</td><td>BIO-EVF4</td><td>Eléctrico Von Frey</td></tr></tbody></table>

medición del dolor en la articulación temporomandibular mediante ensayos de fuerza de mordida y filamentos de von frey en ratones

Temporomandibular Joint Pain Measurement by Bite Force and Von Frey Filament Assays in Mice

El dolor de la articulación temporomandibular (ATM) y la osteoartritis (OA) son trastornos comunes y debilitantes que perjudican la calidad de vida de los pacientes. Los mecanismos que impulsan el dolor relacionado con las enfermedades son poco conocidos, y los tratamientos actuales no proporcionan efectos terapéuticos efectivos y a largo plazo. Además, la evaluación del dolor en la investigación, en particular el dolor orofacial, plantea varios desafíos que complican los estudios tanto en el ámbito clínico como en el de las ciencias básicas. Por lo tanto, hemos establecido un modelo de ratón de dolor inflamatorio de la ATM mediante inyección intraarticular de CFA (adyuvante completo de Freund) y hemos evaluado los comportamientos de dolor mediante la medición de la fuerza de mordida y la prueba de filamento de von Frey. Los ratones con inyección de CFA mostraron comportamientos de dolor orofacial en comparación con la inyección de PBS, incluida la reducción de la fuerza de mordida y el umbral de retirada de la cabeza en la prueba de filamento de von Frey. Estos métodos son relativamente fáciles de ejecutar para tener resultados reproducibles y pueden extenderse potencialmente a estudios de dolor para otros modelos de enfermedades relacionadas con los trastornos de la ATM. Juntos, la fuerza de mordida y las pruebas de filamentos de von Frey son fiables para medir el dolor orofacial, como se demostró en modelos de ratones TMJOA dolorosos inducidos por inyecciones de CFA.

El dolor inducido por inflamación en la ATM-OA se induce mediante la inyección de CFA en la ATM. Como las ATM derecha e izquierda deben coordinarse durante el movimiento de la mandíbula, se inyecta CFA en ambas articulaciones para evaluar el dolor en la ATM. Al grupo control se le administrarán inyecciones de PBS. Se utilizan la media ± EE y la prueba t de Student para analizar estadísticamente las diferencias en el comportamiento del dolor entre los grupos CFA y control.
Las mediciones de la fuerza de mordida y del umbral de retirada de la cabeza se utilizan para examinar si los ratones experimentan dolor en la articulación temporomandibular (ATM). Los ratones tratados con CFA mostraron reducciones significativas tanto en los niveles de fuerza de mordida como en los umbrales de retirada de la cabeza el día 1 después de la inyección de CFA en comparación con sus niveles basales, con aumentos graduales observados en puntos temporales posteriores. En contraste, el grupo control inyectado con PBS no mostró cambios significativos en la fuerza de mordida ni en las respuestas a las pruebas con filamentos von Frey en comparación con su entrenamiento basal (Figura 4A-D). Estos resultados sugieren que los ratones que recibieron inyecciones de CFA experimentaron dolor en la ATM con alodinia mecánica y función masticatoria deteriorada.
<img alt="Diagramas de disección del cráneo de rata; arco cigomático, músculo masetero, conducto auditivo; estudio anatómico." class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/67203/67203fig01.jpg" data-altupdatedat="1788304762000" data-alt="Figure 1"> 
Figura 1: Inyección intraarticular en la ATM en modelo murino. (A) El ratón fue anestesiado con isoflurano mediante un cono nasal. La línea amarilla indica la línea imaginaria desde el nivel del ojo hasta el conducto auditivo. (B) Punto de referencia anatómico para la inyección. La línea discontinua negra indica el arco cigomático, que puede palparse a través de la piel. El área deprimida para el sitio de inyección se indicó con una marca roja. (C) La cabeza del cóndilo de la ATM puede observarse al retirar el músculo masetero. (D,E) Se inyectó colorante verde rápido para indicar la cabeza del cóndilo de la ATM. Barra de escala: 1 mm. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67203/67203fig01large.jpg" target="_blank">Haga clic aquí para ver una versión más grande de esta figura.</a>
<img alt="Configuración de espectroscopía con interfaz de computadora, gráfico de datos de señal y opciones de análisis para el estudio de emisión." class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/67203/67203fig02.jpg" data-altupdatedat="1788304762000" data-alt="Figure 2"> 
Figura 2: Grabación de la medición de la fuerza mordedura. (A,B) Máquina de fuerza mordedura y computadora para registrar la fuerza mordedura. (C) La amplitud de la grabación de la fuerza mordedura durante la medición. (D-F) Parámetros en el programa para registrar la fuerza mordedura. (D'-F') Ampliaciones de cada sección de parámetro. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67203/67203fig02large.jpg" target="_blank">Haga clic aquí para ver una versión más grande de esta figura.</a>
<img alt="Configuración para la medición del dolor; filamento de Von Frey, pantalla del dinamómetro digital; análisis de equilibrio estático." class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/67203/67203fig03.jpg" data-altupdatedat="1788304762000" data-alt="Figure 3"> 
Figura 3: Analgesiómetro electrónico de Von Frey. (A,B) Instrumentos con filamento de Von Frey. (C) La pantalla que aparece cuando se enciende el equipo. (D) Ajuste el equipo a cero para comenzar la grabación. (E) La cantidad de fuerza aplicada por Von Frey para desencadenar la respuesta de retirada de la cabeza. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67203/67203fig03large.jpg" target="_blank">Haga clic aquí para ver una versión más grande de esta figura.</a>
<img alt="Gráficos del análisis de la fuerza de mordida y del umbral de retirada tras la inyección de CFA y PBS; resultados comparativos en puntos temporales." class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/67203/67203fig04.jpg" data-altupdatedat="1788304762000" data-alt="Figura 4"> 
Figura 4Evaluación del comportamiento relacionado con el dolor en la osteoartritis inflamatoria inducida por CFA en la ATM en comparación con el grupo control tratado con PBS. (A,B) Medición de la fuerza mordedura y el porcentaje de cambio de los valores de fuerza mordedura en comparación con la línea base.C,D) Medición del umbral de retirada de la cabeza mediante la prueba con filamentos von Frey y el porcentaje de cambio del umbral de retirada de la cabeza en comparación con el valor basal. Los valores representan la media ± EE, prueba t de Student t-prueba. *p &lt; 0.05, **p &lt; 0.01, ***p &lt; 0.001, ****p &lt; 0,0001. n = 6 ratones para el grupo PBS, n = 8 ratones para el grupo CFA. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67203/67203fig04large.jpg" target="_blank">Haga clic aquí para ver una versión más grande de esta figura.</a>
Archivo suplementario 1: Medición y análisis de la fuerza de mordida. La columna A indica el punto temporal de cada evento de mordida, mientras que la columna B registra la amplitud o valor de la fuerza de mordida. Esta tabla presenta los datos organizados según el valor absoluto máximo de la fuerza de mordida. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67203/Bite%20force%20measurement%20and%20analysisv2.zip" target="_blank">Haga clic aquí para descargar este archivo.</a>

Este protocolo describe cómo la medición de la fuerza de mordida y el umbral de retirada de la cabeza puede capturar el comportamiento del dolor en el dolor de la articulación temporomandibular (ATM) inflamatorio inducido por el adyuvante completo de Freund (CFA).

Medición del dolor en la articulación temporomandibular mediante ensayos de fuerza de mordida y filamentos de von Frey en ratones

Temporomandibular joint (TMJ) pain and osteoarthritis (OA) are common and debilitating disorders that impair patients' quality of life. The mechanisms ...

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Research

Investigación

JoVE Journal

Behavior

Comportamiento

Se presenta un sistema operante fácil de usar y de alto rendimiento para la evaluación de los comportamientos de dolor en roedores despierto, consciente. El Dispositivo de Evaluación del Dolor Orofacial (OPAD) puede evaluar el dolor a través de un paradigma de recompensa / conflicto proporcionando así una forma más humana de las pruebas. Este protocolo dará más datos clínicos relevantes y de la traducción de los roedores.

El uso del Dispositivo de Evaluación Dolor Orofacial operante (OPAD) para medir los cambios en el comportamiento nociceptivo

Un alargamiento en duración de la comida representa comportamiento nociceptivo orofacial en roedores similares al comportamiento de guarda de seres humanos con dolor orofacial. Comer es un comportamiento que no requiere entrenamiento ni manipulación animal, requiere participación cortical y no compite con otros comportamientos inducidos experimentalmente, distinguiendo este ensayo de mediciones alternativas de reflejos u operandos.

Duración de la comida como medida de las respuestas nociceptivas orofaciales en roedores

En este estudio, se discutirá el uso de un dispositivo de carga en situ junto con la tomografía de rayos micro-X calculado para la biomecánica conjuntos fibrosos. Lecturas experimentales identificables con un cambio general en la biomecánica articular serán los siguientes: 1) fuerza reaccionaria contra el desplazamiento, es decir, el desplazamiento del diente en el alveolo y su respuesta reaccionaria a la carga, 2) en tres dimensiones (3D) la configuración espacial y la morfometría, es decir...

In situ carga de compresión y de imágenes no invasiva correlativa del hueso-ligamento periodontal de dientes fibroso Conjunta

Las mediciones electrónicas de von Frey son una alternativa eficaz y mejorada a los filamentos clásicos de von Frey, ya que permiten una medición rápida y precisa de los cambios en los umbrales de retirada mecánica de los roedores a los estímulos de presión aplicados continuamente antes y después de un evento inflamatorio.

Medición de los cambios en la sensibilidad táctil en la pata trasera de ratones utilizando un aparato electrónico de von Frey

La osteoartritis (OA) o enfermedad degenerativa de las articulaciones, es una condición debilitante asociada con el dolor que queda sólo parcialmente controlado por analgésicos disponibles. Los modelos animales se están desarrollando para mejorar nuestra comprensión de los mecanismos del dolor relacionado con la OA. A continuación se describe la metodología para el modelo monoiodoacetate del dolor de la osteoartritis en el ratón.

El Modelo Monoiodoacetate del dolor de la osteoartritis en el ratón

Este manuscrito presenta métodos para el análisis morfométrico y cambios celulares en el cóndilo mandibular de roedores.

Un método de análisis celular para el cóndilo Mandibular murino y morfométricos

El síntoma más notable de la migraña es el dolor de cabeza severo, y se plantea la hipótesis de que esto está mediado por neuronas sensoriales que inervan las meninges. Aquí, presentamos un método para aplicar localmente sustancias a la duramadre de una manera mínimamente invasiva mientras se utiliza la hipersensibilidad facial como resultado.

Estimulación dural y pruebas periorbitarias de von Frey en ratones como modelo preclínico de dolor de cabeza

Este protocolo describe la evaluación de la hipersensibilidad mecánica en un modelo de rata de dolor orofacial neuropático utilizando un dispositivo de evaluación del dolor orofacial basado en operantes.

Evaluación de la hipersensibilidad mecánica inducida por lesión nerviosa en ratas mediante un ensayo de dolor operante orofacial

La microdureza es una propiedad mecánica y un parámetro informativo para evaluar la fisiopatología de los tejidos duros. Aquí, demostramos un protocolo estandarizado (preparación de muestras, pulido, superficie plana y sitios de indentación) para el análisis de microdureza en dientes y huesos alveolares en modelos de enfermedades orales en roedores, a saber, fluorosis dental y resorción ósea periodontal inducida por ligaduras.

Mediciones de microdureza en hueso dental y alveolar en modelos de enfermedades orales en roedores

Aquí, presentamos un protocolo para estudiar el movimiento dental ortodóncico (OTM), que sirve como modelo adecuado para investigar los mecanismos de adaptación ósea, resorción radicular y la respuesta de las células óseas a estímulos mecánicos. Esta guía completa proporciona información detallada sobre el modelo OTM, la adquisición de microtomografías computarizadas y el análisis posterior.

Estudio del movimiento dental ortodóncico en ratones

El protocolo describe cómo medir la hiperalgesia de rodilla en ratones. Mostramos ejemplos en modelos murinos de dolor agudo de rodilla, así como en modelos de osteoartritis (OA).

Evaluación de la hiperalgesia de rodilla en ratones mediante la medición de la aplicación de presión

Aprende a medir el dolor en la articulación temporomandibular mediante ensayos de fuerza de mordida y filamentos de von Frey en ratones. Este protocolo estandarizado evalúa comportamientos dolorosos inducidos por CFA.

Medición del dolor en la articulación temporomandibular mediante ensayos de fuerza de mordida y filamentos de von Frey en ratones (Video) | JoVE Journal

Medición del dolor en la articulación temporomandibular mediante ensayos de fuerza de mordida y filamentos de von Frey en ratones

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